V. PHẠM VI NGHIÊN CỨU 3
1.3. Đặc điểm sơ lược của các loài cá thu mẫu 16
Đặc điểm sinh học
Cá Chẽm có cơ thể dài, miệng rộng không cân, hàm trên kéo đến tận mắt sau, vây đuôi tròn. Vây lưng: 7 - 9; vây tia mềm lưng: 10 - 11; gai hậu môn: 3; vây tia mềm hậu môn: 7 - 8. Đây là loài cá dữ điển hình, sinh trưởng nhanh, thức ăn thường là các loài cá tạp, tôm, không ăn thực vật và các loài giáp xác [50]–[52].
Hình 1.7 Cá Chẽm Lates calcarifer [50]
Yếu tố kĩ thuật nuôi
Trước khi thả cá vào ao, tiến hành tháo cạn nước, nạo vét bùn đáy ao, bón lượng vôi tuỳ theo pH đất đáy ao, phơi đáy ao từ 7 – 10 ngày để diệt tạp. Bón phân chuồn đã ủ hoai hay phân hữu cơ gây màu nước sau đó nâng mức nước lên từ từ tạo phiêu sinh vật phát triển rồi cho cá vào. Đối với ao nuôi ghép, liều lượng cho ăn bằng 1/2 so với ao nuôi đơn và điều chỉnh lượng thức ăn tùy theo lượng cá rô phi sinh sản trong ao. Do nguồn thức ăn cho cá (cá tạp) ở một số nơi khan hiếm đặc biệt vào mùa mưa bão, có thể dùng thêm bột cám gạo để giảm lượng cá tạp sử dụng với tỷ lệ cá tạp: 70%, cám gạo: 30% [53].
1.3.2. Cá Rô phi vằn Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758)
Đặc điểm sinh học
Cá Rô phi vằn có vây lưng: 15 - 18; vây tia mềm lưng: 11-13; gai hậu môn: 3; vây tia mềm hậu môn: 9 - 11 [50]. Cá có thân hình thoi, dẹt bên rõ rệt, miệng rộng
hàm trên mỗi bên 2 răng nanh. Chiều dài thân bằng 2,3 - 2,6 lần chiều cao [51]. Vây đuôi có nhiều vằn đen [54]. Toàn thân phủ vẩy, vẩy ở phần lưng có màu sáng vàng nhạt hoặc xám nhạt, phần bụng có màu trắng ngà hoặc màu vàng nhạt. Trên thân có từ 6 - 8 vạch sắc tố chạy từ lưng tới bụng. Các vạch sắc tố ở các vây như vây đuôi, vây lưng rõ ràng [55].
Hình 1.8 Cá Rô phi vằn Oreochromisniloticus [50]
Yếu tố kĩ thuật nuôi
Chuẩn bị ao nuôi bằng cách tát cạn nước, nạo vét bùn đáy ao, rồi tiến hành diệt tạp, bón vôi tuỳ theo pH đất đáy ao khoảng 8-10kg/100m2. Phơi đáy ao từ 3 - 5 ngày. Sau đó tiến hành cấp nước vào ao và bón phân (phân hữu cơ hoặc phân vô cơ) gây màu nước tạo điều kiện cho phiêu sinh vật phát triển làm thức ăn cho cá. Ngoài ra, người ta còn dùng các thức ăn tổng hợp như cám gạo, bột cá, rau băm nhỏ, bèo,… làm thức ăn cho cá [56].
Theo Dương Nhật Long, đối với ao nuôi, trước khi thả cá, ao nuôi cũng phải được cải tạo, tẩy dọn ao. Diện tích ao trung bình 0,2 – 1 ha/ao. Mực nước trong ao dao động từ 1,2 – 1,5 m. Trong quá trình nuôi, có thể dùng phân hữu cơ (phân heo, gà) đã ủ mục bón lót để tạo nguồn thức ăn tự nhiên ban đầu cho cá giống, tất nhiên sau đó không cần bón bổ sung, cá tăng trưởng chủ yếu dựa vào nguồn thức ăn cung cấp từ bên ngoài. Có thể sử dụng nhiều loại thức ăn để nuôi cá Rô phi, nên sử dụng
1.3.3.Cá Trê lai Clarias sp.
Đặc điểm sinh học
Cá Trê lai được lai giữa cá trê phi và cá trê vàng, có ngoại hình tương tự cá trê vàng, da trơn nhẵn, đầu dẹp, thân hình trụ, dẹp ở đuôi. Thân có màu xám có những chấm nhỏ mờ, u lồi xương chẩm có hình gần giống chữ M với các góc tròn, trong khi ở cá trê vàng là chữ U còn có trê phi là chữ M có các góc nhọn và rõ nét [57].
Hình 1.9 Cá Trê lai Clarias sp.
Yếu tố kĩ thuật nuôi
Theo Dương Nhật Long, kĩ thuật nuôi cá Trê ương trong bể xi măng, bể lót bạt nilon: Diện tích bể: 2 - 20 m2. Độ sâu mực nước 40 - 60 cm. Mực nước cần duy trì ổn định, mỗi ngày cần phải thay 1/3 lượng nước trong bể. Sử dụng trùng chỉ hoặc thức ăn tổng hợp để thay thế, cho ăn mỗi ngày hai lần. Đặc biệt với thức ăn chế biến cần điều chỉnh lượng thức ăn sao cho khoảng 1 - 2 giờ thì cá ăn hết là được. Thức ăn chế biến có thể sử dụng thức ăn công nghiệp hoặc tự chế biến theo công thức sau: bột cá: 60%, bột đậu nành: 10 %, cám gạo: 25 %, bột mì: 5 %, vitamin và khoáng vi lượng. Thức ăn dư thừa cần loại bỏ bằng cách thay nước nhằm hạn chế sự ô nhiễm môi trường nước bể. Thường xuyên cọ rửa vệ sinh bể và theo dõi tình hình hoạt động của cá hằng ngày [55].
Kĩ thuật nuôi cá Trê trong ao đất: trước khi cho cá vào, tháo cạn, vét bùn và diệt cá dữ kết hợp với bón vôi cho ao, thường 5 - 10 kg/100m2. Sau khi bón vôi xong phơi
nắng đáy ao từ 2 - 3 ngày để diệt tạp. Sau đó cho cá vào. Cá trê khi có kích thước nhỏ ăn thức ăn dạng bột như cám nhuyễn, bột cá rải trên mặt nước hoặc cám tổng hợp cho gia súc. Lượng cho ăn bằng 20 - 30% trọng lượng cá. Các loại thức ăn như cám gạo, phân hữu cơ hay viên tổng hợp có bán trên thị trường được dùng làm thức ăn tùy theo kích cỡ của cá [57].
1.3.4. Cá Điêu hồng Oreochromis sp.
Đặc điểm sinh học
Thân cao, hình hơi bầu dục, dẹp bên. Đầu ngắn. Miệng rộng hướng ngang, rạch kéo dài đến đường thẳng đứng sau lỗ mũi một ít. Hai hàm dài bằng nhau, môi trên dầy. Lỗ mũi gần mắt hơn mõm. Mắt tròn ở nửa trước và phía trên của đầu. Khoảng cách hai mắt rộng, gáy lõm ở ngang lỗ mũi. Toàn thân phủ vẩy, có màu đỏ đến hồng [50]. Vẩy trên thân có màu vàng đậm, hoặc vàng nhạt hoặc màu đỏ hồng, cũng có thể gặp những cá thể có màu vàng, màu hồng xen lẫn những đám vẩy màu đen nhạt [55].
Hình 1.10 Cá Điêu hồng Oreochromis sp. [58]
Yếu tố kĩ thuật nuôi
Theo Dương Nhật Long, đối với ao nuôi, trước khi thả cá, ao nuôi cũng phải được cải tạo. Diện tích ao nuôi trung bình 0,2 – 1 ha/ao. Ao có cống cấp và thoát nước chủ động. Mực nước trong ao dao động từ 1,2 – 1,5 m, trong quá trình nuôi, có thể dùng phân hữu cơ (phân heo, gà) đã ủ mục bón lót để tạo nguồn thức ăn tự nhiên ban đầu cho cá giống, tất nhiên sau đó không cần bón bổ sung, cá tăng trưởng chủ yếu
dựa vào nguồn thức ăn cung cấp từ bên ngoài [55]. Gây màu nước bằng phân chuồng hoặc phân vô cơ từ 5 - 6 ngày tạo lượng sinh vật phù du trong ao phát triển làm thức ăn cho cá, sau đó thả cá vào nuôi. Cá ăn tạp nên có thể cho cá ăn các loại thức ăn như rau muống, rau thái nhỏ, các loại động vật như tôm cá nhỏ, giun ốc đã xay nhỏ, ngoài ra còn có thể cho ăn thêm thức ăn công nghiệp [58].
1.3.5. Cá Tra Pangasianodon hypophthalmus (Sauvage, 1878)
Đặc điểm sinh học
Cá Tra có đầu tương đối nhỏ, da trơn, thân dài. Cơ thể có màu xám nhạt không sọc lưng xám đen, bụng hơi bạc. Vây màu xám đen hoặc đen, vây lưng có 6 tia [50], [52]. Cá có thân dài, bề ngang hẹp, bên trong răng cửa có độc tố. Mắt khá to, miệng rộng, răng nhỏ, có hai đôi râu, trong đó râu hàm trên ngắn hơn ½ chiều dài đầu gọi là râu mép. Râu hàm dưới ngắn hơn ¼ chiều dài đầu gọi là râu cằm. Vây lưng và vây ngực của cá có ngạnh cứng, vây bụng tương đối dài. Về màu sắc, khi còn nhỏ cá có màu xanh lục, khi lớn thân có màu xám tro, lưng màu xám xanh, đầu có màu đen hơi thẫm, bụng cá màu trắng bạc, gốc vây bụng và vây hậu môn có màu vàng nhạt, đuôi có màu đỏ hung [59].
Hình 1.11 Cá Tra Pangasianodon hypophthalmus[50]
Ao nuôi cá Tra thường có diện tích từ 500 m2 trở lên, có độ sâu nước 1,5 - 2m. Trước khi thả cá phải tháo cạn, dọn sạch đáy ao, vét bớt bùn lỏng đáy ao, chỉ để lại lớp bùn đáy dày 0,2 - 0,3m. Dùng vôi bột rải khắp ao và phơi đáy. Sử dụng nguyên liệu có sẵn địa phương như cám gạo, cá vụn, rau xanh cho cá ăn, có thể kết hợp sử dụng thức ăn công nghiệp. Theo dõi mức độ ăn của cá để điều chỉnh tăng giảm cho phù hợp [60]. Ao có diện tích từ 500 - 1000 m2, độ sâu từ 1 - 1,5 m. Cải tạo gồm bơm cạn ao, diệt tạp. Vét bùn đáy ao, chỉ chừa lại một lớp bùn mỏng khoảng 5 cm. Bón vôi bột với liều lượng từ 10 - 15 kg/100m2 ao. Phơi ao từ 2 - 3 ngày.Lọc nước vào ao với mức nước 0,8 - 1m trước khi thả cá 4 ngày. Có thể sử dụng bột đậu nành hay bột cá bón từ 2 - 3 kg/100m2 ao để gây nuôi thức ăn tự nhiên [55].
1.3.6. Cá Sặc điệp Trichopodus microlepis (Günther, 1861)
Đặc điểm sinh học
Cá Sặc điệp có thân màu bạc hoặc xám [50]. Mắt to, dầu nhỏ, phủ vẩy hoàn toàn. Miệng nhỏ, ở đầu mõm. Khoảng cách gian mắt rộng. Thân phủ vảy tròn. Thân hình bầu dục hơi dài, rất hẹp ngang. Vây đuôi hơi lõm vào. Tia thứ nhất vây bụng kéo thành sợi dài qua vây đuôi. Vây ngực dài quá khởi điểm vây lưng [61]. Cá có cơ quan thở nên sống được ở điều kiện nước thiếu hoặc không có oxy. Cá cũng có khả năng chịu đựng được môi trường nước bẩn, hàm lượng hữu cơ cao cũng như môi trường có độ pH thấp (pH từ 4 - 4,5). Nhiệt độ thích hợp cho cá từ 24 - 30oC, có thể chịu đựng được nhiệt độ 11 - 39oC [55].
Hình 1.12 Cá Sặc điệp Trichopodus microlepis [50]
Có thể áp dụng phương pháp nuôi đơn hoặc nuôi ghép với một số loài cá khác như cá Mè trắng, cá Hường, Rô phi, Chép. Có thể thả ghép với mật độ 5 - 7 con/m2
Trong quá trình nuôi, nên thường xuyên theo dõi nước ao, nếu thấy dơ phải thay nước, mỗi ngày thay 30% nước cho đến khi nước tốt thì ngưng [55].
Kĩ thuật chuẩn bị ao gồm tháo cạn nước, diệt hết cá tạp, mầm bệnh trong ao. Vét bùn đáy ao, chỉ để lại 10 - 20cm bùn đáy. Dùng vôi bón xung quanh bờ ao và đáy ao, liều lượng từ 10 – 15 kg/100m2, sau đó phơi đáy ao 2 – 3 ngày. Dùng phân hữu cơ với lượng từ 15 - 20kg/100m2 để tạo nguồn thức ăn tự nhiên cho cá. Sử dụng phân vô cơ trong trường hợp không có hoặc có ít phân hữu cơ. Khoảng 4 - 5 ngày nước có màu xanh thì bắt đầu thả cá. Tùy vào điều kiện mà nguồn thức ăn bổ sung có thể là thức ăn công nghiệp (cám, gạo, thức ăn viên), cá tạp [62].
Chương 2.PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Thời gian, địa điểm, tư liệu nghiên cứu
2.1.1.Thời gian nghiên cứu
Đề tài tiến hành thu mẫu ở 4 huyện (Cần Giờ, Nhà Bè, Bình Chánh, Củ Chi) trong khoảng thời gian 9/2017 – 5/2018. Mỗi huyện thu mẫu 2 lần vào mùa mưa từ tháng 6 – 11 và mùa khô từ tháng 12 đến tháng 5 năm sau.
Bảng 2.1 Thời gian thu mẫu ở 4 huyện ngoại thành, tp. HCM
Thời gian thu mẫu Mùa mưa Mùa khô
Cần Giờ Tháng 10/2017 Tháng 3/2018 Củ Chi Tháng 9-10/2017 Tháng 2-3/2018 Nhà Bè Tháng 6/2018 Tháng 4/2018 Bình Chánh Tháng 7/2018 Tháng 4-5/2018
2.1.2. Địa điểm nghiên cứu
Theo thống kê của phòng Kinh tế thành phố Hồ Chí Minh về sản lượng nuôi trồng thủy sản thì các huyện chủ yếu đóng góp số lượng nuôi cá thịt ở 4 huyện ngoại thành: Cần Giờ, Củ Chi, Bình Chánh, Nhà Bè. Vì vậy, nghiên cứu đã tiến hành thu mẫu cá thịt ở 4 huyện này.
Địa điểm phân tích: phòng thí nghiệm Sinh lí - Giải phẩu Người và động vật, thuộc khoa Sinh học, trường Đại học Sư phạm TP. Hồ Chí Minh.
2.1.3.Tư liệu nghiên cứu
Phiếu điều tra, phỏng vấn hộ thu mẫu cá thịt (phụ lục 1).
Hình chụp ngoài thực địa và trong phòng thí nghiệm (phụ lục 4, phụ lục 5). Phân loại sán lá giai đoạn metacercariae dựa vào khóa phân loại (phụ lục 2, 3) và theo tiêu chuẩn hình thái ấu trùng metacercariae của Murrell [18].
2.2. Phương pháp nghiên cứu
Áp dụng phương pháp Cross - sectional study cho nghiên cứu tỉ lệ nhiễm sán lá song chủ (giai đoạn metacercariae) trên cá nuôi lấy thịt ở 4 huyện ngoại thành, thành phố Hồ Chí Minh (Cần Giờ, Củ Chi, Nhà Bè, Bình Chánh) vào mùa mưa và mùa khô.
2.2.1.Ngoài thực địa
Mẫu cá thịt được thu ở 4 huyện bằng phương pháp thu ngẫu nhiên (thả lưới, thả câu). Mỗi hộ thu 1 ao, mỗi ao thu ngẫu nhiên 10 con cá thịt. Tiến hành thu mẫu cá ở 4 huyện trong mùa mưa và mùa khô.
Số lượng hộ thu mẫu cá thịt được tính theo công thức của Toft và cộng sự [64]. n = N Z 2 1-α/2 p (1-p) N L2 + Z21-α/2 p (1-p) Trong đó n: cỡ mẫu thu
N: tổng số hộ nuôi ở khu vực nghiên cứu p: ước tính tỉ lệ nhiễm ấu trùng sán lá trên cá L: sai số cho phép
α: chỉ số tin tưởng
Z1-α/2: hệ số tin cậy 95%, có giá trị 1,96
Do tỉ lệ nhiễm cercariae trên cá thịt thấp [46]. Chọn p=0,05, số lượng hộ ở các huyện vào năm 2017 dao động từ 20 – 100 hộ (Cần Giờ có số hộ nuôi thấp nhất) để tính số hộ. Dựa vào công thức và số hộ nuôi thực tế các loài ở 4 huyện ngoại thành tp.HCM, đề tài đã thu 15 hộ nuôi ở Cần Giờ (3 hộ cá Chẽm, 12 hộ cá Rô phi vằn), 20
hộ nuôi ở Bình Chánh (1 hộ cá Sặc điệp, 4 hộ cá Tra, 1 hộ cá Điêu hồng, 4 hộ cá Trê lai, 6 hộ cá Rô phi), 10 hộ nuôi ở Nhà Bè (10 hộ cá Rô phi) ở mỗi mùa. Tổng cộng thu 1200 con cá ở 4 huyện trong 2 mùa.
Điều tra kĩ thuật nuôi cá thịt
Các thông tin về kĩ thuật nuôi cá được thu thập thông qua quan sát ao nuôi và phỏng vấn trực tiếp chủ hộ qua phiếu điều tra (phụ lục 1). Các thông tin phỏng vấn như sau:
Thông tin chung: họ tên chủ hộ, địa chỉ nông hộ, ngày phỏng vấn, người phỏng vấn.
Thông tin nuôi trồng thủy sản: diện tích nông trại, diện tích ao, loài cá nuôi, bón vôi và phơi đáy khi chuẩn bị ao, nguồn nước cho ao, độ sâu ao, hiện diện của ốc trong ao và kênh, quản lí và chăm sóc cá.
Các thông tin khác: sự hiện diện của các vật chủ như chó, mèo, chim trong nông trại.
Thu mẫu cá thịt
Cá được thu ngẫu nhiên bằng cách thả lưới, thả câu. Mẫu cá thu từ các ao khác nhau được để riêng và chuyển về ngay phòng thí nghiệm Khoa Sinh học - Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh để phân tích metacercariae.
2.2.2.Trong phòng thí nghiệm
Phân lập ấu trùng metacercariae trên mẫu cá thịt
Áp dụng phương pháp tiêu cơ để phân lập ấu trùng sán lá truyền qua cá ở phụ lục 6 của WHO [1].
Các bước tiến hành phân lập metacercariae:
1. Định loại loài cá.
2. Cân từng cá thể và ghi lại.
3. Cá nhỏ (dưới 50g/con) được xay nguyên con bằng máy xay sinh tố. Cá lớn được chia thành các mẫu nhỏ có khối lượng khoảng 50 - 100g và chọn ngẫu nhiên cho vào máy xay nhuyễn. Mỗi con cá trong từng mẫu thu (1 ao) sẽ được xay riêng.
4. Cho mẫu xay của từng con cá vào cốc thuỷ tinh đã đánh dấu chứa dung dịch dạ dày nhân tạo (6g pepsin +8 ml HCl + 1 lít nước cất), chuyển vào tủ ấm 37oC ủ trong khoảng 3 giờ.
5. Lấy mẫu ra khỏi tủ ấm, lọc mẫu bằng lưới lọc có mắt lưới 1x1mm và rửa sạch bằng nước muối sinh lý (0,86%).
6. Loại bỏ phần nổi một cách nhẹ nhàng, lấy phần lắng, làm như vậy khoảng 8 - 10 lần cho đến khi chất lắng trở nên trong.
7. Cho phần lắng vào đĩa Petri soi dưới kính soi nổi để xác nhận sự hiện diện của metacercariae.
8. Khi phát hiện có metacercariae, dùng ống hút các nang sán trong cùng mẫu cá qua đĩa petri nhỏ có chứa nước muối sinh lí để định loại.