2.3.5.1. Khám lâm sàng và xét nghiệm
Trước khi bắt đầu thực hiện các quy trình thụ tinh trong ống nghiệm, mỗi cặp vợ chồng đều được khám lâm sàng và làm các xét nghiệm cơ bản. • Đối với người vợ:
Khám phụ khoa tổng quát.
Xét nghiệm: HbsAg, TPHA, HIV, Chlamydia, công thức máu, sinh hóa máu, xét nghiệm nội tiết cơ bản FSH, LH, E2 vào ngày 2 hoặc ngày 3 của chu kỳ kinh.
Siêu âm tử cung và hai buồng trứng. • Đối với người chồng :
Khám nam khoa tổng quát.
Xét nghiệm: HbsAg, TPHA, HIV và tinh dịch đồ.
2.3.5.2. Các bước thực hiện nghiên cứu
Sau khi hoàn thành hồ sơ điều trị vô sinh, các đối tượng nghiên cứu đủ điều kiện về tiêu chuẩn lựa chọn và tiêu chuẩn loại trừ sẽ được thực hiện theo các bước sau đây:
1. Phân nhóm nghiên cứu theo cách chọn mẫu ngẫu nhiên phân tầng: • Nhóm hMG nhận phác đồ ngắn kết hợp với hMG (phác đồ ngắn/hMG). • Nhóm rFSH nhận phác đồ ngắn kết hợp với rFSH (phác đồ ngắn/rFSH). 2. Theo dõi sự phát triển của nang noãn bằng siêu âm và xét nghiệm nội tiết.
3. Gây trưởng thành noãn bằng hCG. 4. Chọc hút noãn và lọc rửa tinh trùng. 5. Đánh giá chất lượng noãn.
6. Thực hiện kỹ thuật thụ tinh tiêm tinh trùng vào bào tương của noãn (ICSI). 7. Đánh giá chất lượng phôi.
8. Chuyển phôi vào buồng tử cung: chuyển phôi ngày 3. 9. Hỗ trợ pha hoàng thể.
10.Thử βhCG để xác định có thai và siêu âm theo dõi sự phát triển của thai. 11. Đánh giá kết quả của hai phác đồ về kết quả kích thích buồng trứng và kết quả thụ tinh trong ống nghiệm bao gồm:
• Đáp ứng của buồng trứng. • Số nang noãn ≥ 14 mm. • Số noãn. • Số phôi. • Số phôi tốt (phôi độ 3). • Số phôi đông.
• Tỷ lệ thai sinh hoá. • Tỷ lệ thai lâm sàng.
2.3.5.3. Sơ đồ nghiên cứu
Sơ đồ 2.1. Các bước tiến hành nghiên cứu
Phác đồ ngắn/hMG Phác đồ ngắn/rFSH
Sử dụng hCG
Chọc hút noãn & lọc rửa
tinh trùng
ICSI
Chuyển phôi
Hỗ trợ pha hoàng thể
Thử β hCG. Siêu âm thai
Theo dõi sự phát triển của thai
Theo dõi sự phát triển của nang noãn
Đánh giá kết quả của hai phác đồ Đánh giá các yếu tố liên quan Kết quả kích thích
buồng trứng
2.3.5.4. Các phác đồ kích thích buồng trứng ● Nhóm hMG: Phác đồ ngắn/hMG
Bệnh nhân có kinh ngày 2 xét nghiệm LH, E2, P4 và siêu âm.
Tiêm dưới da Diphereline 0,1mg vào ngày 2 của chu kỳ kinh.
Từ ngày 3 của chu kỳ kinh, tiêm dưới da ½ ống Diphereline 0,1mg và hMG. Liều khởi đầu FSH 300IU/ngày (225IU rFSH + 75IU hMG).
Sơ đồ 2.2. Phác đồ kích thích buồng trứng của nhóm hMG
●Nhóm rFSH: Phác đồ ngắn/rFSH
Bệnh nhân có kinh ngày 2 xét nghiệm LH, E2, P4 và siêu âm.
Tiêm dưới da Diphereline 0,1mg vào ngày 2 của chu kỳ kinh.
Từ ngày thứ 3 của chu kỳ kinh, tiêm dưới da ½ ống Diphereline 0,1mg và rFSH. Liều khởi đầu 300IU rFSH/ ngày.
Sơ đồ 2.3. Phác đồ kích thích buồng trứng của nhóm rFSH GnRHa 225 IU rFSH + 75IUhMG N2CK N7- XN hCG 8 - 10 ngµy Chäc hót no·n ChuyÓn ph«i GnRHa 300 IU rFSH N2CK N7- XN hCG 8 - 10 ngµy Chäc hót no·n ChuyÓn ph«i
2.3.5.5.Theo dõi sự phát triển của nang noãn
Theo dõi sự phát triển của nang noãn bằng siêu âm đường âm đạo và các xét nghiệm nội tiết.
• Siêu âm nang noãn vào các thời điểm: ngày 8, ngày 10 hoặc ngày 11... sau khi tiêm rFSH. Khi có ít nhất một nang noãn có đường kính ≥ 18 mm trên siêu âm thì tiêm bắp hCG 10000 IU để trưởng thành noãn.
• Xét nghiệm các chỉ số nội tiết E2, LH, P4 vào các thời điểm: ngày 2, ngày 7, ngày 10 sau khi tiêm FSH và ngày tiêm hCG.
2.3.5.6. Hút noãn
Hút noãn được tiến hành sau khi tiêm hCG 34-36 giờ.
(Phụ lục 1: Quy trình hút noãn. Phụ lục 2: Đánh giá chất lượng noãn. Phụ lục 3: Hình ảnh noãn sau khi hút).
2.3.5.7. Chuẩn bị tinh trùng
Người chồng kiêng xuất tinh 3 - 5 ngày và lấy tinh trùng vào ngày người vợ chọc hút noãn, tinh trùng được lọc rửa theo phương pháp thang nồng độ sau đó sẽ thụ tinh với noãn. (Phụ lục 4: Quy trình chuẩn bị tinh trùng).
2.3.5.8. Phương pháp thụ tinh
ICSI: Phương pháp thụ tinh bằng cách tiêm tinh trùng vào bào tương của noãn (Phụ lục 5: Quy trình thụ tinh. Phụ lục 6: Hình ảnh kỹ thuật ICSI).
2.3.5.9. Chuyển phôi vào buồng tử cung
Chuyển phôi vào buồng tử cung ngày 3 sau khi hút noãn dưới sự hướng dẫn của siêu âm đường bụng. (Phụ lục 7: Quy trình chuyển phôi).
2.3.5.10. Hỗ trợ pha hoàng thể
Hỗ trợ pha hoàng thể bằng Utrogestan đặt âm đạo với liều mỗi ngày 600 mg, bắt đầu ngay sau hút noãn.
2.3.5.11. Xác định có thai
Định lượng βhCG 14 ngày sau chuyển phôi. Nếu có thai thì siêu âm xác định túi thai 4 tuần sau chuyển phôi. Xác định số túi thai và sự hoạt động của tim thai.