tách chiết bằng các phương pháp khác nhau
STT Thành phần Tỷ lệ (%) LCHN Chloroform n-hexane 1 p-cymene 0,10 − − 2 Myrcene 0,73 − − 3 Limonene 0,19 − − 4 1,8- cineole 0,45 − − 5 α-Terpinolene 2,27 − − 6 α-phellandrene 0,29 − − 7 β-caryophyllene 3,07 0,79 0,93 8 α- caryophyllene − − 0,37 9 4-7-10- cycloundecatriene − − 0,4 10 α-humulene 0,79 0,25 − 11 Ar-curcumene 3,02 2,96 5,11 12 α-zingiberene 3,44 − − 13 β-bisabolene 0,72 0,41 0,65 14 γ-bisabolene 0,17 15 β-sesquiphellandrene 4,42 2,01 3,14 16 ∆-3-Carene 0,10 − − 17 α-farnesene 0,23 − − 18 Caryophyllene oxide − − 1,54 19 Zingiberene 0,27 0,33 0,34 20 Ar-turmerone 30,33 − − 21 β-turmerone − 63,94 55,99 22 α-turmerone 14,14 - - 23 d-nerolidal 0,63 − − Monoterpene 4,36 - - Sesquiterpene 60,31 70,90 66,93 aldehyde 0,63 - - Oxide - - 1,54 Tổng cộng 65,31 70,90 68,47 Các chất không xác định 34,69 30,10 31,53
Hình 3. 3: Sắc ký đồ thành phần tinh dầu nghệ tách bằng lôi cuốn hơi nước
Hình 3. 5: Sắc ký đồ thành phần tinh dầu nghệ tách bằng chloroform
Dựa trên sắc ký đồ hình 3.3, 3.4, 3.5 và bảng 3.4
4,36
sesquiterpene 60,31% với hơn 30% ar-turmerone và 0,63% aldehyde. Các hợp chất chính của tinh dầu thu bằng n-hexan là β-turmerone (55,99%), ar-curcumene (5,11%), β- sesquiphellandrene (3,14%), caryophyllene oxide (1,54%) và 5 thành phần khác đƣợc nhận biết (zingiberene, β-caryophylene, β-bisabolene, 4-7-10 cycloundecatriene, α- caryophylene) mỗi loại chiếm dƣới 1%. Nhƣ vậy, có 9 thành phần đƣợc nhận biết trong dịch chiết n-hexan. Tinh dầu thu bằng dung mơi chloroform cịn xác định ít thành phần hơn (7 hợp chất), trong đó β-turmerone cũng chiếm ƣu thế (63,94%), tiếp đến là ar –curcumene (2,96%) và β- sesquiphellandrene (2,01%). Các hợp chất khác (zingiberene, β- caryophylene, β-bisabolene, α-humulene) mỗi loại dƣới 1%. Nhƣ vậy, tinh dầu thu bằng n- hexan và chloroform của thân củ nghệ từ Hƣng Yên, β-turmerone là thành phần chủ yếu. Phƣơng pháp LCHN tách chủ yếu là sesquiterpene mà thành phần chính là ar-turmerone (30,33%). Đặc biệt, ar-turmerone và monoterpene không phát hiện đƣợc trong tinh dầu chiết bằng dung mơi hữu cơ.
Nhìn chung, thành phần chính trong tinh dầu thân củ nghệ là ar-turmerone, β- turmerone, ar-cucumene nhƣng phụ thuộc vào giống, loài, điều kiện địa lý và phƣơng pháp tách chiết mà số lƣợng, hàm lƣợng các thành phần này sẽ thay đổi [44, 109, 111]. Leela và cộng sự tách chiết tinh dầu từ lá, hoa, củ nghệ trồng ở Ấn Độ, kết quả phân tích GC-MS cho thấy thành phần chính trong hoa p-cymene(26,0%), trong lá β- phellandrene (32,6%)
và trong củ là ar-turmerone (46,8%) [84]. Phân tích thành phần tinh dầu ở Nigeria xác định đƣợc 22 thành phần, - phellandrene chiếm chủ yếu [132]. Shiyou Li và cộng sự đã xác định thành phần chính trong tinh dầu ở lá và hoa là monoterpene còn trong thân củ là sesquiterpene. Đây là những thành phần đã đƣợc chứng minh có hoạt tính sinh học cao trong nghiên cứu in vitro và in vivo [124].
Kết quả phân tích thành phần tinh dầu thu đƣợc bằng LCHN có ar-turmerone, ar- cucumene, zingiberene, β-sesquiphellandrene là những thành phần đặc trƣng của tinh dầu nghệ vàng và ar-turmerone trong tinh dầu nhận đƣợc ở đây cũng tƣơng đối cao (30,33%) so với một số cơng bố khác, trong đó ar-turmerone chiếm từ 10% - 40% thành phần tinh dầu ở Việt Nam [1, 21]. Điều này cho thấy hoạt tính sinh học tiềm năng của tinh dầu nghệ vàng trồng ở Hƣng Yên.
Từ những kết quả nghiên cứu trên có thể thấy tinh dầu nghệ thu nhận bằng phƣơng pháp LCHN đơn giản, hiệu suất tách chiết cao, thời gian ngắn và vẫn giữ đƣợc các cấu tử đặc trƣng của tinh dầu nghệ vàng, vì vậy chúng tơi lựa chọn tinh dầu thu bằng LCHN để nghiên cứu trong các phần sau.
3.2. Nghiên cứu t
vàng lôi cuốn hơi nƣớc
Để tách các phân đoạn tinh dầu nghệ, một số tác giả sử dụng phƣơng pháp sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng, HPLC, chiết bằng CO2 siêu tới hạn …[45, 140]. Li-Hsun Chang và cộng sự đã cho thấy hiệu quả tách chiết turmerones bằng CO2 siêu tới hạn đạt 81%, đặc biệt là hàm lƣợng ar-turmeron khi tách chiết bằng LCHN (20%), nhƣng tách bằng CO2 siêu tới hạn tăng thêm 14% [45]. Zeng và cộng sự đã tách và phân đoạn sesquiterpenes từ
Curcuma longa để nghiên cứu cấu trúc bằng cột silicagel với các loại dung môi khác nhau
[145]. Tại Việt Nam, Phan Minh Giang và cộng sự đã tách chiết sesquiterpenes từ các giống nghệ khác nhau cũng bằng phƣơng pháp sắc ký cột. Kết quả nhận đƣợc cho thấy, các sesquiterpenes tập trung ở các phân đoạn kém phân cực [19, 20]. Hiện nay, trong quy trình sản xuất tinh bột nghệ có hàm lƣợng cucumin cao bằng việc loại bỏ nhựa và tinh dầu trong nghệ vàng bằng phƣơng pháp phân tách các phân đoạn dƣới áp suất thấp với nhiệt độ bay hơi khác nhau [23]. Đây cũng là phƣơng pháp để thu nhận tinh dầu từ quy trình khai thác curcumin mà khơng làm ảnh hƣởng tới hoạt tính sinh học của chúng. Vì vậy, phƣơng pháp này đã đƣợc sử dụng để phân tách các phân đoạn chứa cacbua terpene, sesquiterpene và turmerones từ tinh dầu nghệ vàng thu đƣợc bằng phƣơng pháp cất lôi cuốn hơi nƣớc. Kết