CHƢƠNG III PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3. Phƣơng pháp nghiên cứu
3.3.2. Phân tích mẫu chất thải sau biogas
* Mục đích: Nhằm đánh giá sơ bộ chất lượng của mẫu chất thải sau giai đoạn biogas và kiểm tra mức độ hiện diện của các loại vi khuẩn trong mẫu chất thải tiến hành đo pH và đếm mật số vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ và vi khuẩn tích lũy poly-P.
* Đo pH: Chuẩn bị dung dịch đo pH bằng cách lắc đều mẫu chất thải, đo pH dung dịch mẫu bằng máy đo pH ở nhiệt độ phòng.
* Đếm mật số: Mật số vi khuẩn sản xuất chất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P được xác định bằng phương pháp đếm sống nhỏ giọt (Hoben và Somasegaran, 1982). Phương pháp tiến hành như sau:
- Pha loãng mẫu
+ Cho 1ml mẫu chất thải lỏng vào 99 ml nước cất vơ trùng trong bình Erlenmeyer 250 ml đã khử trùng, đậy bình bằng nút gịn và giấy dầu, lắc đều. Lúc này mẫu được pha loãng 100 lần, độ pha loãng là 10-2
.
+ Hút 1ml mẫu đã pha lỗng từ bình tam giác cho vào ống nghiệm có chứa 9ml nước cất đã khử trùng, mẫu gốc đã được pha loãng 1000 lần, độ pha loãng 10-3. Tương tự, pha lỗng tiếp đến 10-4
(hình 6A). - Nhỏ giọt
+ Dùng micropipet nhỏ giọt dung dịch ở mỗi độ pha loãng tương ứng 10-2, 10-3, 10-4 vào ô đã đánh dấu trên đĩa petri có các mơi trường phân lập (20μl dung dịch/1 giọt, nhỏ 3 giọt/1 ô). Nhỏ gọn, nhẹ sao cho từng giọt tỏa trịn, đều, các giọt đều nằm trong ơ và khơng dính nhau.
+ Để khô đĩa trong tủ cấy vô trùng khoảng 5 phút. Sau đó, ủ trong tủ ủ ở 30oC, ủ khoảng 24 giờ (đối với vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học), 48 giờ (vi khuẩn