3. VẬT LIỆU, đỊA đIỂM, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.5 Nghiên cứu ựặc ựiểm sinh học của nấm F.fujikuroi trên lúa.
Thắ nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường ựến sự phát triển của tản nấm F. fujikuroi.
Tiến hành nuôi cấy nấm trên 4 môi trường khác nhau là WA 2%, PCA, CLA, PGA .
- Chỉ tiêu theo dõi: đường kắnh tản nấm (mm) sau 1, 2, 3, 4 ngày nuôi cấy, từ ựó so sánh ựể rút ra môi trường thắch hợp nhất cho sự phát triển của tản nấm.
* Thắ nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến sự phát triển của tản nấm F. fujikuroi.
Thắ nghiệm ựược tiến hành trên môi trường PGA (môi trường thắch hợp nhất cho nấm) ở các ngưỡng nhiệt ựộ 200C, 250C, 300C, 350C.
- Chỉ tiêu theo dõi: đo ựường kắnh tản nấm (mm) sau 1, 2, 3, 4 ngày nuôi cấy, từ ựó so sánh rút ra ngưỡng nhiệt ựộ thuận lợi cho sự phát triển của nấm F. fujikuroi và ngưỡng nhiệt ựộ ứng chế sự phát triển của nấm F. fujikuroi.
* Thắ nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng của pH môi trường ựến sự phát triển của tản nấm F. fujikuroi.
Nuôi cấy nấm ựã phân lập trên các ngưỡng pH 5,0; 6,0; 7,0 và 7,5.
-Cách ựo pH: Tạo dịch chiết PGA cho vào 4 cốc ứng với 4 ngưỡng pH khác nhau. Sau ựể nguội và ựem ựo pH.
- Tiến hành ựo pH:
Mỗi cốc môi trường PGA cho viên khuấy từ vào ựể khuấy môi trường tan ựều. Cho máy ựo pH vào cốc, bật công tắc ựiện cho quay. Khi nhìn thấy
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 27
màn hình hiện lên pH cần sử dụng thì dừng lại. Nếu cần pH < 6 tiến hành cho thêm HCl vào, nếu pH > 6 cho thêm NaOH vào. Ta sẽ ựược pH ở các ngưỡng khác nhau. Sau ựó bọc miệng cốc bằng giấy bạc, rồi chuyển vào nồi hấp ở
nhiệt ựộ 1210C trong 30 phút. Khi cốc môi trường ựã nguội ở khoảng 550C,
tiến hành rót ra ựĩa petri ựã khử trùng ựể chuẩn bị nuôi cấy nấm.
- Chỉ tiêu theo dõi: đo ựường kắnh tản nấm (mm) sau 1, 2, 3, 4 ngày nuôi cấy, từ ựó so sánh rút ra ngưỡng pH thuận lợi nhất và ngưỡng pH ức chế sự phát triển của nấm F. fujikuroi.
Thắ nghiệm 6:Nghiên cứu ảnh hưởng của thuốc hóa học ựến sự phát triển của nấm F. fujikuroi trên môi trường PGA.
Sử dụng một số thuốc hóa học như Cruiser Plus 312,5 FS; Arin 25 SC; Carban 50SC trên môi trường PGA.
Thắ nghiệm với các công thức: - Cruiser Plus 312,5 FS (0,1%) - Arin 25 SC (0,1%).
- Carban 50SC (0,1%).
Cách tiến hành: Nếu nồng ựộ 0,1% thì cân thuốc theo nồng ựộ khuyến cáo và giảm ựi 10 lần (ựối với Cruiser Plus 312,5 FS là 0,025 ml; Arin 25 SC là 0,01 ml; Carban 50SC là 0,025 ml). Sau ựó pha thuốc vào trong 100 ml môi trường. Dùng cốc ựong ựã hấp khử trùng, dùng pipet chuẩn ựể hút lượng thuốc cần dùng vào cốc trước, sau ựó ựể môi trường ựã nguội ở nhiệt ựộ 550C, lấy 100 ml môi trường PGA cho vào cốc ựã có thuốc cần dùng. Dùng ựũa thủy tinh khuấy cho dung dịch thuốc và môi trường ra ựĩa petri; mỗi nồng ựộ 4 ựĩa. Công thức ựối chứng 4 ựĩa môi trường không có thuốc.
- Chỉ tiêu theo dõi: đường kắnh tản nấm (mm) sau 1, 2, 3, 4 ngày theo dõi. Từ ựó ựánh giá hiệu lực phòng trừ của thuốc BVTV ựối với nấm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 28