Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.6. Quy trình nghiên cứu
2.6.1. Nghiên cứu tại thực địa
Ở mỗi đợt điều tra, căn cứ vào danh sách hộ gia đình của điểm nghiên cứu, nhóm nghiên cứu chọn ngẫu nhiên nhà đầu tiên để điều tra. Sau khi chủ nhà đồng ý, nhóm nghiên cứu tiến hành chia làm hai phân nhóm gồm phân nhóm điều tra muỗi, bọ gậy trong nhà và phân nhóm điều tra muỗi, bọ gậy ngồi nhà. Nhóm nghiên cứu sử dụng ống tuýp để thu thập muỗi trưởng thành và ống hút, vợt để thu thập bọ gậy Aedes spp. Sau đó ghi tất cả các thơng tin vào biểu mẫu đã thiết kế sẵn để điều tra tại thực địa.
Tất cả các mẫu muỗi trưởng thành và bọ gậy đều được định loại để xác định chính xác tên lồi. Mẫu muỗi và bọ gậy Aedes được mang về tại
phịng thí nghiệm khoa Cơn trùng, Viện Sốt rét-KST-CT Quy Nhơn để xét nghiệm muỗi nhiễm virus Dengue và nuôi bọ gậy đến giai đoạn trưởng thành để phục vụ cho nghiên cứu thử nhạy cảm.
2.6.2. Nghiên cứu tại phịng thí nghiệm
Bọ gậy và muỗi mang về phịng thí nghiệm, sau đó muỗi trưởng thành được định loại lại một lần nữa dưới kính lúp để khẳng định chính xác tên lồi. Việc định loại này được thực hiện bởi các cán bộ đang làm việc tại tổ Côn trùng thực nghiệm - khoa Côn trùng tham gia nghiên cứu. Các mẫu bọ gậy tiếp tục nuôi đến giai đoạn trưởng thành để thử nhạy cảm.
Các mẫu muỗi trưởng thành thu thập tại thực địa nếu còn sống cho vào tủ lạnh gây chết lâm sàng. Sau đó các mẫu muỗi này cho vào tuýp
eppendorf (theo loài) ghi nhãn theo loài, địa điểm và thời gian thu thập. Số muỗi từng loài cho vào tuýp eppendorf từ không quá 20 cá thể. Muỗi trong tuýp eppendorf được nghiền trong dung dịch đệm và sẽ được dùng cho phương pháp xét nghiệm RT-PCR để xác định muỗi nhiễm virus Dengue.
Các mẫu muỗi Ae. aegypti sau khi thử nhạy cảm với hóa chất diệt cơn trùng, nếu cịn sống thì chúng được chọn để làm xét nghiệm phân tử để xác định các đột biến trên gen kdr của các quần thể muỗi kháng hóa chất.