Phổ COSY (CD3OD, 500 MHz) của A1

Một phần của tài liệu (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào ung thư và kháng khuẩn của các hợp chất thứ cấp từ chủng vi nấm aspergillus niger IMBC NMTP01 (Trang 47 - 50)

3.3.2. Hợp chất A3: Aspernigin (chất mới)

Hình 3.16. Cấu trúc hóa học và tƣơng tác HMBC (), COSY (—) của hợp chất A3 Hợp chất A3 có dạng chất bột màu trắng vô định hình. Công thức phân tử của hợp chất A3 đƣợc dự đoán là C13H17NO7, thông qua các ion giả phân tử tại m/z

334.0692 [M+Cl]- và m/z 298.0917 [M-H]- trên phổ HRESITOFMS. Trên phổ 1H NMR (đo trong DMSO-d6) ghi nhận tín đặc trƣng của vòng benzene thế para tại H

7.03 (br d, J = 8.5 Hz, H-5 và H-9) và 6.66 (br d, J = 8.5 Hz, H-6 and H-8). Trên phổ

1H NMR cũng ghi nhận hai cặp proton germinal tại H 4.30 (dd, J = 3.0, 11.5 Hz, Ha- 1), 4.10 (dd, J = 7.0, 11.5 Hz, Hb-1), 3.55 (dd, J = 3.5, 11.0 Hz, Ha-4), và 3.39 (dd, J = 5.5, 11.0 Hz, Hb-4), hai proton oxymethine tại H 3.62 (m, H-2) và 3.40 (m, H-3), và một nhóm methylene tại H 3.72 (H2-3). Phân tích phổ 13C NMR và HSQC (trong

DMSO-d6) cho thấy các tín hiệu của một carbonyl carbon tại C 163.9 (C-1), bảy sp2 carbon bao gồm sáu tín hiệu của vòng benzene thế para tại C 126.5 (C-4), 129.7 (C-5

và C-9), 115.0 (C-6 và C-8), và 155.7 (C-7) và một carbon không proton mang nitơ tại C 150.1 (C-2), và một nhóm methylene tại C 29.2 (C-3). Trên phổ HMBC, tín hiệu proton tại H 3.72 thể hiện tƣơng tác với C-1, C-2, C-5, và C-6, gợi ý sự có mặt của một đơn vị tyrosine oxime trong phân tử [95, 96]. Phổ 13C NMR cũng ghi nhận các tín hiệu đặc trƣng của phần cấu trúc butane-1,2,3,4-tetraol tại C 67.1 (C-1), 69.3 (C-2), 72.1 (C-3), và 62.9 (C-4). Điều này đƣợc củng cố thông qua các tƣơng tác HMBC từ các tín hiệu proton oxymethylene tại H 4.30/4.10 (H2-1) và H 3.55/3.39 (H2-4) với C- 2 và C-3, cùng với tƣơng tác COSY giữa H2-1/H-2/H-3/H2-4 (Hình 3.6). Sự kết nối của 2 đơn vị butane-1,2,3,4-tetraol và tyrosine oxime thông qua cầu liên kết ester đƣợc khẳng định thông qua tƣơng tác HMBC từ H2-1 đến C-1. Tiến hành so sánh dữ liệu phổ 1H và 13C NMR của hợp chất A3 với aspergillusol A cho thấy hai hợp chất có cấu trúc tƣơng tự, ngoại trừ sự vắng mặt của đơn vị oxime axit 4-hydroxyphenylpyruvic ở hợp chất A3 so với cấu trúc đối xứng của aspergillusol A [95]. Cấu hình tƣơng đối của hợp chất A3 đƣợc đề xuất dựa trên phân tích dữ liệu 1H và 13C NMR của A3 so với các cấu hình tƣơng tự đã biết. Độ dịch chuyển hóa học carbon các vị trí C-2 (C 150.1) và C-3 (C 29.2) của hợp chất A3 gần tƣơng tự với các vị trí của aspergillusol A [C 150.5 (C-2) and 29.6 (C-3)] [95] và 2-(hydroxyimino)-phenylpropanoic acid [C 150.13 (C- 2) và 29.85 (C-3)] cũng nhƣ propanoic 2-(hydroxyimino)-3-(4-hydroxyphenyl) acid [96], cho thấy nhóm chức oxime của hợp chất A3 có cấu hình dạng Z. Tƣơng tự, phổ

1

H và 13C NMR của phần cấu trúc butane-1,2,3,4-tetraol của A3 cho thấy sự phù hợp

với các hợp chất (+)-erythrin and (+)-montagnetol đã biết [97, 98], qua đó khẳng định rằng hai nhóm hydroxy ở C-2 và C-3 có mối quan hệ erythro với nhau. Điều này đƣợc khẳng định thêm bởi hằng số bắt cặp khá nhỏ (J = 3.0 Hz) giữa H-2 và H-3 so với những giá trị đƣợc báo cáo cho các nhóm diol mạch thẳng lân cận dạng threo

erythro [99]. Cuối cùng, cấu trúc của hợp chất A3 đƣợc xác định là 2,3,4-

trihydroxybutyl 2-(hydroxyimino)-3-(4-hydroxyphenyl)propanoate, đƣợc đặt tên là aspernigin.

Đặc điểm hóa lý của hợp chất Aspernigin (A3): Dạng bột màu trắng vô định

hình. Công thức phân tử: C13H17NO7. = +17.0 (c = 0.08, MeOH). HRESITOFMS: m/z 334.0692 [M+Cl]- (tính toán lý thuyết cho công thức C13H17NClO7-, 334.0699), m/z 298.0917 [M-H]- (tính toán lý thuyết cho công thức

C13H16NO7-, 298.0932). 1H NMR (DMSO-d6 và CD3OD, 500 MHz) và 13C NMR (DMSO-d6 và CD3OD, 125 MHz): trình bày ở Bảng 3.2.

Bảng 3.2. Số liệu phổ 1H và 13C NMR của hợp chất A3

Vị trí Ca,b Ha,c (mult., J in Hz) Cd,b Hd,c (mult., J in Hz) 1 67.1 4.30 (dd, 3.0, 11.5) 4.10 (dd, 7.0, 11.5) 68.4 4.45 (dd, 3.0, 11.5) 4.26 (dd, 7.0, 11.5) 2 69.3 3.62 (td, 3.0, 7.0) 71.1 3.82 (td, 3.0, 7.0) 3 72.1 3.40 (m) 73.4 3.59 (m) 4 62.9 3.55 (dd, 3.5, 11.0) 3.39 (dd, 5.5, 11.0) 64.5 3.77 (dd, 3.5, 11.0) 3.64 (dd, 5.5, 11.0) 1 163.9 165.4 2 150.1 152.2 3 29.2 3.72 (s) 30.3 3.87 (s) 4 126.5 128.5 5, 9 129.7 7.03 (br d, 8.5) 131.1 7.13 (br d, 8.5) 6, 8 115.0 6.66 (br d, 8.5) 116.2 6.70 (br d, 8.5) 7 155.7 156.9

a Đo trong DMSO-d6, b 125 MHz, c 500 MHz, d CD3OD

Hìn h 3.1 7. Phổ HR ESI MS của A3

Một phần của tài liệu (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào ung thư và kháng khuẩn của các hợp chất thứ cấp từ chủng vi nấm aspergillus niger IMBC NMTP01 (Trang 47 - 50)