Tiến hành tại bộ mụn Dược lớ - Trường Đại học Y Hà Nội, năm 2007.
* Độc tớnh cấp (Theo phương phỏp Litchfiel – Wilcoxon): Chuột nhắt trắng nhịn đúi 12 giờ được chia thành 9 lụ khỏc nhau, mỗi lụ 10 con. Chuột được uống cao lỏng nấm Hồng chi Đà Lạt (Ganoderma lucidum
W.Curt:Fr. Karst.) do Cụng ty cổ phần Dược vật tư Y tế Lõm Đồng cung cấp với nồng độ tăng dần trong cựng một khối lượng 0,2ml/10g thõn trọng
để xỏc định liều thấp nhất gõy chết 100% và liều cao nhất gõy chết 0%. Chuột được theo dừi tỡnh trạng chung trong suốt 07 ngày và tỉ lệ chết trong 72 giờ của từng lụ sau khi uống thuốc. Nếu chuột chết, được mổ để
quan sỏt đại thể.
* Độc tớnh bỏn trường diễn:
- Thỏ thớ nghiệm được chia thành 3 lụ, mỗi lụ 10 con:
+ Lụ 2: uống cao lỏng nấm Hồng chi Đà Lạt với liều 2g/kg/24giờ liờn tục trong 30 ngày.
+ Lụ 3: uống cao lỏng nấm Hồng chi Đà Lạt với liều 10g/kg/24giờ liờn tục trong 30 ngày (tương đương với liều cho người và gấp 5 lần liều thường dựng cho người).
Trong suốt 30 ngày thớ nghiệm, chỳng tụi tiến hành: theo dừi tỡnh trạng chung của thỏ (cõn nặng và diễn biến hoạt động hàng ngày).
- Trước lỳc uống thuốc, sau 15 ngày và 30 ngày uống thuốc thỏ được cõn và lấy mỏu đỏnh giỏ:
+ Chức phận tạo mỏu qua: số lượng hồng cầu, bạch cầu, cụng thức bạch cầu, định lượng huyết sắc tố, định lượng hematocrit.
+ Chức năng gan: định lượng hoạt độ transaminase trong huyết thanh. + Chức năng thận qua: định lượng creatinin, ure huyết thanh.
- Mụ bệnh học: cuối đợt thớ nghiệm (sau 30 ngày) 2/3 số thỏ của mỗi lụ
được giết; cũn 1/3 số thỏ của mỗi lụ được giữ lại nuụi tiếp trong 15 ngày, sau
đú mới giết thỏ đểđỏnh giỏ:
+ Hỡnh ảnh đại thể của gan, tuỵ, lỏch, thận sau 30 ngày uống thuốc bằng kớnh lỳp.
+ Hỡnh ảnh vi thể: sau khi quan sỏt, đỏnh giỏ hỡnh ảnh đại thể. Cỏc phủ
tạng gan và thận được cố định bằng formol, đỳc chuyển qua cỏc dung dịch để
loại nước, rồi đỳc trong khối parafin, cắt lỏt dày 5 - 6 àm. Nhuộm tiờu bản bằng phương phỏp Hematoxylin - Eosin. Đọc tiờu bản bằng kớnh hiển vi quang học với độ phúng đại 100 - 400 lần. Chụp ảnh qua kớnh hiển vi huỳnh quang với độ phúng đại 400 lần. Đỏnh giỏ cỏc tổn thương và so sỏnh bằng phương phỏp mụ tả giải phẫu bệnh trờn mẫu tiờu bản và trờn ảnh chụp được từ
Cỏc xột nghiệm mụ bệnh học được làm tại Bộ mụn Giải phẫu bệnh - Trường Đại học Y Hà Nội với sự giỳp đỡ của PGS.TS.Trần Văn Hợp.
Nghiờn cứu về độc tớnh cấp và bỏn trường diễn của thuốc được túm tắt qua mụ hỡnh sau:
Sơ đồ 2.2: Mụ hỡnh nghiờn cứu tớnh an toàn của nấm Hồng chi.