Chương 1 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
2.3.5. Phương pháp kiểm tra mức độ ô nhiễm vi sinh vật trong không khí
Sử dụng phương pháp lắng bụi của Kock để kiểm tra mức độ ô nhiễm vi sinh vật trong không khí. Bụi vi khuẩn trong không khí rơi xuống trên mặt đĩa thạch và phát triển thành khuẩn lạc. Sau khi đếm số lượng các khuẩn lạc trên đĩa petri, tính ra số lượng vi sinh vật có trong 1 m3 không khí theo TCVN 5376:1991:
X = A x 100 x 100 S x K
Trong đó:
X: Số vi sinh vật có trong 1 m3 không khí
A: Số vi sinh vật (khuẩn lạc) đếm được trong đĩa thạch S: Diện tích đĩa petri (cm2)
K: Hệ số tương ứng với thời gian đểđĩa (5' = 1; 10' = 2; 15' = 3)
100: Diện tích quy ước (số vi khuẩn trên 100 cm2 thạch để trong thời gian 5' = tổng số vi khuẩn trong 10 lít không khí).
100: Hệ số nhân để tính ra kết quả trong 1 m3 không khí.
2.3.6. Phương pháp xác định độc lực của các chủng vi khuẩn E. coli, Salmonella và S. aureus phân lập được
Xác định độc lực của chủng vi khuẩn E. coli, Salmonella và S. aureus phân lập
được theo Quinn P. J. và cs. (1994).
* Môi trường BHI (Brain Heart Infusion)
Cách pha:
+ Cân 27 gram môi trường vào 1.000 ml nước cất. + Lắc đều cho đến khi tan hoàn toàn.
+ Chia ra các ống nghiệm 5ml/ống. + Hấp ướt 1210C/15 phút.
+ Bảo quản ở 40C.
Dùng que cấy vô trùng lấy vi khuẩn đã được nuôi cấy ở 370C trong 24h trên môi trường MacConkey cho vào ống môi trường BHI đã chế, đem môi trường nuôi cấy trong tủấm 370C trong 24h.
Sau đó tiến hành tiêm xoang phúc mạc chuột nhắt trắng với liều lượng 0,2ml canh trùng/con. Theo dõi 7 ngày sau khi tiêm. Khi chuột chết, tiến hành mổ khám bệnh tích, phân lập vi khuẩn và nuôi cấy lại trên môi trường MacConkey.
Đối với chuột nhắt trắng dùng để đối chứng: Tiêm xoang phúc mạc với liều lượng 0,2ml/con dung dịch BHI nguyên chất. Theo dõi 7 ngày nếu chuột chết, tiến hành mổ, khám bệnh tích và nuôi cấy lại trên môi trường MacConkey.