a. Một số phương phỏp định lượng diltiazem trong dịch sinh học
Quy trỡnh phõn tớch DC trong dịch sinh học là phức tạp. Vỡ trong dịch sinh học cú lẫn nhiều tạp chất, nồng độ DC thấp và số lượng mẫu cần phõn tớch nhiều, nờn đũi hỏi những yờu cầu cơ bản như: Độ đặc hiệu, độ nhạy cao và thời gian phõn tớch mẫu ngắn.
Một số phương phỏp phõn tớch DIL trong dịch sinh học khi nghiờn cứu SKD và TĐSH đó được cụng bố:
- Về phương phỏp chiết: Cỏc tỏc giả [13], [16], [68], … chủ yếu sử dụng 3 phương phỏp chiết DIL ra khỏi huyết tương. Đú là phương phỏp chiết lỏng - lỏng, phương phỏp chiết pha rắn và phương phỏp tủa protein.
- Điều kiện sắc ký:
+ Pha tĩnh: Chủ yếu là cỏc loại cột pha đảo như: NovaPack C18, Econosil-CN, LiChrosorb RP-8… [23], [24], [108].
+ Pha động: Cỏc tỏc giả [29], [68], [75], [93]… thường sử dụng cỏc hệ dung mụi như: MeCN + nước + KH2PO4, MeCN + Natri perclorat + acid phosphoric và hệ EtOH + KH2PO4 + H3PO4…
+ Detector chủ yếu là UV.
+ Nội chuẩn: Thường sử dụng verapamin, propranolon và minaprin… + Giới hạn định lượng dưới (LOQ): Dao động từ 1 đến 120 ng/ml [107], [118].
Tuy nhiờn, phương phỏp HPLC cũng cũn những hạn chế như: Số mẫu cần xử lý nhiều, thời gian chạy sắc ký lõu. Những năm gần đõy, nhiều tỏc giả đó nghiờn cứu cải tiến phương phỏp HPLC hoặc ỏp dụng cỏc phương phỏp mới cú nhiều ưu điểm hơn HPLC như: Điện di mao quản, LC-MS/MS, HPLC-MS/MS [46], [91]. Phương phỏp ghộp đụi sắc ký lỏng/khối phổ hiện nay đó được ỏp dụng khỏ rộng rói, cho phộp nõng cao độ nhạy, hạ thấp giới hạn định lượng, định lượng được đồng thời DIL và nhiều chất chuyển hoỏ và rỳt ngắn thời gian phõn tớch.
b. Một số nghiờn cứu đỏnh giỏ sinh khả dụng của cỏc chế phẩm diltiazem giải phúng theo nhịp
Đó cú nhiều cụng trỡnh nghiờn cứu về SKD của cỏc chế phẩm DIL được cụng bố, nhưng chủ yếu là kết quả nghiờn cứu về dạng thuốc giải phúng kộo dài. Cũn đối với dạng thuốc GPTN của DIL, gần như cú rất ớt tài liệu cụng bố. Tuy nhiờn, cú một số kết quả nghiờn cứu SKD và TĐSH của DIL dạng GPTN đó được đăng tải trờn cỏc tạp chớ nước ngoài.
* Ishino R. và cộng sự [58], [59] đó nghiờn cứu viờn nộn DIL 60mg GPTN trờn chú thực nghiệm theo phương phỏp chộo đụi, đơn liều, ngẫu nhiờn và 2 giai đoạn. Xỏc định nồng độ DIL trong mỏu tại cỏc thời điểm 0 - 1 - 2 - 3 - 4 – 5 – 6 – 7 – 8 – 9 – 12 – 18 và 24 giờ bằng phương phỏp HPLC với detector UV. Đồng thời, cỏc tỏc giả cũng xỏc định Tlag in vitro của chế phẩm là khoảng 7 giờ.
* Fukui E. và cộng sự [38] cũng đó nghiờn cứu SKD và TĐSH của viờn nhõn DIL và 2 loại viờn nộn DIL GPTN (cú Tlag in vitro là 3 và 6 giờ). Thiết kế nghiờn cứu theo phương phỏp chộo 3, đơn liều, ngẫu nhiờn và 3 giai đoạn. Định lượng nồng độ DIL trong mẫu bằng phương phỏp HPLC. Kết quả nghiờn cứu cho thấy: Tlag in vivo của viờn 3 giờ (L3) và 6 giờ (L6) lần lượt là 3,5 ± 0,3 giờ và 4,3 ± 0,2 giờ. Viờn nhõn khụng cho Tlag. Viờn nhõn cho giỏ trị Cmax cao hơn so với viờn bao. Tmax trung bỡnh của L3 và L6 là 5,5 giờ và 7 giờ. Trong khi đú, Tmax của viờn nhõn là 1 giờ. Tất cả cỏc viờn đều cú giỏ trị AUC tương đương nhau và SKD của L3, L6 so với viờn nhõn là 107% và 105%.
* Nakano M. và cộng sự [82] bằng phương phỏp thiết kế chộo, đơn liều, ngẫu nhiờn và 2 giai đoạn đó nghiờn cứu SKD và TĐSH của viờn nộn DIL 30mg GPTN trờn người tỡnh nguyện. Cỏc tỏc giả đó sử dụng phương phỏp HPLC với nội chuẩn là verapamil để định lượng nồng độ DIL trong mỏu. Kết quả nghiờn cứu cho thấy: Nồng độ trong huyết thanh của DIL tăng nhanh mà khụng cú Tlag. Cmax đạt được sau 1 giờ. Đối với viờn nộn GPTN chứa HEC CM-L4 và M-L3, Tlag lần lượt là 4,43 giờ và 7,61 giờ; Tmax là 4,8 và 10,4 giờ. Nếu tăng độ nhớt của HEC, thỡ giỏ trị AUC cũng giảm, Tmax và MRT tăng đỏng kể và Cmax giảm khi kộo dài Tlag.
* Tương tự, Fan T.Y. và cộng sự [33] đó nghiờn cứu SKD và TĐSH của viờn nộn DIL 60mg GPTN so với viờn nộn DIL qui ước trờn người tỡnh nguyện với số lượng cỏ thể lớn hơn. Kết quả nghiờn cứu cho thấy: Viờn qui
ước khụng cú Tlag cũn viờn GPTN cú Tlag rừ rệt (4,9 giờ). So sỏnh cỏc thụng số DĐH giữa 2 viờn cho thấy: Khụng cú sự khỏc nhau đỏng kể về: ke, t1/2, Cmax, AUC. Nhưng cú sự khỏc nhau rừ rệt về Tmax (viờn qui ước là 3,1 giờ cũn viờn GPTN là 8 giờ). SKD của viờn GPTN bằng 1,05 lần so với viờn qui ước. Cú sự tương quan giữa hấp thu in vivo và sự giải phúng in vitro của viờn GPTN theo phương trỡnh: Fd = 50,971.Fa-23,667 với r = 0,942.