CHƢƠNG 2 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.1.Nguyên liệu và hóa chất
2.1. Nguyên liệu, hóa chất và thiết bị nghiên cứu
2.1.1.Nguyên liệu và hóa chất
Đối tƣợng nghiên cứu: Chủng vi nấm Aspergillus niger IMBC-NMTP01 đƣợc lƣu tại Viện Hoá sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
Bột silica gel (Kieselgel 60, 230–400 mesh, Merck), Bột pha đảo C18 (ODS-A, 12 nm, S-150 m, YMC Co.,), bản mỏng silica gel 60 F254 (Merck) và RP-18 F254S plates (Merck), các dung môi CH2Cl2, MeOH, EtOAc, n-hexane, acetone, acetonitrile, môi trƣờng PDB, thạch agar-agar, và các loại hóa chất, vật tƣ khác dùng để tinh sạch và xác định cấu trúc các hợp chất.
FBS của GIBCO, Invitrogen, TCA (Sigma), SRB (Sigma). Đĩa 96 giếng nhựa (Corning, USA), pippette (eppendorf), máy đọc ELISA 96 giếng (Bio-rad). Chất tham khảo: Ellipticine (Sigma, USA). Các dòng tế bào ung thƣ do GS.TS. J. M. Pezzuto, Trƣờng Đại học Hawaii và GS. Jeanette Maier, trƣờng Đại học Milan, Italia cung cấp.
Các dòng tế bào ung thƣ bao gồm:
- HepG2: Ung thƣ gan ở ngƣời (human hepatocellular carcinoma) - KB: Ung thƣ biểu mô miệng (human carcinoma in the mouth) - HL-60: Ung thƣ bạch cầu cấp ở ngƣời (human leukemia) - MCF7: Ung thƣ vú ở ngƣời (human breast carcinoma) - SK-Mel-2: Ung thƣ da ở ngƣời (human melanoma)
- LNCaP: Ung thƣ tiền liệt ở ngƣời (human prostate carcinoma)
Lipopolysaccharides (LPS) từ Escherichia- coli của Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS) Life Technologies, Inc., (Gaithersburg, MD, USA). Sodium nitrite, sulfanilamide, N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride và dimethyl sulphoxide (DMSO) của Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA), các hóa chất cần thiết khác của các hãng Sigma, GIBCO, Invitrogen, Promega v.v.
Dòng tế bào RAW 264.7 do GS. TS. Domenico Delfino, Đại học Perugia, Italia cung cấp.
Các chủng vi khuẩn và nấm dùng để thử hoạt tính kháng khuẩn của các hợp chất bao gồm: 3 chủng vi khuẩn gram dƣơng (Enterococcus faecalis ATCC299212,
khuẩn gram âm (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, và Salmonella enterica ATCC13076), và một chủng nấm men Candida albicans ATCC 24433. Ngoài ra còn có các nguyên liệu, hóa chất khác dùng để thử hoạt tính kháng khuẩn.