Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đột biến gen FAT1 ở người có liên quan tới phơi nhiễm dioxin tại thành phố sông công, tỉnh thái nguyên (Trang 40 - 42)

PHẦN 3 : ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.2. Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm

3.2.1. Vật liệu nghiên cứu

a. Vật liệu

Mẫu máu sử dụng để tách chiết DNA được thu thập được trình bày ở bảng 4.1. Trình tự mồi đặc hiệu exon 10 của gen FAT1 được kế thừa từ nghiên cứu “Xác

định đột biến Q2933P trên gen FAT1 ở bệnh nhân bị thiểu năng trí tuệ trong một gia đình có nạn nhân chất độc dioxin ở Việt Nam” của Nguyễn Thị Thanh Ngân và cộng

sự [18]. Các oligonucleotide được tổng hợp bởi Phusa Biochem.

Bảng 3.1. Cặp mồi sử dụng nhân gen FAT1

Tên mồi Trình tự mồi (5’-3’) Kích thước sản phẩm PCR FAT1-F CGTGCCTATTGGAACAGAGATAG

696 bp FAT1-R GAATCAGCATCCGTGGTACTT

Các hóa chất, sinh phẩm Sinh học phân tử thường quy

b. Hoá chất

Bảng 3.2. Bảng liệt kê các hoá chất cần sử dụng trong quá trình thí nghiệm

STT Tên hoá chất sử dụng

Hoá chất tách chiết DNA

1 Cồn, nước cất

2 Proteinase K (Thermo Scientific) 3 RNase (Thermo Scientific)

4 Bộ Tissue Genomic DNA Extraction Mini Kit

Hoá chất điện di

5 Loading dye… (Thermo Scientific) 6 Gene Ladder (Fastgene)

7 Ethidium Bromide

8 Midori Green Direct (Genetics)

9 Agarose

10 TAE 1X (Tris base, Acid acetic, EDTA)

Hoá chất PCR

11 10X Dream Taq DNA Polymerase (Thermo Scientific) 12 10mM dNTP Mix (Thermo Scientific)

13 Cặp mồi FAT1 (PHUSA Biochem)

14 Nước khử ion

3.2.2. Dụng cụ thí nghiệm

Bảng 3.3. Bảng liệt kê các dụng cụ và thiết bị cần thiết trong quá trình thí nghiệm trong quá trình thí nghiệm

STT Dụng cụ và thiết bị Tên hãng

Dụng cụ

1 Pipette, dao, kéo, phanh, giấy parafilm 2 Ống eppendorf (1,5ml, 200, 100)

3 Ống đong, cốc đong, bình định mức, bình giữ nhiệt,…

Thiết bị

4 Máy chuẩn pH, máy khuấy từ, lò vi sóng 5 Tủ cấy, tủ hút khí, tủ lạnh

6 Máy Votex, máy Spindown Genius 3

7 Máy li tâm lạnh Mikro 220R Hettich

8 Bể ổn nhiệt Grant

9 Bộ điện di Scie – Plas

10 Máy soi gel Wealtec corp Uvtronsilluminator

11 Máy PCR Thermocycler

12 Máy đo nồng độ quang phổ Thermo scientific

13 Máy cất nước

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đột biến gen FAT1 ở người có liên quan tới phơi nhiễm dioxin tại thành phố sông công, tỉnh thái nguyên (Trang 40 - 42)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(64 trang)