Phần 2 Tổng quan tài liệu
2.4.1. Các phương pháp phát hiện Salmonella
2.4.1.1. Phương pháp vi sinh truyền thống
Phương pháp nuôi cấy là phương pháp truyền thống được sử dụng rộng rãi trong việc phát hiện và định lượng Salmonella dựa trên nguyên lý tăng sinh làm giàu vi khuẩn, phân lập trên thạch chọn lọc, tính chất sinh hóa và phản ứng kháng huyết thanh. Để phát hiện Salmonella cần 1 tuần để phân tích, và dù tiêu tốn nhiều thời gian, thì phương pháp truyền thống vẫn được xem là một “tiêu chuẩn vàng” ngay cả trong thời kỳ hưng thịnh của kỹ thuật phân tử, giúp sàng lọc nhanh Salmonella trong mẫu bệnh phẩm, thực phẩm và mẫu mơi trường (26). Có nhiều phương pháp truyền thống khác nhau dựa trên môi trường nuôi cấy sử dụng đã được ban hành bởi các tổ chức quốc tế như Tổ chức Tiêu chuẩn hoá (ISO), Hiệp hội chính thức các nhà hóa học phân tích (AOAC), Cục quản lý Dược phẩm và Thực phẩm Hoa Kỳ (FDA), và Tổ chức An toàn và Kiểm tra Thực phẩm (FSIS) của Bộ Nông nghiệp Mỹ (USDA).
Các phương pháp vi sinh truyền thống thường được lựa chọn là phương pháp phân tích trong nhiều phịng thí nghiệm an tồn thực phẩm và sức khỏe cộng đồng do dễ sử dụng, độ tin cậy của kết quả, độ nhạy và độ đặc hiệu cao, và chi phí thấp hơn so với cơng nghệ phân tử.
2.4.1.2. Phương pháp phát hiện nhanh
Một số phương pháp nhanh chóng sử dụng kỹ thuật khuếch đại phân tử DNA đã được phát triển, xác nhận, và có sẵn trên thị trường. Các phương pháp này được tiến hành trong thời gian ngắn với lượng mẫu nhiều. Các phương pháp nhanh cho phép phát hiện Salmonella spp. trong các mẫu và cung cấp kết quả trong vòng một vài giờ đến một ngày. Phương pháp nhanh bao gồm phương pháp sử dụng môi trường chọn lọc mới biểu hiện bằng phát màu, xét nghiệm dựa trên miễn dịch học, và các xét nghiệm dựa trên axit nucleic. Trong các phương pháp khác nhau, kỹ thuật ELISA và PCR thường được sử dụng. ELISA có thể phát hiện Salmonella ở cấp 104-105/ml trong khi thử nghiệm PCR có mức độ nhạy cảm tại 104/ml sau khi làm giàu. Độ nhạy và độ đặc hiệu của các phương pháp này chủ yếu phụ thuộc vào hệ vi sinh vật trong mẫu, nền mẫu, và chất ức chế (ví dụ chất béo, protein, polysaccharides, kim loại nặng, thuốc kháng sinh, và các hợp chất hữu cơ) (Ta et al., 2014).