Xử lý số liệu theo phương pháp thống kê sinh học kết hợp với phần mềm Excel.
2.6. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN THỰC HIỆN ĐỀ TÀI
Địa điểm: bộ môn nghiên cứu Siêu Vi trùng - Phân Viện Thú Y Miền Trung -
Nha Trang, Khánh Hoà.
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. KẾT QUẢ ĐIỀU TRA TÌNH HÌNH DỊCH BỆNH ĐẬU DÊ, CỪU BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU TRA DỊCH TỄ
3.1.1. Kết quả điều tra tình hình bệnh đậu trên dê, cừu theo tổng đàn điều tra
Chúng tôi đã tiến hành điều tra tình hình dê, cừu mắc bệnh đậu tại các địa phương nghiên cứu, dựa vào phiếu điều tra kết hợp phỏng vấn thú y cơ sở và người chăn nuôi, khảo sát trực tiếp tại các hộ chăn nuôi thuộc các tỉnh Khánh Hoà, Ninh Thuận, Đắc Lắc. Những dê, cừu có các TCLS sau đây:
- Mệt mỏi, ủ rũ, chảy nước mắt mũi, nước bọt
- Bỏ ăn, lưng cong lên
- Sốt cao 40 – 410C
- Xuất hiện các nốt ban đỏ trên da
- Các nốt ban chuyển thành mụn nước, sau đó hình thành nên vảy đậu
- Nốt đậu mọc ở da mặt, môi và ở các vùng da mỏng (bẹn, âm hộ, lách,…)
- Hạch lympho sưng (trước vai, dưới hàm…)
- Sảy thai
- Sưng bầu vú
Bệnh tích: - Da sung huyết, xuất huyết, phù nề
- Hạch lympho tăng sinh
- Nốt đậu mọc mắt, mũi, miệng…
- Nốt đậu ở thanh, khí quản, phổi
- Nốt đậu ở âm hộ, vú, núm vú
- Nốt đậu ở bao quy đầu, tinh hoàn
- Lợi và lưỡi có nhiều nốt loét được nghi mắc bệnh đậu.
Qua quá trình tiến hành điều tra số liệu dê, cừu ở 2 khu vực chăn nuôi (trang trại và hộ gia đình) tại các địa phương nghiên cứu thuộc 3 tỉnh Khánh Hòa, Ninh Thuận, Đắc Lắc nghi mắc bệnh đậu trong thời gian 2 năm (từ năm 2007 đến tháng
Kết quả được trình bày ở bảng 3.1:
Bảng 3.1: Kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo tổng đàn điều tra
Ghi chú: - GĐ: gia đình - SL: số lượng
Kết quả cho thấy, trong năm 2007, số con nghi mắc bệnh là 5.111 con trong tổng số 26.310 con dê, cừu điều tra chiếm tỷ lệ 19,43%. Nhìn chung, tỷ lệ mắc bệnh ở khu vực chăn nuôi trang trại cao hơn khu vực chăn nuôi hộ gia đình, cao nhất ở Khánh Hòa (30,00%), tiếp đó là ở Ninh Thuận (20,99%) và thấp nhất ở Đắc Lắc (12,99%). Kết quả điều tra cũng cho thấy tỷ lệ dê, cừu nghi mắc bệnh đậu ở Khánh Hòa là cao nhất (27,36%), tiếp đến là ở Ninh Thuận (19,49%), thấp nhất ở Đắc Lắc (12,48%). Trong năm 2007, dịch bệnh đậu dê bùng phát ở rất nhiều địa phương trong khu vực miền Trung gây tỷ lệ chết cao ở dê có nơi đến 80%. Kết quả điều tra ở các địa phương nghiên cứu cũng phản ánh tình hình dịch bệnh đậu bùng phát. Từ tháng 1 – 10/2008, bệnh đậu dê có chiều hướng giảm. Kết quả điều tra đến tháng 10/2008 có 1.273 dê, cừu nghi mắc bệnh đậu trong tổng số 18.310 con điều tra, chiếm 6,95%. Qua bảng số liệu cho thấy, tỷ lệ mắc bệnh ở 2 khu vực chăn nuôi trang trại và chăn nuôi hộ gia đình tại các địa phương nghiên cứu không chênh lệch nhau nhiều. Tỉnh Ninh Thuận có tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh cao nhất (7,64%), Đắc Lắc
2007 Đến 10/2008 Địa phương Khu vực SL dê, cừu (con) SL nghi mắc bệnh (con) Tỷ lệ (%) SL dê, cừu (con) SL nghi mắc bệnh (con) Tỷ lệ (%) Trang trại 2.970 891 30,00 1.730 98 5,66 Khánh Hòa Hộ GĐ 1.246 308 24,72 987 49 4,96 Trang trại 9.350 1.963 20,99 5.471 410 7,49 Ninh Thuận Hộ GĐ 6.430 1.157 17,99 4.325 337 7,79 Trang trại 3.573 464 12,99 3.450 220 6,38 Đắc Lắc Hộ GĐ 2.741 328 11,97 2.347 159 6,77 Cộng 26.310 5.111 19,43 18.310 1.273 6,95
bùng phát năm 2006 - 2007 làm dê chết hàng loạt gây thiệt hại lớn về kinh tế, do vậy người chăn nuôi dê, cừu đã có ý thức chủ động phòng bệnh bằng vắc xin và áp dụng các biện pháp vệ sinh phòng bệnh.
3.1.2. Kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo mùa vụ (tháng 1-10/2008) 10/2008)
Mùa vụ liên quan chặt chẽ tới nhiệt độ, độ ẩm môi trường, bên cạnh đó là những điều kiện về ngoại cảnh khác nhau cho sự xuất hiện và phát triển của mầm bệnh. Mặt khác, sự thay đổi của mùa có những tác động và ảnh hưởng lớn tới sức đề kháng của cơ thể động vật… Chúng tôi cũng tiến hành điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo 2 mùa: mùa khô (từ tháng 1 – 8/2008) và mùa mưa (từ tháng 9 – 10/2008). Tỷ lệ dê, cừu nghi mắc bệnh ở từng địa phương theo từng mùa được thể hiện ở hình 3.1 và bảng 3.2 (xem phụ lục 3): 4,86,21 5,49 4,49 12,97 10,34 0 2 4 6 8 10 12 14
Khánh Hòa Ninh Thuận Đắc Lắc
Địa phương
Tỷ lệ (%)
Mùa khô Mùa mưa
Hình 3.1. Biểu đồ biểu diễn kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo mùa
Từ hình 3.1 cho thấy: ở mùa khô, tỷ lệ dê, cừu nghi mắc bệnh đậu cao nhất ở Ninh Thuận với tỷ lệ (5,49%), tiếp đến là ở Khánh Hòa (4,80%) và thấp nhất ở Đắc Lắc (4,49%).
Mùa mưa, nổi bật cao nhất ở Ninh Thuận với tỷ lệ dê, cừu nghi mắc bệnh đậu là (12,97%), thấp nhất là ở Khánh Hòa (6,21%), còn ở Đắc Lắc (10,34%). Như vậy, tỷ lệ mắc bệnh ở mùa mưa (chỉ điều tra trong 2 tháng đầu mùa mưa là tháng 9 và tháng 10) cao hơn rất nhiều so với mùa khô nhất là ở 2 tỉnh Ninh
Thuận và Đắc Lắc. Điều này phù hợp với đặc tính của dê, cừu ưa khí hậu khô không chịu được khí hậu ẩm ướt. Vào mùa mưa, lượng mưa nhiều làm độ ẩm không khí tăng cao, nhiệt độ giảm, đặc biệt ở Ninh Thuận và Đắc Lắc vào mùa mưa thời tiết khắc nhiệt hơn mưa nhiều, khu vực chăn nuôi luôn ẩm ướt. Bên cạnh đó với phương thức chăn nuôi bán chăn thả khâu vệ sinh phòng bệnh không đảm bảo dẫn đến dê, cừu dễ mắc bệnh. Trong chăn nuôi dê, cừu cũng như chăn nuôi gia súc nói chung, ngoài việc cung cấp đủ thức ăn thì việc phòng chống các bệnh, kết hợp với giữ ấm và vệ sinh sạch sẽ cho gia súc đóng vai trò đặc biệt quan trọng nhằm giảm thấp nhất nguy cơ nhiễm bệnh, thiệt hại do tác động của thời tiết gây ra.
3.1.3. Kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo độ tuổi
Trên cơ sở số liệu điều tra từ tháng 1 đến tháng 10/2008, chúng tôi tiến hành phân tích tổng hợp số liệu dê, cừu mắc bệnh chia theo 3 độ tuổi: từ sơ sinh đến < 3 tháng tuổi, từ 3 – 6 tháng tuổi, > 6 tháng tuổi. Kết quả được thể hiện qua bảng 3.3: Bảng 3.3: Kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu dê theo độ tuổi
Độ tuổi mắc bệnh Sơ sinh đến < 3 tháng Từ 3 - 6 tháng > 6 tháng Địa phương Số ĐT (con) Số MB (con) Tỷ lệ (%) Số ĐT (con) Số MB (con) Tỷ lệ (%) Số ĐT (con) Số MB (con) Tỷ lệ (%) Khánh Hoà 735 43 5,85 962 58 6,03 1.020 46 4,51 Ninh Thuận 2.473 187 7,56 3.565 305 8,56 3.758 255 6,79 Đắc Lắc 1.672 123 7,36 2.016 157 7,79 2.109 99 4,69 Từ bảng 3.3 cho thấy:
Ở lứa tuổi từ sơ sinh đến < 3 tháng, Ninh Thuận có tỷ lệ mắc bệnh cao nhất có 187 con mắc bệnh trong 2.473 con điều tra chiếm tỷ lệ (7,56%), tiếp đó là Đắc
Lắc có 123 con mắc bệnh trong 1.672 con điều tra chiếm tỷ lệ (7,36%), và thấp nhất là Khánh Hoà có 43 con mắc bệnh trong 735 con điều tra chiếm (6,03%).
Ở độ tuổi từ 3 – 6 tháng tuổi, tỷ lệ mắc bệnh cao nhất ở Ninh Thuận (8,56%), tiếp đó là Đắc Lắc (7,49%), thấp nhất ở Khánh Hoà (6,03%)
Ở độ tuổi > 6 tháng tuổi, cũng như ở trên Ninh Thuận có tỷ lệ mắc bệnh cao nhất trong 3.758 con dê, cừu điều tra có 255 con mắc bệnh, chiếm (6,79%), tỉnh Đắc Lắc điều tra 2.109 con có 99 con mắc bệnh chiếm (4,69%), và thấp nhất là Khánh Hoà điều tra 1.020 dê, cừu có 46 con mắc bệnh chiếm (4,51%).
Qua bảng số liệu cũng cho thấy, ở lứa tuổi dê, cừu từ 3 – 6 tháng tuổi tại cả 3 tỉnh Khánh Hoà, Ninh Thuận, Đắc Lắc đều có tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh cao nhất, tiếp đến là ở độ tuổi sơ sinh đến <3 tháng tuổi, và thấp nhất ở độ tuổi > 6 tháng tuổi. Thực tế trong từng giai đoạn phát triển của dê, cừu con từ sơ sinh đến trưởng thành liên quan chặt chẽ tới sự hoàn thiện các cơ quan trong hệ thống cơ thể, nhất là hệ thần kinh, hệ tiêu hóa và đặc biệt là hệ thống đáp ứng miễn dịch của cơ thể, từ đó ảnh hưởng tới khả năng mắc bệnh của dê, cừu. Bên cạnh đó, ở độ tuổi > 6 tháng phần lớn đã được tiêm phòng vaccine hoặc sống sót sau vụ dịch nên bản thân đã có kháng thể chống lại bệnh, còn sơ sinh đến < 3 tháng tuổi cũng có thể nhận khả năng miễn dịch của mẹ truyền sang.
3.1.4. Kết quả điều tra tỷ lệ mắc bệnh đậu theo phương thức chăn nuôi
Qua điều tra tại 3 tỉnh Khánh Hòa, Ninh Thuận, Đắc Lắc chúng tôi nhận thấy các hộ chăn nuôi dê, cừu chủ yếu sử dụng 2 phương thức chăn nuôi là chăn nuôi bán chăn thả và nuôi nhốt.
6,14 7,88 7,14 3,23 6,79 4,24 0 2 4 6 8 10
Khánh Hòa Ninh Thuận Đắc Lắc
Địa phương
Tỷ lệ
(%) Bán chăn thả
Nuôi nhốt
Hình 3.2. Biểu đồ biểu diễn kết quả điều tra tỷ lệ dê, cừu mắc bệnh đậu theo phương thức chăn nuôi
Tại cả 3 tỉnh điều tra, ở phương thức chăn nuôi bán chăn thả có tỷ lệ mắc bệnh cao hơn phương thức chăn nuôi nhốt. Có thể do phương thức chăn nuôi bán chăn thả, con vật dễ tiếp xúc với mầm bệnh, yếu tố vệ sinh không được đảm bảo đặc biệt vào mùa mưa. Trong khi đó, phương thức chăn nuôi nhốt, người chăn nuôi chủ động tìm kiếm cung cấp thức ăn cho con vật và khâu vệ sinh chuồng trại tốt hơn. Ở phương thức chăn nuôi bán chăn thả, Ninh thuận có tỷ lệ nhiễm bệnh đậu cao nhất (7,88%), tiếp đó ở Đắc Lắc (7,14%), và thấp nhất ở Khánh Hòa (6,14%).
Ở phương thức chăn nuôi nhốt, tỷ lệ nhiễm bệnh đậu cao nhất cũng là Ninh Thuận (6,79%), Đắc Lắc (4,24%), Khánh Hòa thấp nhất (3,23%).
Kết quả điều tra của chúng tôi mang tính chất tương đối, chủ yếu dựa vào TCLS của dê, cừu mắc bệnh, kết hợp với phỏng vấn thú y cơ sở và người chăn nuôi. Vì vậy, có thể nhầm lẫn với một số bệnh khác như:
Bệnh viêm da có mủ truyền nhiễm (Contagious pustular dermatitis) – còn gọi là bệnh lở miệng (Scabby mouth)
Bệnh lưỡi xanh (Blue tongue)
Bệnh viêm da do nấm (Mycotic dermatitis)
Bệnh nấm vảy của cừu (Sheep scab)
Bệnh ghẻ (Manges) và dị ứng ngoài da do nắng (Photosensitisation)
Côn trùng đốt (Insect bites)
Ecthyma truyền nhiễm (Contagious ecthyma)
Dịch tả (Peste des petits ruminants) có TCLS giống với bệnh đậu dê.
3.2. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM VIRUS ĐẬU DÊ TRONG CÁC MẪU BỆNH PHẨM THU THẬP BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR MẪU BỆNH PHẨM THU THẬP BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR
3.2.1. Tỷ lệ nhiễm virus đậu dê theo khu vực chăn nuôi
Chúng tôi tiến hành thu thập 400 mẫu bệnh phẩm là vảy mụn đậu và máu của dê, cừu nghi mắc bệnh đậu tại 3 tỉnh Khánh Hòa, Ninh Thuận, Đắc Lắc. Mẫu bệnh phẩm chúng tôi thu thập, do điều kiện nên có thể chưa thực sự là mẫu đại diện, có thể bị nhầm lẫn với một số bệnh khác ( các bệnh cần chẩn đoán phân biệt với bệnh đậu dê đã nêu ở trên). Chiết tách ADN để chạy PCR với cặp mồi:
- P1: mồi xuôi 5’-TTT CCT GAT TTT TCT TAC TAT-3’ - P2: mồi ngược 5’-AAA TTA TAT AGC TAA ATA AC-3’ cho sản phẩm PCR với độ dài 192 bp.
Hình 3.3. Sản phẩm chạy PCR
Kết quả được thể hiện ở bảng 3.5
Bảng 3.5: Tỷ lệ mẫu dương tính với virus đậu dê theo khu vực chăn nuôi
TT Địa phương Khu vực CN Số mẫu KT Số mẫu DT Tỷ lệ (%)
Trang trại 65 11 16,92 1 Khánh Hoà Hộ gia đình 34 8 23,53 Trang trại 109 17 15,60 2 Ninh Thuận Hộ gia đình 95 19 20,00 Trang trại 56 10 17,86 3 Đắc Lắc Hộ gia đình 41 8 19,51 Cộng 400 73 18,25
Ghi chú: - CN: chăn nuôi - KT: kiểm tra
- DT: dương tính
Bảng kết quả cho thấy: trong số 400 mẫu kiểm tra thu thập ở hai khu vực chăn nuôi bằng phản ứng PCR đã phát hiện được 73 mẫu dương tính với virus đậu Dê chiếm (18,25%).
Ở khu vực chăn nuôi trang trại: Đắc Lắc có tỷ lệ mẫu dương tính cao nhất phát hiện 10 mẫu dương tính với bệnh đậu trong 56 mẫu kiểm tra chiếm (17,86%), tiếp đó là Khánh Hòa 11 mẫu dương tính trong 65 mẫu kiểm tra chiếm (16,92%), thấp nhất là Ninh thuận (15,60%).
Ở khu vực chăn nuôi hộ gia đình: tỷ lệ mẫu dương tính cao nhất là Khánh Hòa (23,53%) có 8 mẫu dương tính trong 34 mẫu kiểm tra, Ninh Thuận (20,00%), Đắc Lắc có tỷ lệ mẫu dương tính thấp nhất phát hiện 8 mẫu dương tính trong 41 mẫu kiểm tra chiếm (19,51%).
Theo bảng số liệu trên, khu vực chăn nuôi trang trại có tỷ mẫu dương tính với virus đậu dê thấp hơn ở khu chăn nuôi hộ gia đình. Kết quả này có thể do, chăn nuôi
tập trung với số lượng dê, cừu ở khu vực trang trại nên người chủ chăn nuôi có ý thức tiêm phòng vắc xin và áp dụng các biện pháp vệ sinh thú y phòng bệnh. Ngược lại, đối với chăn nuôi hộ gia đình do chăn nuôi cá thể, nhỏ lẻ thường chăn nuôi từ 3 – 20 con trong 1 đàn, vì vậy việc áp dụng công tác phòng bệnh, vệ sinh thú y và tiêm phòng vaccine ít được chú trọng.
3.2.2. Tỷ lệ mẫu dương tính với virus đậu dê theo đối tượng gia súc
Phân loại các mẫu ADN tách chiết từ bệnh phẩm của dê, cừu và kiểm tra bằng phản ứng PCR. Kết quả cho ở bảng sau:
Bảng 3.6: Tỷ lệ mẫu dương tính với virus đậu dê theo đối tượng
Loại gia súc Số mẫu KT Số mẫu DT Tỷ lệ (%)
Dê 258 69 26.74
Cừu 142 4 2.82
Số liệu ở bảng 3.6 cho thấy: có 69 mẫu dương tính với virus đậu trong tổng số 258 mẫu bệnh thu thập từ dê chiếm (26,74%). Đối với cừu, chỉ phát hiện 4 mẫu dương tính trong 142 mẫu kiểm tra chiếm (2,82%).
Như vậy, tỷ lệ nhiễm virus đậu dê ở dê cao gấp khoảng gần 10 lần so với cừu. Điều này cũng phản ánh thực tế ở các ổ dịch bùng phát trong những năm qua, dê mắc bệnh trầm trọng hơn ở cừu, tỷ lệ chết cũng cao hơn so với cừu. Kết quả kiểm tra của chúng tôi cũng phù hợp với kết quả phân lập và nhận định của Bakos K et al, 1959 Kitching RP, 1983 và Tulma ER et al, 2002, trong điều kiện tự nhiên, virus đậu dê chỉ gây nhiễm cho dê mà không gây nhiễm cho cừu. Có thể nói rằng vật chủ ưa thích của các chủng khác nhau là do khả năng thích nghi của chúng trên dê hoặc cừu trong một vùng địa lý hạn chế. Theo nhận định của chúng tôi, chủng virus đậu dê ở Việt Nam chủ yếu gây bệnh cho dê, ít nhiễm chéo qua cừu.
3.2.3. Kết quả xác định tỷ lệ nhiễm virus đậu theo độ tuổi dê , cừu
Trên cơ sở các mẫu có kết quả dương tính với virus đậu dê, chúng tôi tiến hành phân loại theo 3 độ tuổi ở dê, cừu: sơ sinh đến < 3 tháng, từ 3 – 6 tháng, > 6 tháng tuổi. Kết quả thể hiện ở hình 3.4 và bảng 3.7 (xem phụ lục 3):
29,85 31,46 20,19 0 5,88 1,66 0 5 10 15 20 25 30 35 Sơ sinh đến < 3 tháng Từ 3 - 6 tháng > 6 tháng Độ tuổi (tháng) Tỷ lệ (% ) Dê Cừu
Hình 3.4. Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ mẫu dương tính với virus đậu dê theo độ tuổi
Hình 3.4 cho thấy: ở độ tuổi từ 3 – 6 tháng cả ở dê và cừu đều có tỷ lệ mẫu dương tính cao nhất, ở dê (31,46%), ở cừu (5,88%).