PHẦN BỐN Ờ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.4.2. Xác ựịnh miền ảnh hưởng của thời gian trắch ly ựến khả năng trắch ly saponin
chọn miền ảnh hưởng của tỷ lệ chè ựắng/dung môi nước ựến hiệu quả chiết suất saponin trong chè ựắng là tỷ lệ từ 1/5-1/10.
4.4.2. Xác ựịnh miền ảnh hưởng của thời gian trắch ly ựến khả năng trắch ly saponin saponin
Tiến hành như thắ nghiệm 4b, với ựiều kiện tiến hành như sau: - Tỷ lệ chè ựắng/nước: 1/10
- Nhiệt ựộ trắch ly: 1000C.
- Thời gian trắch ly: 10, 30, 60, 90, 120, 150 phút.
Hàm lượng, khối lượng saponin có trong dịch trắch ly và hiệu suất trắch ly ở các mẫu ựược phân tắch theo các phương pháp ở phần 3.2. Kết quả thu ựược trình bày ở bảng 4.6.
Bảng 4.6: Ảnh hưởng của thời gian ựến hiệu quả trắch ly saponin
Mẫu M1 M2 M3 M4 M5 M6
Thời gian chiết (phút) 10 30 60 90 120 150 Lượng dịch chiết (ml) 430 410 400 400 400 400 Lượng saponin thu ựược (g/mẫu) 1,03 1,31 1,97 2,12 2,16 2,16 Hiệu suất trắch ly (%) 39,7 50,5 75,6 81,5 83,1 83,1
T640 65,0 65,5 64,8 64,8 64,5 64,3
Qua kết quả thu ựược ở bảng 4.6 chúng tôi thấy rằng :
+ Lượng dịch thu ựược ở mẫu M1, M2, nhiều hơn so với các mẫu còn lại, ựiều này cho thấy với thời gian 10 và 30 phút lá chè ựắng chưa trương nở hoàn toàn , ựặc biệt là mẫu M1.
+ Hiệu suất trắch ly và khối lượng saponin thu ựược trong dịch trắch ly tăng tỷ lệ thuận với thời gian, tuy nhiên mức ựộ tăng không ựồng ựều nhau giữa các mẫu, cụ thể: Trong khoảng thời gian trắch ly từ 10-120 phút các giá trị này thay ựổi rất rõ ràng, nhưng với các mẫu có thời gian trắch ly kéo dài trên 120 phút thì hiệu suất trắch ly và khối lượng saponin thu ựược so với các mẫu ngay trước ựó không có sự thay ựổị
+ độ truyền quang T640 ở các mẫu khảo sát có giá trị không thay ựổi ựáng kể, ựiều ựó cho thấy thời gian trắch ly không ảnh hưởng nhiều ựến ựộ trong của dịch trắch ly, trong khi ựó giá trị OD420 ựặc trưng cho ựộ sẫm màu của dịch trắch ly lại tăng dần theo thời gian trắch ly, ựiều ựó cho thấy nếu kéo dài thời gian trắch ly lại là yếu tố không có lợi cho ựộ sáng của dịch trắch lỵ
Như vậy, chúng tôi chọn miền ảnh của hưởng của thời gian trắch ly saponin là là 30 ọ 120 phút .
4.4.3. Xác ựịnh miền ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến khả năng trắch ly saponin
Tiến hành như thắ nghiệm 4c, với ựiều kiện tiến hành như sau: - Tỷ lệ chè /nước: 1/10
-Nhiệt ựộ trắch ly: 70, 80, 90, 100,1100C. -Thời gian trắch ly: 60 phút
Hàm lượng, khối lượng saponin có trong dịch trắch ly và hiệu suất trắch ly ở các mẫu ựược phân tắch theo các phương pháp ở phần 3.2. Kết quả thu ựược trình bày ở bảng 4.7.
Bảng 4.7: Ảnh hưởng của nhiệt ựộ nước chiết ựến hiệu quả chiết suất saponin
Mẫu M1 M2 M3 M4 M5
Nhiệt ựộ chiết (0C) 70 80 90 100 110 Lượng dịch chiết (ml) 400 400 400 400 400 Khối lượng saponin thu ựược (g) 1,12 1,80 1,92 1,98 1,88 Hiệu suất trắch ly (%) 43,1 69,3 73,8 75,6 72,3
T640 66,8 66,2 65,7 64,8 52,6
Từ các kết quả thu ựược cho thấy:
+ Trong khoảng nhiệt ựộ từ 70-1000C, hiệu suất trắch ly và khối lượng saponin thu ựược trong dịch chiết ở các mẫu thắ nghiệm tăng tỷ lệ thuận với nhiệt ựộ, ựiều này ựược giải thắch là do nhiệt ựộ càng cao càng làm tăng khả năng chuyển ựộng của các cấu tử từ môi trường có nồng ựộ cao (chè) sang môi trường có nồng ựộ thấp (nước) vì vậy sẽ làm tăng khả năng trắch ly của các cấu tử chất rắn hòa tan nói chung và saponin nói riêng. Tuy nhiên, các giá trị về hiệu suất trắch ly và khối lượng saponin ựối với các mẫu kế tiếp nhau khi ựược trắch ly ở khoảng nhiệt ựộ từ 70- 1000C có sự chênh lệch nhau khá lớn (hiệu suất trắch ly và khối lượng saponin ở các mẫu kế tiếp nhau có mức ựộ chênh lệch giao ựộng trong khoảng 0,06 Ờ 0,12g/mẫu, riêng mẫu ựược chiết ở nhiệt ựộ 70oC hàm lượng saponin thu ựược thấp nhất (chênh lệch 0.68g).
+ Khi nhiệt ựộ tiếp tục tăng (nhiệt ựộ > 1000C) thì hàm lượng saponin có trong dịch chiết lại giảm ựi, ựiều này có thể ựược giải thắch là do ở nhiệt ựộ cao một lượng saponin ựã bị thủy phân hoặc biến ựổị
+ Cũng từ các số liệu thu ựược cho thấy, nhiệt ựộ là nhân tố ảnh hưởng rất rõ rệt ựến ựộ trong của dịch chiết nước chè ựắng. Cùng với sự gia tăng nhiệt ựộ trắch ly thì ựộ sẫm màu của dịch chè có xu hướng tăng lên, còn ựộ trong (T640) có xu hướng giảm xuống. Ở ngưỡng các nhiệt ựộ trắch ly thấp hơn (70 - 1000C) giá trị OD420 tuy có tăng khi nhiệt ựộ tăng, tuy nhiên mức chênh lệch giữa các mẫu không quá lớn và ngược lại ở các mẫu ựược trắch ly ở ngưỡng nhiệt ựộ cao 1100C. điều ựó cho thấy mức ựộ sẫm màu của dịch trắch ly ở các ngưỡng nhiệt ựộ cao nhiều hơn so với khi ựược trắch ly ở nhiệt ựộ thấp hơn. Trong khi ựó giá trị T640 lại giảm dần và giảm rất nhanh ở ngưỡng nhiệt ựộ cao (>1000C) và giảm chậm khi ựược trắch ly ở ngưỡng nhiệt ựộ thấp. điều ựó có nghĩa khi nhiệt ựộ tăng làm cho ựộ ựục của dịch trắch ly tăng, ựặc biệt khi trắch ly ở nhiệt ựộ cao 1100C.
Như vậy, chúng tôi chọn miền ảnh của hưởng của nhiệt ựộ dung môi (nước) khi chiết suất saponin là 80 ọ 1000C.
yếu tố công nghệ trên chúng tôi nhận thấy các thông số công nghệ này có ảnh hưởng tuyến tắnh tới hàm lượng saponin ựược chiết suất từ lá chè ựắng, ngoài ra chúng còn có tác ựộng tương hỗ với nhaụ Vì vậy, ựể xác ựịnh ựược các giá trị tối ưu tương hỗ của chúng, chọn hàm hồi quy lý thuyết (2.4)
Y- Lượng saponin ựược chiết suất = b0 +b1X1+ b2X2+b3X3+ b12X1X2+ b13X1X3 + b23X2X3+ b123X1 X2X 3
Giới hạn khoảng nghiên cứu của các yếu tố công nghệ như sau: Tỷ lệ chè/nước (%): 1/5 - n Ờ 1/10 (Tức là 10 Ờ n -20)
Nhiệt ựộ chiết suất ( 0C) : 80- T - 100 Thời gian chiết suất (phút): 30 - ι - 120
* Sử dụng quy hoạch thực nghiệm tìm hàm hồi quy
Các tham số công nghệ: Thời gian chiết suất -X1, Tỷ lệ chè ựắng/nước (X2); Nhiệt ựộ chiết suất (X3) với các giá trị mã hóa Ộ-1Ợ tương ứng với mức giới hạn dưới, Ộ+1Ợ tương ứng với mức giới hạn trên, Ộ0Ợ tương ứng tâm miền giới hạn Ộmức cơ sởỢ. Ylà hàm mục tiêu - lượng saponin chiết suất ựược (g).
Kết quả thắ nghiệm về ảnh hưởng của tỷ lệ chè ựắng/nước, nhiệt ựộ và thời gian tới khả năng chiết suất saponin có trong lá chè ựắng theo ma trận thực nghiệm toàn phần hai mức tối ưu bằng trương trình xử lý số liệu NEMRODW(New Efficient Methodology For Research Using Optimal Design.). Với mà trân thắ nghiệm ựược chọn là DOEHLERT.
Bảng 4.8: Ma trận thắ nghiệm tối ưu ựối với quá trình chiết suất saponin trong lá chè ựắng
Từ kết quả thắ nghiệm ở bảng 4.8 chúng tôi xác ựịnh ựược hệ số hồi quy bằng