Phần 4 Kết quả thảo luận
4.2. Đánh giá tốc độ sinh trưởng và xác định tỷ lệ tiếp giống thích hợp của
GIỐNG THÍCH HỢP CỦA CÁC CHỦNG NẤM MEN GIỐNG
4.2.1. Đánh giá tôc độ sinh trưởng của các chủng nấm men giống
Từ 05 chủng nấm men được tiến hành nuôi cấy trên môi trường Hansen dịch thể ở 30oC/48h. Kết quả xác định số lượng TB và sinh khối tích lũy của các chủng kiểm tra được trình bày ở bảng 4.2
Bảng 4.2. Tốc độ sinh trưởng và khả năng tích lũy sinh khối của các chủng nấm men giống
GIỐNG
Số lượng tế bào
(triệu TB/ml) số lượng TB Tốc độ tăng (lần) Sinh khối khô (mg/ml) 0h 48h SAC1 1,67 76,25 44,59 0,12 SAC2 1,58 73,25 45,36 0,14 SAC3 1,69 183,17 87,92 0,26 SAC4 1,96 144,75 72,95 0,21 SAC5 1,74 98,75 55,84 0,17
Qua kết quả của bảng 4.2 chúng tôi thấy, trong số 5 chủng giống kiểm tra chỉ có 2 chủng SAC3 và SAC4 có tốc độ sinh trưởng nhanh nhất với số lượng tế bào thu được cao nhất và lượng tích lũy sinh khối lớn nhất. Cụ thể:
Chủng SAC3, sau 48h nuôi cấy số lượng TB thu được là 183,17 triệu/ml, tăng 87,92 lần so với số lượng TB nuôi cấy ban đầu. Lượng sinh khối tích lũy của chủng này đạt 0,26mg/ml sau 48h nuôi cấy.
Chủng SAC4, số lượng TB thu được là 144,75 triệu/ml, với tốc độ tăng số lượng là 72,97 lần so vơi ban đầu và lượng sinh khối tích lũy được là 0,21mg/ml sau 48h nuôi cấy.
Từ kết quả trên chúng tôi lựa chọn 02 chủng SAC3 và SAC4 để sử dụng lên men bột và bã sắn ở thí nghiệm sau.
4.2.2. Xác định tỷ lệ tiếp giống thích hợp của các chủng nấm men giống
Tỷ lệ bổ sung giống trong quá trình lên men bột và bã sắn được lựa chọn với 3 mức 1%, 3% và 5% thể tích dung dịch nuôi cấy. Kết quả được trình bày ở bảng 4.3.
Từ kết quả thu được chúng tôi có nhận xét:
Sau 48h nuôi cấy số lượng TB thu được lớn nhất với tốc độ tăng trưởng cao nhất ở mức tiếp giống 5% ở hai chủng SAC3 với 136,25 triệu/ml, tăng 165,88% và ở chủng SAC4 với 120,75 triệu TB/ml, tăng 126,92% so với số lượng TB nuôi cấy ban đầu.
Hai chủng SAC3 và SAC4 cũng có số lượng TB nảy chồi cao nhất tương ứng là 69,50 triệu/ml và 53,75 triệu/ml. Tỷ lệ TB nảy chồi ở chủng SAC3 chiếm 51,01% và ở chủng SAC4 chiếm 44,51% số lượng TB nấm men thu được sau 48h nuôi cấy. Số lượng TB nảy chồi lớn cho thấy quần thể nấm men đang trong giai đoạn sinh sản mạnh mẽ. Tế bào thu được gồm nhiều tế bào trẻ và giống sẽ có tốc độ sinh trưởng lớn. Như vậy, có thể thấy hai chủng SAC3 và SAC4 vẫn đang trong giai đoạn sinh trưởng logarit và nếu nuôi cấy kéo dài hơn thì số lương tế bào sẽ tiếp tục tăng.
So sánh tốc độ sinh trưởng của các chủng giống kiểm tra được biểu diễn qua biểu đồ 4.1. Qua biểu đồ, có thể thấy rõ mức bổ sung giống 5% thể tích dịch nuôi cấy cho kết quả tăng số lượng TB lớn nhất sau 48h nuôi cấy ở tất cả các chủng kiểm tra. Số lượng TB cao nhất và đạt >108/ml ở chủng SAC3 và SAC4
Bảng 4.3. Xác định tỷ lệ tiếp giống thích hợp Số lượng tế Số lượng tế bào (triệu TB/ml) Tỷ lệ tiếp giống (%) Giống
SAC1 SAC2 SAC3 SAC4 SAC5
0h 1% 1,67 1,58 1,69 1,95 1,74 3% 1,67 1,58 1,69 1,95 1,74 5% 1,67 1,58 1,69 1,95 1,74 48h 1% 43,75 45,50 44,75 68,25 37,25 3% 52,25 61,75 89,75 93,75 72,5 5% 83,75 71,50 136,25 120,75 97,25 TĐST (%) 1% 52,50 57,91 53,08 70,83 42,52 3% 63,10 79,34 108,56 98,08 84,72 5% 102,40 92,19 165,88 126,92 114,36 TB chồi 1% 14,25 14,75 16,25 13,75 14,25 3% 17,25 23,50 24,00 22,50 24,00 5% 13,75 14,50 69,50 53,75 35,75 Tỷ lệ (%) 1% 32,57 32,42 36,31 20,15 38,26 3% 16,42 38,06 26,74 24,00 33,10 5% 16,42 20,28 51,01 44,51 36,76
Biểu đồ 4.1. Số lượng tế bào của các chủng nấm men tại 48h với các mức tiếp giống khác nhau
Quan sát về cảm quan có thể thấy rõ, môi trường nuôi cấy chủng SAC3 và SAC4 có màu vàng rơm, chua nhẹ, thơm mùi hoa quả chín. Môi trường đục và có nhiều cặn cũng như bọt khí hơn so với các chủng còn lại.
Các chủng giống sử dụng trong sản xuất phải đạt số lượng tế bào tối thiểu là ≥108/ml để đảm bảo chất lượng lên men. Vì vậy, trong số 5 chủng kiểm tra chúng tôi lựa chọn hai chủng có số lượng TB đạt yêu cầu và tốc độ sinh trưởng lớn nhất là chủng SAC3 và SAC4 để sử dụng trong thí nghiệm lên men bột và bã sắn.
Tế bào nảy chồi trong dung dịch nuôi cấy
Hình 4.2. Các bình nuôi cấy nấm men với 3 mức tiếp giống