b. Thời gian thực hiện luận ỏn: Từ năm 2008 đến 2011.
2.2.2.1.Đỏnh giỏ tiờu chuẩn chất lượng
a. Đỏnh giỏ một số chỉ tiờu của hạt và bột * Đo khối lượng riờng biểu kiến:
Được tiến hành trờn mỏy đo ERWEKA SVM. Khối lượng riờng biểu kiến được tớnh theo cụng thức: d=m/V
Trong đú: - d: khối lượng riờng biểu kiến (g/ml) - m: Khối lượng hạt (g).
- V: thể tớch biểu kiến của hạt (ml)
Được thực hiện trờn mỏy đo tốc độ chảy ERWEKA GWF với đường kớnh lỗ phễu 12 mm. Tốc độ trơn chảy được tớnh theo cụng thức:
v = tgα Trong đú:
- V: Tốc độ chảy (g/giõy).
- α: Gúc giữa đường thẳng biểu diễn sự phụ thuộc của khối lượng hạt chảy theo thời gian và trục hoành (trục thời gian).
* Xỏc định độ ẩm:
Được xỏc định trờn cõn xỏc định độ ẩm nhanh Sartorius MA 30 theo phương phỏp mất khối lượng do làm khụ tại phụ lục 1.18, DĐVN IV. Cõn khoảng 5g hạt, nghiền mịn, đặt vào đĩa cõn, đặt nhiệt độ 105°C, theo dừi và đọc kết quả.
b. Đỏnh giỏ một số chỉ tiờu của viờn nộn * Xỏc định lực gõy vỡ viờn:
Xỏc định lực vỡ viờn được tiến hành trờn mỏy đo lực gõy vỡ viờn ERWEKA. Trong thớ nghiệm, thử 6 viờn lấy giỏ trị trung bỡnh.
* Xỏc định độ mài mũn:
Được xỏc định bằng mỏy thử độ mài mũn PHARMATEST PTF E. Cõn một khối lượng viờn nhõn khoảng 6,5g và rõy sạch bụi bỏm trờn viờn. Cõn chớnh xỏc lại khối lượng viờn nhõn và cho vào mỏy quay với tốc độ 100 vũng/phỳt trong 5 phỳt. Sau đú, lấy viờn ra và rõy viờn qua rõy cú kớch thước 0,315mm để làm sạch bụi. Cõn lại khối lượng viờn sau khi rõy. Độ mài mũn được tớnh theo cụng thức sau:
(%) 100 1 2 1 m m m X Trong đú: - X(%): Độ mài mũn.
- m2: Khối lượng viờn sau khi thử độ mài mũn (g). Độ mài mũn yờu cầu khụng được quỏ 1% đối với viờn nhõn.
* Xỏc định khối lượng màng bao (KLMB):
KLMB được tớnh theo cụng thức sau: KLMB =
n m m2 1
Trong đú:
- KLMB: Khối lượng màng bao cho 1 viờn (mg).
- m1: Tổng khối lượng viờn trong một mẻ trước khi bao (mg) - m2: Tổng khối lượng viờn trong một mẻ sau khi bao (mg) - n: Số viờn nhõn của 1 mẻ bao.
* Định tớnh:
- Hoà tan 17,4 g amoni thiocyanat và 2,8 g cobalt clorid bằng 50 ml nước cất trong bỡnh định mức 100 ml, lắc siờu õm trong 10 phỳt, thờm nước cất vừa đủ thể tớch, lắc đều (dung dịch A). Nghiền 1 viờn nộn, lấy bột, hoà tan trong 10 ml dung dịch acid hydroclorid 0,1N, lọc. Hỳt 2 ml dịch lọc, thờm vào 2 ml dung dịch A, lắc đều, thờm 5 ml dung dịch cloroform, lắc đều. Lớp cloroform phải xuất hiện màu xanh.
- Cho một lượng bột viờn vào bỡnh định mức 50ml. Thờm 20ml methanol, lắc siờu õm 20 phỳt. Thờm methanol vừa đủ đến vạch, lọc. Hỳt chớnh xỏc 2ml dịch lọc vào bỡnh định mức 200ml. Pha loóng bằng pha động (hỗn hợp methanol:dung dịch đệm phosphat 0,05M pH=4,5 tỷ lệ 60:40) đến vạch, lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 àm và tiờm 20 àl vào cột HPLC (điều kiện sắc ký như mục 2.2.2.1.d). Thời gian lưu của DIL phải trựng với thời gian lưu của dung dịch chuẩn trờn sắc ký đồ.
* Xỏc định độ đồng đều khối lượng, độ đồng đều hàm lượng:
Theo quy định tại phụ lục 11.2 và 11.3 của DĐVN IV [3].
* Điều kiện thử: Thử độ hoà tan theo test 5 của chuyờn luận “Diltiazem
hydroclorid extended-release capsules” của USP 30 với cỏc thụng số kỹ thuật sau:
- Mỏy 2 (cỏnh khuấy).
- Tốc độ khuấy: 50 ± 2 vũng/phỳt. - Nhiệt độ: 37,0 ± 0,5°C. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Mụi trường: 900 ml dung dịch đệm phosphat 0,05M pH=7,2.
* Phương phỏp tiến hành:
- Đặt viờn vào cốc trong mụi trường hoà tan với cỏc điều kiện đó nờu trờn. Sau khoảng thời gian 10 phỳt, hỳt chớnh xỏc 5ml mụi trường hoà tan, lọc. Dịch lọc được pha loóng bằng dung dịch đệm phosphat pH 7,2 đến nồng độ thớch hợp. Đo mật độ quang của cỏc dung dịch trờn ở bước súng λmax = 237nm. Dựa vào đường chuẩn để tớnh nồng độ DIL được giải phúng ra mụi trương hoà tan ở cỏc thời điểm khỏc nhau. Nồng độ DIL được tớnh theo cụng thức sau: a x a x E C C E . Trong đú:
- Cx: Nồng độ dung dịch DIL cần xỏc định sau khi pha loóng. - Ca: Nồng độ dung dịch DIL chuẩn.
- Ea, Ex: Mật độ quang của dung dịch DIL chuẩn và dung dịch thử. - Xõy dựng đường chuẩn: Pha dung dịch DIL chuẩn trong mụi truờng đệm phosphat pH 7,2 cú nồng độ là: 4, 6, 8, 10 và 12 àg/ml. Đo mật độ quang của cỏc dung dịch trờn tại bước súng 237nm với mẫu trắng là dung dịch đệm phosphat pH 7,2. Tiến hành 5 lần để lấy giỏ trị trung bỡnh.
- Thời gian tiềm tàng (Tlag) được xỏc định là thời điểm xuất hiện vết nứt trờn viờn bao. Sau đú, lấy mẫu tại cỏc thời điểm: 5, 15, 30, 45, 60, 90 và 120 phỳt sau khi nứt màng.
d. Định lượng diltiazem trong viờn nộn diltiazem giải phúng theo nhịp: Bằng phương phỏp HPLC, cụ thể:
* Pha dung dịch chuẩn: Cõn chớnh xỏc khoảng 50,0 mg DIL hydroclorid chuẩn cho vào bỡnh định mức 50 ml. Thờm methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều, lọc. Hỳt chớnh xỏc 2 ml dung dịch trờn cho vào bỡnh định mức 200 ml, bổ xung bằng pha động vừa đủ đến vạch. Lắc đều, thu được dung dịch chuẩn khoảng 10àg/ml. Lọc dung dịch trờn qua màng lọc 0,45 àm và tiờm 20 àl vào cột HPLC.
* Pha dung dịch thử: Cõn chớnh xỏc 20 viờn chế phẩm (m) và nghiền thành bột mịn. Sau đú, cõn chớnh xỏc 1 lượng bột mịn tương đương với khối lượng 1 viờn (m/20) và cho vào bỡnh định mức 50ml. Thờm 20ml methanol, lắc siờu õm 20 phỳt. Thờm methanol vừa đủ đến vạch, lọc. Hỳt chớnh xỏc 2ml dịch lọc vào bỡnh định mức 200ml. Bổ xung bằng pha động đến vạch, lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 àm và tiờm 20 àl vào cột HPLC trong cựng điều kiện với dung dịch chuẩn.
* Điều kiện HPLC:
- Pha tĩnh: Cột Symmetry C18 (4,6 150mm), đường kớnh hạt: 5àm. - Nhiệt độ cột: 25°C.
- Pha động: Methanol:Dung dịch đệm phosphat 0,05M pH=4,5 (60:40). - Tốc độ dũng: 1ml/phỳt
- Detector: UV tại bước súng 236nm - Thể tớch tiờm: 20àl.
* Tiến hành:
Tiến hành sắc ký với cỏc điều kiện đó nờu, ghi lại sắc ký đồ. Từ diện tớch pic của dung dịch chuẩn và dung dịch thử, xỏc định được khối lượng DIL cú trong viờn DIL GPTN theo cụng thức sau:
5000S S . ) ( a a xC S mg m
Trong đú:
- m: Khối lượng DIL cú trong 1 viờn (mg) - Ca: Nồng độ dung dịch DIL chuẩn (mg/ml).
- Sa, Sx: Diện tớch pic của dung dịch DIL chuẩn và dung dịch thử.