Sau khi gây bệnh thực nghiệm cho lợn bằng virus chủng PRRS – CG – 03. chúng tôi tiến hành lấy máu, dịch swab, phân kiểm tra vào ngày thứ 3, 5, 7, 9 , 11, 13, 15, 17, 19, 21, 28 sau khi gây nhiễm. Sau đó, chúng tôi làm xét nghiệm các mẫu trên bằng phƣơng pháp RT – PCR để phát hiện sự có mặt của virus. Kết quả đƣợc thấy ở bảng 4.4.
Bảng 4.4. Kết quả xác định sự có mặt của virus PRRS bằng phƣơng pháp RT – PCR
Ngày sau gây nhiễm
Số mẫu dƣơng tính/ Số mẫu kiểm tra Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
Máu Dịch swab Phân Máu Dịch swab Phân
3 4/5 5/5 1/5 0/5 0/5 0/5 5 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 7 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 9 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 11 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 13 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 15 4/4 4/4 4/4 0/5 0/5 0/5 17 4/4 4/4 4/4 0/5 0/5 0/5 19 3/3 3/3 3/3 0/5 0/5 0/5 21 3/3 3/3 3/3 0/5 0/5 0/5 28 3/3 2/3 1/3 0/5 0/5 0/5
Nhận xét: Kết quả bảng 4.4 cho thấy:
+ Ở ngày thứ 3 sau khi gây nhiễm, cả 5 lợn TN (1, 2, 3, 4 và 5) đều cho kết quả dƣơng tính (+) với virus PRRS dịch swab (dịch mắt, dịch mũi), máu và phân âm tính (-). Phải đến ngày thứ 5 và ngày thứ 7 thì cả 5 lợn thí nghiệm đều cho kết quả (+) với virus PRRS ở cả trong máu, dịch swab (nhử mắt, nhử mũi) và phân.
+ Lợn đối chứng ở tất cả các lần lấy mấu đều cho kết quả âm tính (-). Điều đó chứng tỏ chúng tôi đã gây nhiễm thành công chủng PRRSV – CG - 03.
4.2. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG CHỦ YẾU CỦA LỢN BỆNH LỢN BỆNH
4.2.1. Thân nhiệt của lợn sau gây nhiễm virus chủng PRRSV - CG - 03
Trong thí nghiệm, hàng ngày chúng tôi tiến hành đo thân nhiệt 2 lần/ngày của lợn. Vì kiểm tra thân nhiệt là một trong những khâu quan trọng trong chẩn đoán lâm sàng. Căn cứ vào nhiệt độ của cơ thể có thể thấy phần nào mức độ ảnh hƣởng của bệnh với cơ thể lợn và phản ứng đáp ứng của lợn với bệnh đó.
Bảng 4.5. Diễn biến thân nhiệt của lợn thí nghiệm PRRSV – CG - 03
( Đơn vị 0 C) Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng 1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 38,2 38,3 38,0 38,4 38,1 38,2 38,2 38,4 38,5 38,3 38,1 38,3 2 38,5 38,3 38,2 38,3 38,2 38,3 38,5 38,2 38,3 38,5 38,5 38,4 3 39,5 39,4 39,1 38,5 38,0 38,9 38,3 38,3 38,0 38,2 38,2 38,2 4 39,7 39,5 39,5 38,4 38,4 39,1 38,4 38,2 38,4 38,2 38,3 38,3 5 40,7 39,8 39,6 39,8 39,6 39,9 38,2 38,2 38,2 38,4 38,0 38,2 6 40,5 40,3 40,2 40,4 40,1 40,3 38,3 38,3 38,4 38,2 38,4 38,3 7 41,5 40,4 40,8 41,4 40,9 41,0 38,2 38,4 38,1 38,5 38,3 38,3 8 41,5 41,2 40,7 41,8 40,3 41,1 38,2 38,2 38,0 38,0 38,1 38,1 9 41,4 40,9 41,2 41,5 40,5 41,1 38,3 38,5 38,4 38,0 38,3 38,3 10 41,8 40,3 40,2 41,5 41,2 41,0 38,1 38,3 38,3 38,1 38,2 38,2 11 39,8 40,2 40,2 40,8 40,5 40,3 38,5 38,4 38,5 38,2 38,4 38,4 12 37,0 40,0 39,8 40,3 40,3 40,1 38,3 38,2 38,3 38,4 38,3 38,3 13 - 40,5 39,9 41,2 41,0 40,4 38,2 38,3 38,1 38,1 38,3 38,2 14 - 41,2 - 41,5 41,2 41,3 38,4 38,2 38,4 38,3 38,2 38,3 15 - 41,0 - 41,2 41,4 41,2 38,0 38,3 38,2 38,4 38,1 38,2 16 - 41,0 - 41,3 41,0 41,1 38,5 38,0 38,4 38,3 38,3 38,3 17 - 40,8 - 40,8 40,5 40,7 38,2 38,0 38,3 38,2 38,3 38,2 18 - 40,2 - 40,0 40,1 40,1 38,3 38,5 38,4 38,0 38,3 38,3 19 - 39,0 - 39,7 39,8 39,5 38,4 38,6 38,4 38,3 38,6 38,5 20 - 38,5 - 39,0 39,4 38,9 38,5 38,4 38,3 38,5 38,3 38,4 21 - 38,5 - 38,5 39,1 38,7 38,3 38,5 38,1 38,3 38,4 38,3 Ghi chú: - Lợn chết không theo dõi được nhiệt độ nữa
Sốt là trạng thái cơ thể chủ động tăng thân nhiệt do trung tâm điều hòa nhiệt bị tác động bởi các nhân tố gọi là chất gây sốt, dẫn đến tăng sản nhiệt kết hợp với giảm thải nhiệt. Sau 3 ngày gây bệnh thực nghiệm, lợn có biểu hiện đầu tiên là sốt, có con sốt cao nhất là 41,80C. Hiện tƣợng sốt biểu hiện ở cả 5 lợn thí nghiệm.
Hình 4.3. Nhiệt độ trung bình của lợn đƣợc gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03.
Ghi chú: TBTN – Nhiệt độ trung bình trong ngày của lô lợn thí nghiệm TBĐC – Nhiệt độ hấp trung bình trong ngày của lô lợn đối chứng
Nhận xét:
+ Căn cứ theo bảng 4.5 và hình 4.3 ta thấy cả 5 lợn đƣợc gây lợn bệnh có biểu hiện sốt cao từ ngày số 6 đến ngày 19 thân nhiệt hạ dần và trở lại mức bình thƣờng đối với lợn TN2, TN4 và TN5. Sau 5 ngày gây bệnh lợn TN1 bắt đầu sốt, cao nhất đạt 41,8 0C (ngày số 10) sau đó giảm dần và chết vào ngày số 13. Lợn TN3 sốt liên miên từ ngày số 6 đến ngày số 12 có biểu hiện giảm dần, ngày số 14 lợn TN3 chết. Sở dĩ có hiện tƣợng nhƣ vậy là do virus có động lực cao, sau khi virus xâm nhập vào cơ thể của lợn chúng gây bệnh làm suy giảm hệ thống miễn dịch và gây chết lợn.
+ Trong suốt thời gian tiến hành thí nghiệm, cả 5 lợn đối chứng đều có nhiệt độ cơ thể dao động trong phạm vi sinh lý bình thƣờng (38 - 400
4.2.2. Tần số hô hấp của lợn trƣớc và sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG – 03. CG – 03.
Sau khi gây bệnh thực nghiệm, lợn bắt đầu có triệu chứng chảy nƣớc mắt, nƣớc mũi, mí mắt sƣng, mắt có dử, khó thở từ ngày thứ 3 trở đi hiện tƣợng ho diễn ra cả đàn, ban đầu khó thở nhẹ, sau đó triệu chứng nặng dần lên trong đó biểu hiện khó thở nặng nhất là lợn TN1 và TN4. Lợn TN2, TN3 và TN5 có biểu hiện nhẹ hơn.
Đại thực bào là tế bào duy nhất có receptor phù hợp với cấu trúc hạt virus. Sau khi xâm nhập vào tế bào chúng nhân lên rất nhanh và phá hủy tế bào. Vì vậy virus thực hiện hấp thụ và nhân lên chỉ trong tế bào này và phá hủy nó. Một số lƣợng lớn đại thực bào phế nang phổi bị virus xâm nhập rất sớm (Nguyễn Bá Hiên và cs, 2007).
Khi các phế nang bị phá hủy, khả năng trao đổi khí của phổi bị giảm sút, dẫn đến hiện tƣợng khó thở vì vậy dẫn đến tần số hô hấp phải tăng để tăng lƣợng oxy trao đổi. Phổi bị viêm, nhục hóa, dính vào lồng ngực, diện tích trao đổi bị thu hẹp khiến lợn khó thở, phải há mồm để thở, ngồi nhƣ chó ngồi nhất là những ngày nắng nóng, tình trạng kéo dài khiến lợn mệt mỏi, bỏ ăn, giảm tăng trọng hoặc có thể chết (trƣờng hợp lợn TN1 và TN3).
Khi khó thở kéo dài, lợn có biểu hiện mệt mỏi, chảy nƣớc mũi trong, loãng sau đó đặc dần, có màu trắng đục. Hiện tƣợng này là do quá trình viêm xảy ra ở phổi, làm tăng quá trình xung huyết tiết dịch, dịch rỉ viêm đƣợc hình thành, chảy ra có màu trong loãng, sau đó quá trình viêm nặng thêm, thu hút bạch cầu tới tiêu diệt mầm bệnh, chết đi làm cho nƣớc mũi đặc dần và có màu đục.
Ngày 13 và 14 có 2 lợn đã chết (lợn thí nghiệm 1 và 3), có thể do sau khi nhiễm PRRSV-CG-03 2 cá thể này đã bị bội nhiễm vi khuẩn khác. Chúng tôi đã kiểm tra và thấy tế bào đa nhân trung tính tăng lên rõ rệt.
Diễn biến về thân nhiệt khi lợn mắc PRRS đƣợc Yonggang Liu và cộng sự (2010) cho biết. Có tới 13 trong số 16 lợn thí nghiệm sốt trên 410 C, ở các ngày thứ 5, 6 và 9, chủ yếu là 40,2 – 40,50C. Cá biệt có trƣờng hợp sốt 41,30C ở 21 ngày, sau đó thân nhiệt giảm xuống 400C trong khoảng 22- 28 ngày. Kết quả này tƣơng tự nhƣ theo dõi của chúng tôi, tuy nhiên diễn biến về mặt thời gian có khác nhau, có lẽ do độc lực của PRRSV và phản ứng của từng cá thể lợn với virus là khác nhau dẫn đến thời gian biến đổi về thân nhiệt cũng khác nhau.
Bảng 4.6. Tần số hô hấp của lợn trƣớc gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG -03. (Lần/phút) PRRSV – CG -03. (Lần/phút)
Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 31,2 32,2 30,4 32,2 31,3 31,5 32,2 30,2 32,0 31,0 30,1 31,1 2 30,3 28,3 28,4 28,2 31,4 29,3 30,5 31,2 31,3 31,5 30,5 31,0 3 29,2 29,2 31,0 30,0 31,1 30,1 28,4 28,6 28,4 28,3 28,6 28,5 4 29,2 28,4 29,5 28,3 28,1 28,7 28,2 27,2 28,0 29,0 28,1 28,1 5 29,2 31,3 30,9 31,4 29,1 30,4 29,2 28,2 31,2 30,4 31,0 30,0 6 29,3 29,3 28,0 29,2 28,2 28,8 32,5 30,4 32,3 31,5 31,3 31,6 7 28,5 28,3 28,2 28,3 28,2 28,3 32,2 31,4 31,1 28,5 28,3 30,3
Bảng 4.7. Tần số hô hấp của lợn sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG – 03. (Lần/phút) PRRSV – CG – 03. (Lần/phút)
Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 34,2 35,2 35,4 33,2 30,3 33,7 29,2 28,2 26,0 23,0 31,0 27,5 2 38,3 38,3 38,4 38,2 33,4 37,3 30,5 30,2 31,3 31,5 30,5 30,8 3 43,2 45,2 43,0 43,0 44,1 43,7 31,4 30,6 33,4 33,3 30,6 31,9 4 49,2 48,4 49,5 48,3 48,1 48,7 31,2 30,2 29,0 30,0 33,1 30,7 5 59,2 53,3 35,9 55,4 59,1 52,6 29,2 29,2 28,2 28,4 28,0 28,6 6 73,3 69,3 68,0 69,2 68,2 69,6 28,5 29,4 29,3 28,5 28,3 28,8 7 78,5 78,3 78,2 85,3 78,2 79,7 28,2 28,4 28,1 28,5 28,3 28,3 8 81,5 81,2 77,7 84,8 84,3 81,9 28,2 28,2 28,0 28,0 28,1 28,1 9 84,4 84,9 84,2 84,5 84,5 84,5 30,3 32,5 31,4 30,0 30,3 30,9 10 84,8 84,3 84,2 84,5 84,2 84,4 30,1 30,3 30,3 30,1 30,2 30,2 11 79,8 84,2 84,2 84,8 84,5 83,5 31,5 32,4 31,5 32,2 30,4 31,6 12 77,0 84,0 73,8 84,3 84,3 80,7 30,3 31,2 30,3 31,4 30,3 30,7 13 - 84,5 73,9 84,2 84,0 81,7 32,2 31,3 31,1 31,2 30,3 31,2 14 - 84,2 - 84,5 84,2 84,3 31,4 32,2 31,4 30,3 31,2 31,3 15 - 81,0 - 84,2 84,4 83,2 31,0 31,3 33,2 32,4 31,1 31,8 16 - 81,0 - 84,3 77,0 80,8 30,5 31,0 31,4 30,3 30,3 30,7 17 - 84,8 - 74,8 74,5 78,1 31,2 31,0 31,3 31,2 31,3 31,2 18 - 84,2 - 74,0 74,1 77,5 31,3 32,5 31,4 31,0 31,3 31,5 19 - 69,0 - 69,7 69,8 69,5 31,4 28,6 28,4 38,3 38,6 33,1 20 - 68,5 - 69,0 69,4 68,9 38,5 38,4 38,3 38,5 38,3 38,4 21 - 68,5 - 68,5 69,1 68,7 38,3 38,5 38,1 38,3 38,4 38,3
Hình 4.4. Tần số hô hấp trƣớc khi gây nhiễm 7 ngày và 21 ngày sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03.
Ghi chú: TBTN – Tần số hô hấp trung bình trong ngày của lô lợn thí nghiệm TBĐC – Tần số hô hấp trung bình trong ngày của lô lợn đối chứng
Nhận xét: Kết quả ở hình 4.4 cho thấy:
+ Tần số hô hấp của lô lợn đối chứng phù hợp với chỉ tiêu sinh lý bình thƣờng. + Tần số hô hấp ở lợn sau gây nhiễm PRRSV tăng nhiều so với trƣớc gây nhiễm, nó vƣợt trên mức chỉ tiêu sinh lý bình thƣờng. Theo chúng tôi, tần số hô hấp tăng cao ở thời gian đầu bị bệnh có thể là phản ứng phòng vệ nhằm giảm bớt thân nhiệt. Tuy nhiên đây cũng có thể là triệu chứng nguyên phát của sự tổn thƣơng ở phổi. Trong lâm sàng, sự tăng thân nhiệt và tăng tần số hô hấp thƣờng song hành, tƣơng tác lẫn nhau trong các trƣờng hợp sốt cao và viêm phổi. Trong đó, sốt cao là nguyên nhân đầu tiên làm tăng tần số hô hấp và hiện tƣợng thở nhanh, thở sâu cũng có thể trở thành nguyên nhân làm kế phát thêm các quá trình viêm họng, viêm thanh quản, viêm phế quản và viêm phổi. Khi đó lợn bệnh không chỉ tăng tần số hô hấp mà còn kèm theo hiện tƣợng khó thở, làm cho bệnh diễn biến phức tạp.
4.2.3. Nhịp tim của lợn trƣớc và sau gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03
Do hoạt động của hệ tim mạch liên quan mật thiết với các khí quan khác trong cơ thể, bệnh các khí quan khác ít nhiều ảnh hƣởng đến hệ tim mạch.
thống trong cơ thể, làm giảm thích ứng của cơ thể với môi trƣờng bên ngoài.
Trong thời gian thí nghiệm chúng tôi tiến hành theo dõi tần số tim mạch của cả 10 lợn (5 con gây nhiễm và 5 con đối chứng) ở 2 thời điểm khác nhau trong ngày bằng cách sử dụng tai nghe, áp tai nghe vào thành ngực vùng tim để nghe tiếng tim. Chúng tôi thu đƣợc 2 bảng sau:
Bảng 4.8. Nhịp tim của lợn trƣớc khi gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03. (Nhịp/phút) PRRSV- CG - 03. (Nhịp/phút)
Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 91,2 92,2 90,4 92,2 91,3 91,5 92,2 90,2 92,0 91,0 90,1 91,1 2 90,3 88,3 88,4 88,2 91,4 89,3 90,5 91,2 91,3 91,5 90,5 91,0 3 89,2 89,2 91,0 90,0 91,1 90,1 88,4 88,6 88,4 88,3 88,6 88,5 4 89,2 88,4 89,5 88,3 88,1 88,7 88,2 87,2 88,0 89,0 88,1 88,1 5 89,2 81,3 90,9 91,4 89,1 88,4 89,2 88,2 91,2 90,4 91,0 90,0 6 89,3 89,3 88,0 89,2 88,2 88,8 92,5 90,4 92,3 91,5 91,3 91,6 7 88,5 88,3 88,2 88,3 88,2 88,3 92,2 91,4 91,1 88,5 88,3 90,3
Bảng 4.9. Nhịp tim của lợn sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03. (Nhịp/phút) (Nhịp/phút)
Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 90,2 88,3 88,0 88,4 88,1 88,6 88,2 98,4 98,5 88,3 88,9 92,46 2 88,5 98,3 88,2 88,3 88,2 90,3 88,5 88,2 92,3 95,5 89,8 90,86 3 89,5 99,4 89,1 98,5 98,0 98,4 88,3 93,3 89,0 90,2 89,4 90,0 4 89,7 99,5 89,5 98,4 98,4 95,1 88,4 93,2 92,0 98,2 89,5 92,3 5 110,7 99,8 89,6 99,8 119,6 103,9 98,2 87,2 88,2 93,5 98,3 93,1 6 111,5 110,3 100,2 120,4 121,1 112,7 108,3 87,3 97,0 90,6 89,7 94,6 7 111,5 120,4 112,8 131,4 124,9 120,2 98,2 99,4 95,1 94,0 90,3 95,4 8 121,5 121,2 121,7 131,8 130,3 125,3 88,2 99,2 88,0 93,0 96,3 92,9 9 121,4 121,9 122,2 130,5 125,0 124,2 98,3 108,5 84,8 93,6 90,1 95,1 10 131,8 121,3 121,2 132,5 131,2 127,6 98,1 103,3 86,3 98,6 91,2 95,5 11 125,8 120,2 128,2 128,8 131,5 126,9 89,5 102,4 89,5 95,3 92,2 93,8 12 93,0 120,0 120,8 131,3 132,3 119,5 97,3 95,2 98,3 91,4 92,3 94,9 13 - 121,5 98,9 129,2 131,0 120,2 103,0 88,3 88,1 96,3 93,9 93,9 14 - 131,2 - 128,5 131,2 130,3 92,4 98,2 88,4 90,9 90,2 92,0 15 - 131,0 - 122,2 131,4 128,2 93,0 92,3 88,2 91,3 90,3 91,0 16 - 124,0 - 121,3 134,0 126,5 89,5 93,0 98,4 91,9 90,1 92,6 17 - 109,8 - 121,8 111,5 114,4 88,2 92,0 95,0 90,3 93,2 91,7 18 - 102,2 - 110,0 121,1 111,1 88,3 96,5 89,0 89,2 90,3 91,7 19 - 100,0 - 101,7 109,8 103,8 88,4 95,6 90,0 86,4 89,7 90,0 20 - 98,5 - 100,0 99,4 99,3 88,5 93,4 88,3 88,3 86,3 89,0 21 - 92,0 - 89,5 89,1 90,2 98,3 89,95 88,1 89,4 89,2 91,0
Sau đó chúng tôi xử lý số liệu, thu đƣợc tần số hô hấp trung bình của mỗi lô lợn qua mỗi ngày theo dõi và đƣợc đồ thị sau:
Hình 4.5. Diễn biến nhịp tim trƣớc 7 ngày và 21 ngày sau khi gây nhiễm virus chủng PRRSV – CG - 03
Ghi chú: TBTN – Tần số nhịp tim trung bình trong ngày của lô lợn thí nghiệm TBĐC – Tần số nhịp tim trung bình trong ngày của lô lợn đối chứng
Nhận xét: Kết quả ở hình 4.5 cho thấy:
+ Tần số tim mạch của lợn ở lô đối chứng dao động ở mức sinh lý bình thƣờng.
+ Tần số tim mạch ở lợn bệnh cũng tăng nhiều so với chỉ tiêu sinh lý bình