Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.1. Kết quả gây bệnh thực nghiệm bằng virus chủng PRRSV – CG – 03
– CG – 03
4.1.1. Kết quả xét nghiệm của lợn trƣớc khi gây nhiễm PRRSV – CG - 03
Trƣớc khi gây bệnh thực nghiệm, lợn đƣợc theo dõi trong vòng 7 ngày thấy lợn khỏe mạnh, ăn uống bình thƣờng, không sốt, không có ỉa chảy, không có biểu hiện bất thƣờng. Chúng tôi tiến hành lấy máu của 10 lợn thí nghiệm, chắt huyết thanh kiểm tra hàm lƣợng kháng thể kháng PRRSV bằng phƣơng pháp ELISA. Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 4.1.
Bảng 4.1. Kết quả xét nghiệm kháng thể kháng PRRSV bằng phƣơng pháp ELISA (Giá trị S/P )
Ngày Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 0,11 0,13 0,19 0,12 0,15 0,11 0,16 0,14 0,12 0,15 2 0,14 0,11 0,16 0,11 0,17 0,17 0,14 0,16 0,12 0,28 3 0,13 0,12 0,1 0,1 0,11 0,14 0,16 0,14 0,13 0,16 4 0,12 0,14 0,15 0,13 0,11 0,12 0,12 0,1 0,1 0,11 5 0,12 0,13 0,1 0,14 0,11 0,12 0,12 0,12 0,14 0,1 6 0,13 0,13 0,1 0,12 0,12 0,15 0,14 0,13 0,15 0,13 7 0,15 0,13 0,12 0,13 0,12 0,12 0,14 0,11 0,15 0,13
Ghi chú: : S/P < 0,3 Âm tính; 0,3<S/P<0,4 Nghi ngờ.
Nhìn vào bảng 4.1, kết quả xét nghiệm huyết thanh bằng phƣơng pháp ELISA ta thấy cả 10 lợn đƣợc lựa chọn cho thí nghiệm đều có giá trị S/P<0,3 điều đó chứng tỏ không có kháng thể kháng PRRSV trong máu, tức là không có khả năng bảo hộ cho lợn khi bị PRRSV tấn công.
Đồng thời chúng tôi tiến hành kiểm tra sự có mặt của virus PRRS và một số virus khác bằng phƣơng pháp RT – PCR. Kết quả đƣợc trình bày trong bảng 4.2
Bảng 4.2. Kết quả xét nghiệm sự có mặt của virus PRRS và một số virus khác bằng phƣơng pháp RT – PCR
Virus Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 PRRSV - - - -
PCV2 - - - - FMDV - - - - CSFV - - - - - - - -
Ghi chú: + Dương tính; - Âm tính
PRRSV : Virus gây ra Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn PCV2 : Porcine Circovirus Type 2
FMDV : Virus lở mồm long móng CSFV : Virus dịch tả lợn
Theo bảng 4.2, chúng tôi thấy toàn bộ 10 lợn thí nghiệm đều cho kết quả âm tính với virus PRRS, PCV2, FMDV, CSFV. Nhƣ vậy, cả 10 lợn đều đạt yêu cầu thí nghiệm. Trƣớc khi gây bệnh chúng tôi tiến hành theo dõi và đo thân nhiệt của 10 lợn thí nghiệm.
Bảng 4.3 Kết quả đo thân nhiệt trƣớc khi gây nhiễm virus chủng PRRSV- CG - 03 chủng PRRSV- CG - 03
(Đơn vị 0C )
Ngày Lô thí nghiệm Lô đối chứng
1 2 3 4 5 x 1 2 3 4 5 x 1 38,4 38,2 38,4 38,2 38,3 38,3 38,2 38,2 38,0 38,0 38,1 38,1 2 38,3 38,3 38,4 38,2 38,4 38,3 38,5 38,2 38,3 38,5 38,5 38,4 3 38,2 38,2 38,0 38,0 38,1 38,1 38,4 38,6 38.4 38,3 38,6 38,5 4 38,2 38,4 38,5 38,3 38,1 38,3 38,2 38,2 38,0 38,0 38,1 38,1 5 38,2 38,3 38,0 38,4 38,1 38,2 38,2 38,2 38,2 38,4 38,0 38,2 6 38,3 38,3 38,0 38,2 38,2 38,2 38,5 38,4 38,3 38,5 38,3 38,4 7 38,5 38,3 38,2 38,3 38,2 38,3 38,2 38,4 38,1 38,5 38,3 38,3 Nhận xét:
Theo bảng số liệu trên ta có một số nhận xét sau:
+ 10 lợn đƣợc theo dõi 7 ngày trƣớc khi gây nhiễm đều có nhiệt độ trung bình ổn định, phù hợp với nhiệt độ sinh lý bình thƣờng của lợn.
+ Cả 10 lợn đều đạt yêu cầu thí nghiệm và chúng tôi tiến hành gây bệnh thực nghiệm cho lợn.
4.1.2. Kết quả gây bệnh thực nghiệm bằng chủng virus PRRSV – CG - 03
Hình 4.1. Nhỏ PRRSV – CG - 03 Hình 4.2. Lấy mẫu máu xét nghiệm
Sau khi gây bệnh thực nghiệm cho lợn bằng virus chủng PRRS – CG – 03. chúng tôi tiến hành lấy máu, dịch swab, phân kiểm tra vào ngày thứ 3, 5, 7, 9 , 11, 13, 15, 17, 19, 21, 28 sau khi gây nhiễm. Sau đó, chúng tôi làm xét nghiệm các mẫu trên bằng phƣơng pháp RT – PCR để phát hiện sự có mặt của virus. Kết quả đƣợc thấy ở bảng 4.4.
Bảng 4.4. Kết quả xác định sự có mặt của virus PRRS bằng phƣơng pháp RT – PCR
Ngày sau gây nhiễm
Số mẫu dƣơng tính/ Số mẫu kiểm tra Lợn thí nghiệm Lợn đối chứng
Máu Dịch swab Phân Máu Dịch swab Phân
3 4/5 5/5 1/5 0/5 0/5 0/5 5 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 7 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 9 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 11 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 13 5/5 5/5 5/5 0/5 0/5 0/5 15 4/4 4/4 4/4 0/5 0/5 0/5 17 4/4 4/4 4/4 0/5 0/5 0/5 19 3/3 3/3 3/3 0/5 0/5 0/5 21 3/3 3/3 3/3 0/5 0/5 0/5 28 3/3 2/3 1/3 0/5 0/5 0/5
Nhận xét: Kết quả bảng 4.4 cho thấy:
+ Ở ngày thứ 3 sau khi gây nhiễm, cả 5 lợn TN (1, 2, 3, 4 và 5) đều cho kết quả dƣơng tính (+) với virus PRRS dịch swab (dịch mắt, dịch mũi), máu và phân âm tính (-). Phải đến ngày thứ 5 và ngày thứ 7 thì cả 5 lợn thí nghiệm đều cho kết quả (+) với virus PRRS ở cả trong máu, dịch swab (nhử mắt, nhử mũi) và phân.
+ Lợn đối chứng ở tất cả các lần lấy mấu đều cho kết quả âm tính (-). Điều đó chứng tỏ chúng tôi đã gây nhiễm thành công chủng PRRSV – CG - 03.