2.5.1. Triệu chứng của bệnh PRRS
Lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản thƣờng có các đặc trƣng lâm sàng: lợn nái có chửa thƣờng bị sảy thai vào giai đoạn cuối hoặc thai chết lƣu ở giai đoạn 2, trở thành thai gỗ hoặc lợn sơ sinh bị chết yểu. Lợn ốm thƣờng sốt cao 40 - 420C, thậm chí cao hơn. Lợn bị viêm phổi nặng, ỉa chảy, tai chuyển từ màu hồng sang đỏ thẫm, xanh đến tím đen do tụ huyết rất phổ biến ở lợn bệnh. Với lợn nái đang chửa, nuôi con còn biểu hiện triệu chứng: lƣời uống nƣớc, mất sữa, viêm vú, da biến màu từ đỏ sẫm thành đỏ tím ở núm vú, mõm, da vùng cổ và vùng bụng, âm hộ…, đẻ sớm hoặc hôn mê, rồi chết. Lợn con mắc bệnh thể trạng yếu, khó bú, mắt có dử màu nâu, da có nhiều vết phồng, bị viêm phổi nặng nhiều khi lợn bị ỉa chảy và khả năng chết rất cao sau khi sinh, đặc biệt ở lợn con cai sữa. Lợn ở tất cả các lứa tuổi đều có thể nhiễm PRRSV, tuy nhiên lợn con và lợn nái mang thai đƣợc xem là mẫn cảm hơn. Lợn rừng cũng đã đƣợc xác định là mắc bệnh và đây cũng đƣợc coi là nguồn lây nhiễm tiềm năng PRRS [18].
Thông thƣờng lợn bị nhiễm chủng PRRSV dạng cổ điển có tỷ lệ chết rất thấp, 1 - 5%. Nếu thấy gia súc chết nhiều, thƣờng là do nhiễm trùng kế phát: dịch tả lợn, Pasteurella multocida suis, Salmonella spp, Streptococus suis, E. coli, Mycoplasma spp, v.v…, Tuy nhiên, năm 2006 tại Trung Quốc các nhà nghiên cứu
với quy mô lớn nhất từ trƣớc đến nay đã khẳng định có sự biến đổi về độc lực của virut, hậu quả lợn bị nhiễm PRRSV độc lực cao có tỷ lệ chết rất cao trên 20% trong tổng số đàn nhiễm bệnh.
Tại Việt Nam, kết quả theo dõi lợn mắc PRRS trong các ổ dịch ở một số tỉnh đồng bằng Bắc bộ đầu năm 2007 cũng cho thấy: lợn nái bị sảy thai, thai chết lƣu ở thời kỳ chửa 2 hoặc lợn con chết yểu ngay sau khi sinh. Đối với lợn con theo mẹ, lợn sau cai sữa thƣờng bị viêm phế quản, phổi rất nặng và chết với tỷ lệ cao (Lê văn Năm, 2007) [13]. Chúng ta đã phân lập đƣợc một số vi sinh vật khác gây nhiễm khuẩn kế phát nhƣ: liên cầu khuẩn (Streptococcus suis), vi khuẩn gây bệnh tụ huyết trùng (Pasteurella spp), vi khuẩn tụ cầu (Staphylococcus aureus), E. coli và một số trƣờng hợp còn phát hiện dịch tả lợn nhƣ ở tỉnh Hải Dƣơng (Cục Thú y, 2008) [3]. Các trƣờng hợp bị bệnh kế phát do vi khuẩn làm cho lợn bị bệnh rất nặng và lợn thƣờng chết nhiều…,
Lợn nái: - Ở giai đoạn mang thai: sốt 40 - 420C, biếng ăn, sảy thai vào giai đoạn chửa kỳ 2 hoặc thai chết lƣu chuyển thành thai gỗ; thể cấp tính tai chuyển màu xanh, con vật đẻ non vào giai đoạn cuối của thời kỳ mang thai hoặc thai chết lƣu.
- Ở giai đoạn đẻ và nuôi con: lợn nái biểu hiện sốt cao, biếng ăn, lƣời uống nƣớc, mất sữa, viêm vú, phần da mỏng nổi ban đỏ biến màu (hồng sau đỏ sẫm), lờ đờ, hôn mê; lợn con mới sinh rất yếu, tai xanh nhạt và chết yểu.
- Ở giai đoạn sau cai sữa: lợn nái động dục không bình thƣờng (kéo dài) hoặc phối giống mà không thụ thai, ho và viêm phổi nặng.
Lợn con: sốt cao 40 - 420C, gầy yếu, khó thở, mắt có dử màu nâu, phần da mỏng nhƣ da bụng, gần mang tai thƣờng có màu hồng, đôi khi da có vết phồng rộp, ỉa chảy nhiều, ủ rũ, run rẩy và thƣờng bị chết.
Lợn choai, lợn thịt: sốt cao 40 - 420C, biếng ăn, ủ rũ, ho, thở khó; những phần da mỏng nhƣ phần da gần tai, phần da bụng nổi ban đỏ lúc đầu màu hồng nhạt, dần dần chuyển thành màu hồng thẫm và xanh nhạt.
Lợn đực giống: sốt, bỏ ăn, đờ đẫn hoặc hôn mê, giảm hƣng phấn hoặc mất tính dục, lƣợng tinh dịch ít. Các trƣờng hợp cấp tính, lợn đực bị sƣng dịch hoàn. Phần lớn lợn đực nhiễm virus không có biểu hiện lâm sàng, nhƣng tinh dịch có virus kéo dài từ 6 - 8 tháng.
2.5.2. Bệnh tích của bệnh PRRS
- Ở lợn nái bị sảy thai: âm môn sƣng tụ huyết; niêm mạc tử cung và niêm mạc âm đạo sƣng thuỷ thũng, tụ huyết, xuất huyết đỏ sẫm và chảy dịch. Nếu lợn nái bị bệnh cấp tính, có viêm phổi thì sẽ thấy phổi sƣng thuỷ thũng, tụ huyết từng đám, trong phế quản có nhiều dịch và bọt khí. Một số lợn nái bệnh còn thể hiện viêm bàng quang, xuất huyết.
- Ở lợn con theo mẹ: thƣờng thấy viêm đƣờng hô hấp cấp với bệnh tích điển hình nhƣ phế quản và phổi sƣng có màu vàng hoặc tụ huyết đỏ, có nhiều dịch và bọt khí trong phế quản. Chùm hạch phổi và hạch hầu sƣng có màu vàng. Nếu có nhiễm khuẩn kế phát do liên cầu (Streptococcus suis) gây viêm não sẽ thấy xung huyết màng não.
- Ở lợn con sau cai sữa: biểu hiện viêm đƣờng hô hấp là chủ yếu, nhƣng tỷ lệ viêm thấp hơn ở lợn con theo mẹ. Bệnh tích thƣờng thấy là viêm phổi thuỷ thũng từng đám, có màu vàng hoặc đỏ do xuất huyết; phế quản chứa nhiều dịch nhày và bọt khí.
Cũng nhƣ lợn con theo mẹ, lợn con sau cai sữa có kế phát các bệnh viêm não, nhiễm trùng huyết do liên cầu khuẩn (Streptococcus suis) và sẽ thấy tụ huyết và dịch hồng ở màng não. Nhiễm kế phát do vi khuẩn tụ huyết trùng sẽ thấy: các phủ tạng bị sƣng, tụ huyết và xuất huyết đỏ. Nhiễm kế phát do vi khuẩn thƣơng hàn sẽ có ỉa chảy và bệnh tích thể hiện tụ huyết, bong tróc niêm mạc ruột và có các nốt loét lan tràn ở niêm mạc vùng van hồi manh tràng.
Các bệnh tích đại thể và vi thể của PRRS hầu hết xuất hiện ở lợn mới sinh. Ở lợn lớn hơn, bệnh tích có thể tƣơng tự nhƣng ít rõ ràng hơn. Bệnh tích đại thể của PRRS cũng khác nhau. Bệnh tích ở phổi có thể từ không có dấu hiệu gì đến phổi cứng lan tràn và kết hợp với một số vi khuẩn kế phát. Hạch lympho bị tấn công chủ yếu thấy ở lợn bé. Bệnh tích vi thể không đặc hiệu, chủ yếu ở phổi và tổ chức lympho. Bệnh tích phổi đặc trƣng bởi viêm phổi kẽ với sự thẩm nhiễm của các tế bào đơn nhân. Các bệnh tích mạch máu, tim và não cũng đƣợc mô tả. Các bệnh tích thai thƣờng ít gặp nhƣ viêm mạch máu, viêm cơ tim và viêm não. PRRSV chỉ là một trong số nguyên nhân gây nên viêm kẽ phổi ở lợn (Cục Thú y, 2008).
2.6. CHẨN ĐOÁN VÀ PHÒNG TRỊ BỆNH 2.6.1. Chẩn đoán
2.6.1.1. Chẩn đoán dựa vào triệu chứng đặc trưng của bệnh
Theo tổ chức Thú Y Thế giới (OIE) quy định nếu trong đàn có những dấu hiệu sau thì có thể nghi nhiễm PRRS:
+ Triệu chứng đƣờng sinh sản: Trong giai đoạn đầu của dịch PRRS, có thể thấy có hiện tƣợng sảy thai ở giai đoạn cuối thời kỳ mang thai và đẻ non có các thai yếu, thai chết lƣu, đồng thời có thai gỗ, lợn con yếu, chết trƣớc khi cai sữa. Tỷ lệ thai chết tăng lên theo độ tuổi của thai: Thai dƣới 2,5 tháng tuổi tỷ lệ chết 20%, thai trên 2,5 tháng tuổi tỷ lệ chết là 93,75%. Lợn nái trong giai đoạn nuôi con thƣờng lƣời uống nƣớc, viêm vú, mất sữa, viêm tử cung và âm đạo, mí mắt sƣng, có thể thấy phân táo bón hoặc ỉa chảy, bị viêm phổi. Ở lợn nái tăng đột biến tỷ lệ sảy thai, đẻ non, thai chết lƣu, tỷ lệ lợn con sơ sinh chết cao, ... Các hiện tƣợng này xảy ra trong khoảng từ 8 – 20% tổng số lợn nái của cơ sở chăn nuôi (Nguyễn Văn Thanh, 2007).
Đối với lợn đực giống: Triệu chứng chủ yếu là viêm dịch hoàn, bìu dái thấy nóng đỏ (95%), dịch hoàn có biểu hiện sƣng đau, lệch vị trí (85%), giảm tính hƣng phấn trong hoạt động giao phối (Lê Văn Năm, 2007).
Lợn đực giống giảm hƣng phấn hoặc mất tính dục, lƣợng tinh dịch thƣờng ít, chất lƣợng tinh dịch kém, thể hiện: nồng độ tinh trùng (C) thƣờng dƣới 8x107; hoạt lực của tinh trùng (A) dƣới 0,6; sức kháng của tinh trùng (R) dƣới 3000; tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K) tăng trên 10%; tỷ lệ sống của tinh trùng giảm xuống còn dƣới 70% và độ nhiễm khuẩn tăng cao trên 2x104
. Lợn đực giống rất lâu mới hồi phục đƣợc khả năng sinh sản (Nguyễn Văn Thanh, 2007).
Khi thấy lợn có các triệu chứng nêu trên, bƣớc đầu có thể nghi ngờ là PRRS. Tuy nhiên, để đảm bảo độ chính xác cần lấy mẫu bệnh phẩm (máu lợn bệnh còn sống hoặc các tổ chức bệnh phẩm nhƣ phổi, hạch, lách, ... của lợn chết hoặc lợn ốm sắp chết) để làm các xét nghiệm chẩn đoán trong phòng thí nghiệm.
+ Triệu chứng đường hô hấp: Triệu chứng này xuất hiện ở lợn thịt, lợn con sau cai sữa, lợn bị viêm phổi nặng, ho nhiều, thở rất khó khăn, thở dốc, thở thể bụng do khó thở có con thở ngồi nhƣ chó ngồi. Do thiếu oxy nên hiện tƣợng xanh da xảy ra và biểu hiện ban đầu ở tai.
2.6.1.2. Chẩn đoán dựa vào bệnh tích đặc trưng của bệnh
Nghiên cứu bệnh tích là một trong những khâu quan trọng để xác định các tổn thƣơng do bệnh nguyên gây ra. Kết quả nghiên cứu về bệnh tích đại thể và bệnh tích vi thể ở các nhóm lợn bệnh của nhiều tác giả cho thấy:
*) Lợn nái chửa: Đặc biệt là lợn nái chửa kỳ 2 thƣờng bị đẻ non hoặc đẻ chậm. Trƣờng hợp đẻ non (sảy thai) thì thấy nhiều thai chết, trên cơ thể thai chết lƣu thƣờng có nhiều đám thối rữa. Trƣờng hợp đẻ muộn thì số thai chết lƣu ít hơn nhiều so với đẻ non. Song số lợn con sinh ra rất yếu, nhiều con chết trong lúc đẻ do thời
gian đẻ kéo dài. Mổ khám thấy bệnh tích tập trung ở phổi, phổi bị phù nề, viêm hoại tử và tích nƣớc, cắt miếng phổi bỏ vào bát nƣớc thấy phổi chìm (Nguyễn Văn Thanh, 2007).
*) Lợn nái nuôi con, lợn choai và lợn vỗ béo: Bệnh tích tập trung ở phổi. Các ổ viêm thƣờng gặp ở thùy đỉnh, song cũng thấy ở các thùy khác nhƣng hầu nhƣ ở các ổ viêm apse đó không xuất hiện đối xứng. Các ổ viêm apse thƣờng có màu xám đỏ, rắn, chắc. Khi cắt đôi đám phổi có biểu hiện bệnh tích thấy có mủ chảy ra, mô phổi cũng lồi ra và có màu đỏ xám loang lổ nhƣ tuyến ức biểu hiện màu nhƣ đá granit. Trong một thùy phổi có nhiều đám biến đổi nhƣ mô tả, phổi bị phù nề tích nƣớc nặng. Những lợn bị táo bón thì ruột chứa nhiều cục phân rắn chắc, niêm mạc ruột bị viêm nhƣng ở những lợn bị tiêu chảy thì thành ruột mỏng, trên bề mặt có phủ một lớp màu nâu.
*) Lợn con theo mẹ: Xác gầy, da trùng, ruột chứa nhiều nƣớc, đôi khi thấy một số cục sữa vón không tiêu, thành ruột mỏng, loét van hồi manh tràng. Hạch màng treo ruột xuất huyết, gan sƣng và tụ huyết. Thận xuất huyết lấm tấm hình đầu đinh ghim, não sung huyết, hạch vùng hầu, vùng họng và hạch amidan sƣng, sung huyết (Phạm Sỹ Lăng và Văn Đăng Kỳ, 2007).
Khi quan sát bệnh tích vi thể ở phổi, nhiều tác giả kết luận. Thƣờng thấy dịch thẩm xuất và hiện tƣợng thâm nhiễm tế bào viêm, trong phế nang chứa đầy dịch viêm và đại thực bào, một số trƣờng hợp hình thành tế bào khổng lồ nhiều nhân. Một bệnh tích đặc trƣng nữa là sự thâm nhiễm của tế bào phế nang loại II (pneumocyte) làm cho phế nang bị nhăn lại, thƣờng bắt gặp đại thực bào bị phân hủy trong phế nang (Nguyễn Văn Thanh, 2007).
2.6.1.3. Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm
Chẩn đoán huyết thanh học
Có thể phát hiện kháng thể kháng PRRSV trong huyết thanh, dịch của cơ thể hoặc từ thai chết lƣu bằng một số phƣơng pháp huyết thanh học bao gồm phƣơng pháp kháng thể huỳnh quang gián tiếp, phƣơng pháp miễn dịch enzym trên thảm tế bào một lớp, ELISA và phản ứng trung hòa huyết thanh.
Trong các phƣơng pháp trên, ELISA là phƣơng pháp thuận tiện hơn cả vì có thể chẩn đoán một số lƣợng lớn huyết thanh, kết quả thu đƣợc của các phòng thí nghiệm (khi chẩn đoán cùng mẫu huyết thanh) là tƣơng đối đồng nhất. Ƣu điểm nữa của phƣơng pháp này là có thể phát hiện đƣợc cả chủng PRRSV có nguồn gốc Bắc Mỹ và các chủng có nguồn gốc châu Âu, trong khi đó phƣơng pháp huỳnh quang
kháng thể hoặc phƣơng pháp miễn dịch enzym trên thảm tế bào chỉ phát hiện đƣợc các chủng virus về mặt kháng nguyên gần với chủng dùng trong phản ứng.
Trong khi đánh giá kết quả của một phản ứng huyết thanh, phải cân nhắc đến trạng thái miễn dịch của đàn sau khi đƣợc tiêm phòng bởi vì hiện nay chƣa có phản ứng huyết thanh học nào phân biệt đƣợc kháng thể do lợn mắc tự nhiên hay kháng thể do vacxin kích thích tạo nên.
Động thái kháng thể kháng PRRSV khi đánh giá bằng các phản ứng huyết thanh học kể trên là tƣơng tự nhau. Có thể phát hiện kháng thể từ 7 - 14 ngày sau khi lợn bị nhiễm virus. Hàm lƣợng kháng thể đạt mức tối đa vào 30 - 50 ngày sau khi nhiễm, sau đó giảm dần và không phát hiện đƣợc nữa khoảng 4 - 6 tháng sau khi bị nhiễm.
Phản ứng trung hòa huyết thanh có lẽ kém nhạy hơn các phản ứng huyết thanh học khác vì kháng thể trung hòa xuất hiện chậm. Tuy nhiên phản ứng trung hòa lại là chỉ thị tốt nhất để đánh giá tình trạng bệnh trong quá khứ vì kháng thể trung hòa có thể tồn tại ít nhất 1 năm.
Phát hiện virus
Để phát hiện virus, lấy bệnh phẩm là huyết thanh, huyết tƣơng, bạch cầu, phổi, hạch amidan, tổ chức lympho, dịch báng của thai chết lƣu hoặc lợn chết ngay sau khi sinh. Nhìn chung bệnh phẩm ở lợn con thích hợp hơn lợn già vì virus tồn tại trong một thời gian dài ở lợn con. Có thể phân lập đƣợc virus từ huyết thanh trong vòng từ 4 - 6 tuần sau khi bị nhiễm ở lợn đang bú, lợn cai sữa và lợn nhỡ và trong 1 - 2 tuần sau khi nhiễm ở lợn đực trƣởng thành và lợn nái. Cần phải bảo quản lạnh ngay lập tức bệnh phẩm dùng để phát hiện virus.
Có thể áp dụng một số kỹ thuật sau để phát hiện virus:
- Phân lập virus trên một số loại tế bào: tế bào phế nang của lợn, tế bào MA- 104, tế bào MARC-145, CL2621 và CRL11171.
- Phƣơng pháp miễn dịch bệnh lý.
- Phƣơng pháp huỳnh quang gián tiếp phát hiện kháng nguyên. - Phƣơng pháp nhân gen PCR.
- Phƣơng pháp lai phân tử tại chỗ (insitu hybrization).
Thực tế phân lập PRRSV gặp nhiều khó khăn do tế bào để phân lập virus là đại thực bào phế nang của lợn, tế bào này cần đƣợc lấy từ lợn sạch bệnh khoảng 6 - 8 tuần tuổi. Không phải phòng thí nghiệm nào cũng có sẵn lợn sạch bệnh và các
dòng tế bào thƣờng trực không thể thay thế hoàn toàn đƣợc tế bào đại thực bào phế nang vì chúng kém nhạy với virus. Thêm vào đó các lô đại thực bào khác nhau cũng không phải luôn có độ nhạy giống nhau đối với virus; lý do này chƣa biết rõ, nhƣng rõ ràng cần phải kiểm tra mỗi mẻ tế bào trƣớc khi dùng [5]. Sau khi phân lập đƣợc virus, giám định bằng phƣơng pháp huỳnh quang gián tiếp.
Một số dòng tế bào thận khỉ (MA-104) có thể thay thế đƣợc đại thực bào, nhƣng dòng tế bào này không giúp sự tăng sinh của các chủng virus đặc biệt là các chủng châu Âu.
Các phƣơng pháp RT-PCR và nested PCR cũng là các phƣơng pháp có độ nhạy cao để phát hiện RNA của virus và đƣợc dùng nhiều đối với các tổ chức khác nhau và huyết thanh của lợn. Các phƣơng pháp này cũng rất hữu dụng khi có vấn đề về phân lập virus, ví dụ nhƣ khi xét nghiệm tinh dịch và xét nghiệm một số tổ chức đã bị phân huỷ do nhiệt độ trong lúc vận chuyển mẫu. Ngƣời ta cũng đã thiết lập một phƣơng pháp multiplex PCR để phân biệt chủng virus châu Âu và Bắc Mỹ.
2.6.2. Các biện pháp ph ng và điều trị