3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
3.2. Kết quả xác định tỷ lệ nhiễm Salmonella trên vịt theo mùa vụ
Nói tới mùa vụ chính là nói tới tác động của các điều kiện thời tiết, khí hậu mà những nhân tố cơ bản trong đó là ẩm độ, nhiệt độ môi trường, các bức xạ mặt trời... gây ra những biến đổi sinh lý không bình thường cho cơ thể động vật, dễ gây các stress, làm giảm sức đề kháng cho cơ thể, tăng khả năng mắc bệnh đặc biệt là các bệnh về đường tiêu hoá.
Từ tổng số 184 mẫu xét nghiệm được lấy 2 đợt theo hai mùa trong năm là mùa mưa và mùa khô. Tiến hành so sánh tỷ lệ nhiễm Salmonella trên vịt theo mùa vụ. Kết quả được trình bày ở bảng 3.2.
Bảng 3.2: Tỷ lệ nhiễm Salmonella theo mùa vụ trong năm
Loại mẫu Mùa
mƣa Mẫu dƣơng Tỷ lệ (%) Mùa khô Mẫu dƣơng Tỷ lệ (%) Bệnh phẩm 68 14 20,59 40 5 12,5 Trứng tắc 30 9 30 34 6 17,65 Trứng thường 6 0 0 0
Nước môi trường 3 1 33,33 3 0 0
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Kết quả ở bảng 3.2 cho thấy tỷ lệ nhiễm Salmonella trên vịt ở mùa mưa (22,43%) cao hơn so với mùa khô (14,29%).
Kết quả nghiên cứu này phù hợp với kết quả nghiên cứu của Nguyễn Ngọc Huân và cs (2006) [18], tỷ lệ nhiễm Salmonella trên vịt về mùa mưa (12,96%) cao hơn trong mùa khô (3,95%).
Kết quả này đã chứng minh là trong mùa mưa có sự biến đổi phức tạp của điều kiện ngoại cảnh, những đợt mưa xuân đầu mùa cùng với nhiệt độ môi trường tăng cao dần. Sự kết hợp của nhiệt độ môi trường cùng ẩm độ không khí là điều kiện thuận lợi cho các vi sinh vật phát triển, trong đó có các vi sinh vật gây bệnh đường ruột, đặc biệt là vi khuẩn E.coli và Salmonella. Vì vậy, trong mùa mưa ẩm, cần tăng cường các biện pháp phòng bệnh PTH vịt.
Mặt khác, sự thay đổi về nhiệt độ cùng với ẩm độ môi trường là yếu tố stress gây tác động bất lợi tới cơ thể vật nuôi dễ gây ra nhiều hiện tượng bệnh lý phức tạp đặc biệt là bệnh đường tiêu hoá.
Theo Phạm Khắc Hiếu (1997) [17], khi vật nuôi thường xuyên bị tác nhân stress tác động dễ dẫn tới viêm niêm mạc ruột là điều kiện tốt cho vi khuẩn gây hại như E.coli, Salmonella cũng như nhiều loài vi khuẩn khác xâm nhập và gây bệnh.
Điều này cho thấy tầm quan trọng của công tác vệ sinh, sát trùng tiêu độc trong việc ngăn ngừa sự nhiễm các vi khuẩn nói chung và Salmonella
nói riêng.
3.3. Kết quả xác định một số đặc tính nuôi cấy và đặc tính sinh hoá của
các chủng vi khuẩn Salmonella phân lập đƣợc
Mỗi loài vi khuẩn có một đặc tính sinh học khác nhau như tính chất nuôi cấy trên các môi trường thông thường, môi trường đặc hiệu, đặc tính chuyển hoá các loại đường và khả năng sản sinh các hợp chất sinh học trung gian trên các môi trường nuôi cấy.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trên cơ sở đó chúng tôi tiến hành giám định các chủng Salmonella
phân lập được từ các mẫu nghiên cứu.
Trong quá trình nuôi cấy, các mẫu nghiên cứu được cấy trực tiếp trong các môi trường tăng sinh chọn lọc Muller Kauffmann, đồng thời kiểm tra sự di động của vi khuẩn trên môi trường thạch bán cố thể MSRV. Từ môi trường Muller Kauffmann và MSRV, các mẫu nghi ngờ là nhiễm Salmonella được cấy chuyển sang hai loại môi trường thạch chọn lọc đặc hiệu là môi trường XLT4 và Rambach, nuôi cấy tủ ấm 37oC trong vòng 18-24h đọc kết quả. Kết quả được trình bày ở bảng 3.3.
Bảng 3.3: Kết quả kiểm tra một số đặc tính nuôi cấy của vi khuẩn
Salmonella phân lập đƣợc Môi trƣờng kiểm tra Số chủng Đặc tính nuôi cấy Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Muller Kaufman 35 Mọc tốt 35 100
MSRV 35 Vi khuẩn mọc lan toả xung
quanh giọt dịch nuôi cấy. 35 100
Rambach 35
Khuẩn lạc dạng S, tròn, rìa gọn và có màu đỏ hoặc màu hồng cánh sen. 35 100 XLT4 35 Khuẩn lạc dạng S, tròn, rìa gọn, bề mặt hơi vồng và có màu đen. 35 100
Kết quả ở bảng 3.3 cho biết: khi nuôi cấy vi khuẩn Salmonella trên các môi trường tăng sinh không chọn lọc và chọn lọc thì kết quả thu được là cả 35 chủng thử đều thể hiện đặc tính nuôi cấy rất điển hình.
Khi nuôi cấy vi khuẩn Salmonella trong môi trường Muller Kaufman ở 37oC sau 24 giờ, vi khuẩn mọc tốt, môi trường đục đều.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Màu sắc khuẩn lạc:
Trên môi trường MSRV: 100% số chủng vi khuẩn mọc lan tỏa ra xung quanh giọt dịch nuôi cấy.
Trên môi trường Rambach: 100% số chủng có khuẩn lạc tròn, rìa gọn và có màu đỏ hoặc màu hồng cánh sen.
Trên môi trường XLT4: 100% số chủng có khuẩn lạc tròn, rìa gọn, bề mặt hơi vồng và có màu đen.
Như vậy, 100% (35/35) số chủng thử đều thể hiện đặc tính nuôi cấy rất điển hình.
Đặc tính sinh hoá học của vi khuẩn là một trong những nghiên cứu cơ bản, trên cơ sở đó giúp ta giám định loài vi khuẩn và thực hiện các nghiên cứu tiếp theo. Từ các mẫu Salmonella được nuôi cấy trên môi trường thạch đặc hiệu Rambach và XLT4, lấy khuẩn lạc cấy sang môi trường Kligler để kiểm tra một số đặc tính sinh hoá. Tổng số chủng được giám định tính chất sinh hoá là 35 chủng. Kết quả được trình bày ở bảng 3.4:
Bảng 3.4: Kết quả xác định một số đặc tính sinh hoá của vi khuẩn
Salmonella phân lập đƣợc Phản ứng Số chủng kiểm tra Kết quả (+) Tỷ lệ (%) (-) Tỷ lệ (%) Sinh H2S 35 35 100 - - Sinh hơi 35 31 88,57 4 11,43 Lysine 35 - - 35 100 Simmon,s citrate 35 32 91,43 3 8,57 Urease 35 - - 35 100 Di động 35 35 100 - - Indol 35 - - 35 100 Oxydaza 35 - - 35 100 Catalaza 35 35 100 - - Ghi chú: (+): Phản ứng dương tính (-): Phản ứng âm tính
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Kết quả ở bảng 3.4 cho thấy: 100% (35/35) số chủng kiểm tra đều có khả năng sản sinh H2S và di động, 100% có phản ứng dương tính với catalaza, 91,43% (32 /35) cho phản ứng dương tính với simoncitrate 88,57% (31/35) lên men sinh hơi. 100% (35/35) số chủng kiểm tra không phân giải ure và lysine, 100% số chủng kiểm tra có phản ứng âm tính với oxydaza.
Bảng 3.5: Kết quả giám định khả năng lên men đƣờng của các chủng
Salmonella phân lập đƣợc
STT Các loại đƣờng Số mẫu kiểm tra Kết quả Tỷ lệ (%)
1 Lactose 35 - - 2 Glucose 35 32 91,43 3 Mantol 35 32 91,43 4 Galactoz 35 35 100 5 Manitol 35 35 100 6 Saccarroz 35 - -
Kết quả ở bảng 3.5 cho biết: 100% (35/35) các chủng lên men galactoz, manitol, 91,43% (32/35) số chủng Salmonella phân lập được lên men đường glucose và mantol nhưng trong đó 100% số chủng không lên men lactose và saccarroz.
Đỗ Trung Cứ và cs (2001) [3], nghiên cứu trên đàn lợn tiêu chảy ở 1 số tỉnh miền bắc cho thấy 100% chủng Salmonella phân lập được có khả năng lên men sinh hơi glucose và sinh H2S, không lên men lactose. Kết quả này chỉ khác với chúng tôi về khả năng lên men sinh hơi của các chủng Salmonella. Trong nghiên cứu của chúng tôi 91,43% các chủng Salmonella phân lập được lên men glucose nhưng trong đó chỉ có 88,57% các chủng có khả năng sinh hơi. Nhưng kết quả của chúng tôi hoàn toàn phù hợp với các tài liệu kinh điển cho thấy đa phần các chủng Salmonella đều lên men sinh hơi glucose, 100% không len men lactose, đa số có khả năng sinh H2S. Đồng thời các đặc tính
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
nuôi cấy và đặc tính sinh hoá của vi khuẩn Salmonella phân lập được cũng phù hợp với kết quả trong các tài liệu của Nguyễn Vĩnh Phước (1978) [28]; OXID Limitied (1982) [64]; Wilcock B.P. và Schwartz K.J (1992) [77] và các tài liệu gần đây như: Nguyễn Như Thanh (2001) [39]; Võ Thị Bích Thuỷ và cs (2002) [42].
Như vậy, sau khi giám định các mẫu nghi nhiễm vi khuẩn Salmonella
chúng tôi nhận thấy 35 mẫu kiểm tra được kiểm tra trên các môi trường nuôi cấy và phản ứng sinh hoá đều dương tính với vi khuẩn Salmonella.