Các glycozit có thể ựược trắch ly từ nguyên liệu dưới dạng muối hoặc dạng bazơ. Trong ựó trắch ly glycozit từ nguyên liệu dưới dạng muối sử dụng các dung dịch acid hoặc các dung môi phân cực ựã acid t hoá, còn trắch ly glycozit từ nguyên liệu dưới dạng bazơ sử dụng các dung môi hữu cơ sau khi ựã kiềm hoá nguyên liệụ
Có thể sử dụng một trong những phương pháp sau ựây ựể trắch ly glycozit từ nguyên liệu và loại bớt những tạp chất.
2.3.2.1. Phương pháp trắch ly glycozit dưới dạng bazơ bằng dung môi hữu cơ không phân cực.
Ưu ựiểm: Hiệu suất trắch ly các hoạt chất từ nguyên liệu cao do dịch trắch ly rút ra sạch, dễ tinh chế loại các tạp ựi kèm theọ Các dung môi hữu cơ không phân cực thường là các dung môi có khả năng trắch ly chọn lọc ựối với glycozit ở dạng bazơ.
Nhược ựiểm: Dung môi hữu cơ thường là các dung môi ựắt tiền. Khi sử dụng các dung môi này ựể trắch ly ựòi hỏi các thiết bị phức tạp ựầu tư cho thiết bị lớn.
Phương pháp tiến hành gồm các giai ựoạn sau: Giai ựoạn 1: Chuẩn bị nguyên liệu
để tăng khả năng trắch ly ta phải chia nhỏ nguyên liệu trước khi trắch ly nhằm làm tăng bề mặt tiếp xúc giữa hai pha rắn và lỏng ựẩy nhanh quá trình khuếch tán. Tuy nhiên nếu ta chia nhỏ nguyên liệu quá dung môi sẽ khó chuyển ựộng qua khối dược liệu và ta rất khó thu ựược dịch trắch ly, do ựó tuỳ thuộc vào từng loại dược liệu ta có thể xay nhỏ khác nhau ựể vừa ựảm bảo ựẩy nhanh quá trình khuếch tán vừa dễ dàng rút dịch trắch lỵ
Kiềm hoá và làm trương nở nguyên liệu bằng dung dịch kiềm (thường dùng CăOH)2, NH4OH, Na2CO3Ầ) ựể chuyển glycozit trong nguyên liệu dạng muối sang dạng bazơ.
Giai ựoạn 2: Trắch ly
Sau khi kiềm hoá, tiến hành trắch ly glycozit bằng dung môi hữư cơ (thường dùng chloroform, dietylether, nước). Thu hồi dung môi, thu ựược glycozit toàn phần.
Giai ựoạn 3: Tinh chế
Chuyển các glycozit ở dạng bazơ sang dạng muối bằng cách hoà tan glycozit toàn phần bằng các dung dịch acid loãng như acid sunfuric, acid hydrochloric 5- 10%. Lọc lấy dung dịch acid. Kiềm hóa dung dịch acid ựể chuyển các glycozit từ dạng muối sang dạng bazơ. để lắng, lọc, thu ựược kết tủa glycozit toàn phần thô.
Nếu muốn thu ựược glycozit tinh sạch hơn có thể trắch ly saponin từ dung dịch acid ựã kiềm hoá bằng dung môi ắt phân cực như chloroform hoặc hỗn hợp
chloroform + dietylether.
Phương pháp này thường ựược áp dụng trong nghiên cứu cơ bản ựể trắch ly tách và xác ựịnh cấu trúc hoá học, ựịnh danh các saponin chưa biết. Sử dụng ựộ kiềm khác nhau của các glycozit ựể tách chúng trong quá trình kiềm hoá dịch trắch lỵ
Phương pháp này sử dụng nhiều dung môi hữu cơ ựể trắch ly glycozit trực tiếp từ nguyên liệu, vì vậy ắt ựược sử dụng trong sản xuất.
2.3.2.2. Phương pháp trắch ly glycozit dưới dạng muối bằng dung môi nước, nước acid hoặc nước (ethanol, methanol).
Ưu ựiểm: Dung môi rẻ tiền, dễ kiếm, thiết bị trắch ly ựơn giản, ựầu tư ắt Nhược ựiểm: Dịch trắch ly rút ra lẫn nhiều tạp chất, khó tinh chế do ựó mất mát nhiều trong khâu tinh chế làm cho hiệu suất trắch ly thấp.
ỜTrắch ly glycozit bằng dung dịch axit loãng hoặc nước ựã acid hoá. Phương pháp tiến hành gồm các giai ựoạn sau:
Giai ựoạn 1: Chuẩn bị nguyên liệu
Nguyên liệu ựược xay thô, sau ựó ựược làm ẩm cho trương nở bằng nước. Giai ựoạn 2: Trắch ly
Tiến hành trắch ly glycozit bằng dung dịch acid loãng như axit sunfuric, axit hydrocloric (hoặc nước ựã acid hoá). Thu hồi dung môi, thu ựược alcaloit toàn phần.
Giai ựoạn 3: Tinh chế
Kiềm hoá ựể chuyển các glycozit từ dạng muối sang dạng bazơ. Tiến hành trắch ly glycozit bằng dung môi hữu cơ (thường dùng cloroform, dietylether). Thu hồi dung môi, thu ựược glycozit thô. Tiếp tục tinh chế bằng phương pháp kết tinh, thu ựược hỗn hợp glycozit tinh chế, hoặc kết tinh phân ựoạn có thể thu ựược glycozit chắnh dưới dạng tinh thể.
Phương pháp này ựược áp dụng nhiều trong sản xuất vì dung môi là các dung dịch acid loãng hoặc nước acid hoá có giá thành rẻ và an toàn.
Ờ Trắch ly glycozit bằng nước trung tắnh. Phương pháp tiến hành gồm các giai ựoạn sau: Giai ựoạn 1: Chuẩn bị nguyên liệu
Giai ựoạn 2: Trắch ly
Tiến hành trắch ly glycozit bằng nước. Thu hồi dung môi, ựược cao nước toàn phần.
Giai ựoạn 3: Tinh chế
Trắch ly glycozit từ cao nước toàn phần bằng dung dịch axit loãng, lọc bỏ tủa, kiềm hoá dịch trắch ly acid. để lắng tủa glycozit, lọc, thu ựược glycozit toàn phần. Tiếp tục tinh chế bằng phương pháp kết tinh.
Phương pháp này cũng ựược áp dụng trong sản xuất (tuỳ theo loại nguyên liệu) nhưng ắt hơn phương pháp trên vì dùng nước trung tắnh thường kéo theo nhiều tạp chất, khó khăn cho việc tinh chế sau nàỵ