Khả năng ức chế NO định hƣớng kháng viêm in vitro của các hợp chất phân lập đƣợc đánh giá thông qua việc ức chế sản xuất quá mức NO trong các tế bào RAW264.7 đƣợc kích thích bởi LPS. Kết quả cho thấy, ngoại trừ hợp chất A2 và A13, tất cả các hợp chất đƣợc thử nghiệm đều ức chế sản sinh NO phụ thuộc vào liều lƣợng, với giá trị IC50 nằm trong khoảng từ 2.1 đến 84.4 µM (bảng 3.16). Đáng chú ý, tác dụng ức chế NO của hợp chất A9 (TMC-256C1) với giá trị IC50 = 2.1 µM mạnh hơn so với đối chứng dƣơng, L-NMMA (IC50 = 7.6 µM). Trƣớc đó, hợp chất TMC-256C1 phân lập từ chủng Aspergillus niger var niger TC 1629 đƣợc xác định là chất ức chế dẫn truyền tín hiệu IL-4 [49]. Nghiên cứu của Kim và cộng sự năm 2016 đã chỉ ra rằng
TMC-256C1 từ chủng Aspergillus sp. SF-6354 có hoạt tính bảo vệ chống lại độc tính tế bào do glutamate gây ra trong tế bào HT22. TMC-256C1 còn thể hiện tác dụng chống viêm thần kinh trong các tế bào vi mô BV2 đƣợc tạo ra bởi lipopolysaccharides (LPS). TMC-256C1 còn ngăn chặn sự sản xuất các chất trung gian gây viêm là NO và PGE2 do LPS gây ra thông qua việc ức chế biểu hiện protein iNOS và COX-2 [109].
Nigerasperone A (hợp chất A7) cho thấy tác dụng ức chế NO đáng kể (IC50 = 7.4 M) tƣơng đƣơng với tác dụng của L-NMMA. Điều thú vị là tác dụng ức chế NO của rubrofusarin B (hợp chất A6) (IC50 = 84.4 µM) có nhóm metyl ở C-3 thấp hơn đáng kể so với tác dụng của chất tƣơng tự hydroxyl hóa của nó (hợp chất A7). Các hợp chất A1, A4, A10, A12 và A14 ức chế đáng kể sự sản sinh NO, với giá trị IC50 nằm trong khoảng từ 14.5 đến 24.0 µM, trong khi các hợp chất A3, A5 và A11 thể hiện tác dụng ức chế trung bình, với giá trị IC50 trong khoảng 41.3 đến 56.0 µM.
Đây là lần đầu tiên nghiên cứu hoạt tính ức chế NO của các hợp chất A2, A4- A8, và A10-A12, trong đó hợp chất A7 (nigerasperone A) có hoạt tính ức chế NO định
hƣớng kháng viêm rất tốt.
Bảng 3.16. Hoạt tính ức chế NO của các hợp chất A1-A14
Hợp chất IC50 (M)a A1 24.0 2.1 A2 100b A3 56.0 2.5 A4 17.7 2.5 A5 41.3 2.1 A6 84.4 4.2 A7 7.4 0.4 A8 56.5 2.8 A9 2.1 0.3 A10 24.0 1.0 A11 43.8 2.6 A12 19.6 1.0
A13 100
A14 14.5 0.3
L-NMMAc 7.6 0.8
a Giá trị ± SD (n = 3); b Không có hoạt tính (> 100 M); c Đối chứng dƣơng