đảo ngược và đồng thời chụp hình ảnh phơi đó để gửi kết quả kèm theo hình ảnh phơi chuyển cho bệnh nhân.
2.5.2. Đánh giá phôi nang
* Đánh giá hình thái phơi nang theo tiêu chuẩn Gardner 1999.
+ Bước 1: Đánh giá độ nở của khoang phơi nang và hiện tượng thốt màng
Độ 1: Phơi nang sớm: thể tích khoang dịch <1/2 thể tích của phôi. Độ 2: Phôi nang: khoang dịch chiếm ≥1/2 tổng thể tích của phơi. . Độ 3: Phơi nang đầy: khoang dịch chiếm hầu hết thể tích phơi.
Độ 4: Phôi nang nở rộng: khoang dịch phát triển rộng làm cho màng ZP bắt đầu mỏng dần.
Độ 5: Phơi nang đang thốt màng: khi TE bắt đầu thoát ra khỏi màng trong suốt.
Độ 6: Phơi nang đã thốt màng: khi phơi nang đã thoát TE ra khỏi màng trong suốt.
+ Bước 2: Đánh giá ICM, TE
Khi khoang phôi nang phát triển từ độ 2 trở lên, thì có thêm những mơ tả chi tiết về 2 loại tế bào xuất hiện là tế bào lá nuôi (TE) và nụ phôi (tế bào mầm- ICM). Theo hệ thống đánh giá này thì cũng chia lá ni và nụ phôi thành 3 loại dựa trên số lượng và sự gắn kết của các tế bào.
Theo tác giả Capalbo và cộng sự (2014) và tác giả Gonzalez X (2019) [53] [54] thì đánh giá và phân lọa ICM, TE như sau:
Đánh giá ICM:
Loại A: Nổi bật, quan sát rõ, có nhiều tế bào kết khối và liên kết chặt. Loại B: Có thể quan sát rõ, nhiều tế bào nhưng không liên kết chặt.
Loại C: Khi có rất ít tế bào, khó quan sát. Khó quan sát, có rất ít tế bào, liên kết lỏng lẻo hoặc phân mảnh.
Loại D: Rất ít tế bào, khơng phân biệt được ICM Đánh giá TE:
Loại B: Có thể quan sát rõ, nhiều tế bào nhưng không liên kết chặt vẫn đẹp nhưng không bằng A.
Loại C: Rất ít tế bào,kém các tế bào lớn phân bố khơng đều (ít tế bào bị ép sang hai bên). Theo tác giả và cộng sự (2014) và tác giả Gonzalez X (2019)
Loại D: Rất ít tế bào và chất lượng kém hoặc TE thoái hoá.
Theo đánh giá chất lượng phôi nang trong nghiên cứu theo tác giả Gardner D. K. (1999), tác giả Capalbo và cộng sự (2014) và tác giả Gonzalez X (2019) Từ đó phân loại chất lượng hình thái phơi nang thành 4 độ tương ứng lần lượt là phơi nang có chất lượng tốt, trung bình và xấu.
Bảng 2. 1. Phân loại chất lượng hình thái phơi nang
Phân loại Chất lượng hình thái phơi nang Độ I (rất tốt) (3-6) AA
Độ II (tốt) (3-6) AB hoặc (3-6) BA, hoặc 2AA, (5-6) BB Độ III (trung bình) (2-4) BB hoặc (3-6) AC
(3-6) CA hoặc 2(AB, BA, BB) Độ IV (xấu/kém) (2-6) CB hoặc (2-6) BC
(2-6) CC hoặc 2(AC, CA)
Phôi 4AA – Độ I Phôi 4BA – Độ II
Phôi 3BB – Độ III Phôi 2CC – Độ IV (Nguồn:
Atlas of human embryology from oocytes to Preimplantation embryos) [25]
Tại Labo của Bệnh viện HTSS và Nam học Đức Phúc chúng tơi đã hỗ trợ thốt màng thường quy ngày 3. Do vậy, nghiên cứu này chúng tôi không đánh giá về ảnh hưởng của hỗ trợ thoát màng.
2.5.3. Biến số và chỉ số nghiên cứu
2.5.3.1. Biến số
Đặc điểm của đối tượng tham gia nghiên cứu: + Tuổi mẹ
+ Niêm mạc tử cung ngày chuyển phôi
Đặc điểm của phôi nang: đánh giá theo tiêu chuẩn của Bệnh viện Hỗ trợ sinh sản và nam học Đức Phúc:
+ Tuổi phôi
+ Phân độ hình thái: Rất tốt, tốt, trung bình và xấu + Hình thái ICM: loại A-B-C
+ Hình thái lớp TE: loại A-B-C Kết quả thai:
+ Thai tiến triển: có hay khơng + Mất thai: có hay khơng
2.5.3.2. Các chỉ số
Đặc điểm chung của đối tượng tham gia nghiên cứu: + Tuổi mẹ trung bình
+ Tỷ lệ thai tiến triển chung + Chỉ số sống sót
+ Tỷ lệ có thai + Tỷ lệ làm tổ
+ Tỷ lệ thai lâm sàng + Tỷ lệ trẻ sinh sống
2.5.3.3. Một số khái niệm và cách đánh giá dùng trong nghiên cứu
Tỷ lệ sống sau rã đông = Số phôi sống sau rã
Tổng số phôi đông X 100%
Tỷ lệ làm tổ = Số túi ối siêu âm được
Tổng số phôi chuyểnX100% Tỷ lệ β-hcg (+) = Tổng số ca có β−hcg (+)
Tổng số chu kỳ chuyển phôiX100%
Tỷ lệ thai lâm sàng = Tổng số chu kỳ siêu âm có túi thai
Tổng số chu kỳ chuyển phôi X100%
Tỷ lệ phôi nang tốt= Tổng số phôi nang tốt
679 phơi được nghiên cứuX100%
Phơi thối hóa là phơi có >50% các phơi bào co nhỏ, đen sậm, khơng giãn nở trở về trạng thái giống trước khi đông.
Thai lâm sàng được chẩn đốn khi siêu âm có túi ối trong BTC
Đa thai là hiện tượng có sự phát triển từ hai thai trong buồng tử cung + Tuổi phôi: phôi nang ngày 5 được đánh giá vào thời điểm giờ thứ 116 ±1, phôi nang ngày 6 được đánh giá vào thời điểm giờ thứ 140 ± 1 (thời điểm 0 giờ là thời điểm thực hiện ICSI).
+ Tuổi của mẹ: Tính theo năm dương lịch (từ năm sinh ra cho đến thời điểm chuyển phôi).
Thai tiến triển: thai phát triển sau 12 tuần.
2.5.4. Quản lý và xử lý số liệu
không cần thiết, không phù hợp với mục tiêu nghiên cứu.
Tiến hành nhập số liệu, xử lý số liệu bằng phần mềm SPSS 20.0 một cách lần lượt, hệ thống, tránh nhập thừa hay bỏ sót số liệu.
Sử dụng các phép tốn thống kê mơ tả cho các biến định tính và định lượng, kiểm định giả thuyết bằng test Khi bình phương và so sánh tỷ lệ trung bình của 2 nhóm, tính tỉ suất chênh OR.
Vẽ các biểu đồ bằng phần mềm Excel.
2.5.5. Sai số và phương pháp khống chế sai số
Sai số được khống chế bằng cách lựa chọn đối tượng theo tiêu chuẩn nghiên cứu.
* Sai số trong quá trình thu thập số liệu được khống chế bằng cách: Phiếu nghiên cứu được thiết kế và thử nghiệm trước khi nghiên cứu.
Người lấy mẫu đảm bảo lấy chính xác, tỉ mỉ những thơng tin được lưu lại trong hồ sơ bệnh án đúng theo yêu cầu nghiên cứu của đề tài.
Số liệu được thu thập và xử lý nghiêm túc, chính xác.
2.6. ĐẠO ĐỨC NGHIÊN CỨU
Nghiên cứu chỉ hồi cứu trên bệnh án, không can thiệp trên người bệnh, không làm sai lệch kết quả điều trị của bệnh nhân.
Nghiên cứu chỉ với mục đích phục vụ chăm sóc và bảo vệ sức khỏe nhân dân, khơng nhằm mục đích nào khác. Đảm bảo quy định về đạo đức trong nghiên cứu y học của Bộ đã quy định.
Các thông tin về bệnh nhân sẽ được bảo mật theo đúng qui định của pháp luật hiện hành.
Tiến hành nghiên cứu với tinh thần trung thực.
Nghiên cứu này được tiến hành sau khi đề cương nghiên cứu đã được sự chấp thuận của hội đồng khoa học, đạo đức của Học Viện Khoa học và Công Nghệ, lãnh đạo Bệnh viện Hỗ trợ sinh sản và Nam học Đức Phúc.
Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Trong 8 tháng kể từ tháng 1 đến tháng 8 năm 2021, chúng tôi thu thập được 365 chu kỳ chuyển phôi nang đông lạnh tại Bệnh viện Hỗ trợ sinh sản và Nam học Đức Phúc thỏa mãn với các tiêu chuẩn nghiên cứu.
3.1. ĐẶC ĐIỂM CỦA BỆNH NHÂN ĐƯỢC CHUYỂN PHÔI NANG TRỮ LẠNH LẠNH
3.1.1. Tuổi
Phân bố nhóm tuổi của bệnh nhân trong nhóm nghiên cứu được thể hiện qua hình 3.1
Hình 3. 1. Phân bố nhóm tuổi bệnh nhân Tuổi của bệnh nhân chuyển phôi từ 19 đến 57. Tuổi của bệnh nhân chuyển phôi từ 19 đến 57.
Trong đó, nhóm nghiên cứu gồm phần lớn bệnh nhân đang ở độ tuổi sinh sản, dưới 35 tuổi là 238 bệnh nhân chiếm 65.21% số trường hợp nghiên cứu,
Tuổi trung bình của người vợ là 33±6.
Số phơi chuyển trung bình trên một chu kỳ là 1.86±0.42/ 1 chu kỳ chuyển phôi.
3.1.2. Chất lượng phôi trước đông 128 128 110 92 35 0 50 100 150 Dưới 30 30-34 35-40 Tuổi >40 Số ch u kỳ ch uy ển p hơ i Nhóm tuổi
Hình 3. 2. Chất lượng trước khi đơng
Trong 680 phơi nghiên cứu thì chất lượng phơi loại rất tốt, loại tốt là 536 phôi chiếm 78,82 % cịn 146 phơi là phơi trung bình và xấu chiếm 21,18 %. Chất lượng phôi trước trữ đông như vậy cho thấy được tiềm năng chuyển phôi trữ cũng như là tiên lượng được kết quả của điều trị IVF.
3.1.3. Số lượng phôi chuyển
Hình 3. 3. Số lượng phơi chuyển
Số chu kỳ chuyển 2 phôi nhiều nhất chiếm 80,55%, và chuyển 1 phôi chiếm tỷ lệ 16,71%, đặc biệt chuyển 3 phơi rất ít chỉ chiếm 2,74%.
Số phơi chuyển trung bình trên 1 chu kỳ chuyển phơi là 1.86±0.42
149 387 110 34 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 Rất tốt Tốt Trung bình Xấu Số lư ợn g ph ơi trư ớc đơ ng
Chất lượng phơi trước khi đông lạnh
Chuyển 1 phôi 16.71%, N=61
Chuyển 2 phôi 80.55%,N=294
Chuyển 3 phôi 2.74%, N=10 Số lượng phôi chuyển
Chuyển 1 phôi Chuyển 2 phơi Chuyển 3 phơi
3.2. KẾT QUẢ Q TRÌNH NGHIÊN CỨU
3.2.1. Tỷ lệ sống của phôi sau rã đông
Tổng số có 685 phơi được rã đơng trong đó có 5 phơi tái đơng, 1 phơi thối hóa và 679 phơi được chuyển cho 365 chuy kỳ được nghiên cứu.
Hình 3. 4. Tỷ lệ phơi sống sót
Trong nghiên cứu này, tỷ lệ sống của phôi là 99,85%. Tỷ lệ sống cao như vậy bởi chúng tôi đã áp dụng kỹ thuật đơng rã Thủy tinh hóa (Vitrification) kỹ thuật này cho tỷ lệ sống cao hơn kỹ thuật đông phôi chậm nên số phôi sống sau rã đông là gần như 100%. Tỷ lệ sống này nó cũng phụ thuộc vào kỹ năng thao tác, chất lượng của môi trường sử dụng.
3.2.2. Chất lượng của phơi sau rã đơng
Hình 3. 5. Chất lượng phơi chuyển 99.85%
0.15% Tỷ lệ sống sót của phơi sau
Tỷ lệ sống sót (%), N=679 Tỷ lệ thối hóa(%), N=1 0 200 400 600 800 Tổng Rất tốt Tốt Trung bình Xấu 679 148 379 111 41 Tổng số phơi chuyển C hấ t l ượng phơi
Tổng số có 679 phơi chuyển, số phơi tốt và rất tốt chiếm 77,61%. Số còn lại là phơi trung bình, xấu chiếm 22,39%.
3.2.2.1 Đánh giá hình thái lá ni
Đánh giá hình thái lá ni (TE) theo tiêu chuẩn Gardner D. K1999, chúng tôi thu được kết quả như sau:
Hình 3. 6. Hình thái lá ni
Tổng có 679 phơi được nghiên cứu, số phơi có tế bào lá ni loại A và loại B là 568 phôi chiếm 83,65%. TE loại C là 111 chiếm 16.35%.
3.2.2.2 Đánh giá hình thái ICM
Đánh giá hình thái nụ phơi (ICM) theo tiêu chuẩn Gardner D. K 1999, chúng tôi thu được kết quả như sau:
Hình 3. 7. Hình thái ICM 22.97% 22.97%
60.68% 16.35%
Đánh giá hình thái TE
Loại A, N=156 Loại B, N=412 Loại C, N= 111
21.80%
56.55% 21.65%
Đánh giá hình thái ICM( %)
A và loại B là 532 phôi chiếm 78,35%.
Bảng 3.1.So sánh chất lượng phôi trước và sau rã đông
Chất lượng Trước đông lạnh Sau rã đông
Rất tốt 149 148
Tốt 387 379
Trung bình 110 111
Xấu 34 41
Tổng N=680 N=679(1 phơi thối hóa)
Phơi rất tốt chỉ 1 phơi chuyển sang phơi tốt, phơi tốt thì 9 phơi chuyển xuống trung bình, cịn phơi trung bình 8 phơi chuyển sang phơi xấu và 1 phơi xấu trước đơng bị thối hóa sau rã đơng.
3.2.3. Kết quả thai sau chuyển phôi
Bảng 3.2. Kết quả sau chuyển phôi nang trữ đông
Các đặc điểm nghiên cứu Kết quả thai N Số chu kỳ N=365
Tỷ lệ (%)
Β-hCG (+) 273 365 74,79
Thai sinh hóa 28 365 7,67
Thai lâm sàng 245 365 67,12
Đa thai 29 365 7,95
Thai tiến triển 242 365 66,30
Số phôi chuyển (N)
Số phôi làm tổ 274 40,35
Tổng số phôi chuyển 679 100
Tỷ lệ β-hCG dương tính và tỷ lệ thai lâm sàng của nhóm này lần lượt là 74,79% và 67,12%. Tỷ lệ làm tổ của phôi là 40,35%. Đặc biệt thai tiến triển rất khả quan chiếm 66,30%.
3.3. ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ LÊN KẾT QUẢ CHUYỂN
PHÔI TRỮ ĐÔNG
Bảng 3.3. Sự liên quan chất lượng phôi chuyển và thai lâm sàng. Chất lượng phơi Chất lượng phơi Khơng có thai lâm sàng (N) Có thai lâm sàng (N) Tỷ lệ % Tổng (N) Giá trị P Phôi rất tốt + phôi tốt 93 233 71,47% 326 0.0001 Khơng có phơi tốt 27 12 30,77% 39 Tổng 120 245 67.12% 365
Nghiên cứu của chúng tôi ghi nhận tỷ lệ có thai lâm sàng của chuyển phơi nang trữ đơng ở nhóm có phơi tốt cao nhất là 71,47%. Và tỷ lệ thai lâm sàng thấp nhất ở nhóm phơi có chất lượng xấu. Sự khác biệt ở hai nhóm phơi tốt và nhóm phơi xấu sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p<0.05).
3.3.1.1. Ảnh hưởng của chất lượng phơi đến thai lâm sàng trong nhóm chuyển 2 phôi
Bảng 3.4. Sự tương quan chất lượng phơi trong nhóm chuyển 2 phơi
Nhóm phơi Thai lâm sàng(N) Không thai Lâm sàng(N) Tổng (N) Tỷ lệ% Giá trị P Khơng có phơi tốt 8 14 22 36,36% 0.0023 Có ít nhất 1 phơi tốt 47 29 76 61,84% Hai phôi tốt 147 49 196 75% Tổng 202 92 294 68,71%
Dựa theo kết quả phân tích bảng trên nhóm chuyển 2 phơi thì:
+ Tỷ lệ thai lâm sàng thấp nhất khi chuyển cả 2 phơi loại khơng có phơi tốt là 100*(8/22)=36.36%
+Tỷ lệ thai lâm sàng khi chuyển kèm 1 phơi trung bình với 1 phơi tốt, hoặc 1 tốt là (47/76) *100=61.8%
+ Tỷ lệ thai lâm sàng khi chuyển kèm 2 phôi tốt hoặc 2 phôi tốt hoặc kết hợp 1 phôi rất tốt, 1 phôi tốt là 100*(147/196) = 75%. Như vậy thì có sự khác biệt về tỷ lệ thai lâm sàng ở nhóm chuyển 2 phơi có chất lượng phơi tốt. Và sự
3.3.1.2. Liên quan giữa chất lượng phôi chuyển và tỷ lệ thai lâm sang ở nhóm chuyển 1 phơi
Bảng 3.5. Sự tương quan chất lượng phơi trong nhóm chuyển 1 phơi
Nhóm phơi Thai lâm sàng(N) Không thai Lâm sàng(N) Tỷ lệ% Tổng (N) Giá trị P Khơng có phơi tốt 1 11 8,33 12 0.0001 Có phơi tốt 35 14 71,43 49 Tổng 36 25 59,02 61
+ Kết quả phân tích từ nhóm chuyển 1 phơi. Trường hợp chuyển 1 phơi là phơi trung bình thì kết quả thai lâm sàng là thấp nhất 100*(1/12) =8,33%.
+Trường hợp chuyển 1 phơi là phơi tốt hoặc phơi tốt thì tỷ lệ thai lâm sàng là 100*(35/49) =71,43%. Tỷ lệ thai lâm sàng có sự khác biệt rõ rệt khi chuyển 1 phơi khơng có phơi tốt so với 1 phôi tốt hoặc rất tốt. Và sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê (p=0.0001>0.05.).
3.3.2. Ảnh hưởng của tuổi người mẹ lên kết quả thai
Kết quả thai theo nhóm tuổi 90 80 70 60 50 40 30 82.03 75.78 77.27 71.82 68.48 20 10 0 9.38 2.85 <30 30-34 35-40 >40 Nhóm tuổi
Tỷ lệ thai β-hCG % Tỷ lệ đa thai % Tỷ lệ thai lâm sàng % 8.69 7.27 45.71 57.14 57.61 T ỷ lệ %
Tỷ lệ thai sinh hóa, thai lâm sàng cao nhất nhóm tuổi dưới 30 và giảm dần ở các nhóm, thấp nhất nhóm trên 40 tuổi. Tỷ lệ đa thai cũng cao nhất ở nhóm tuổi dưới 30 và giảm dần ở các nhóm, thấp nhất nhóm trên 40 tuổi. Như vậy tuổi người mẹ có ảnh hưởng đến kết quả thai và thai lâm sàng .
3.3.3. Sự tương quan giữa chất lượng và số lượng phôi chuyển với thai lâm sàng sàng
Bảng 3.6. Sự tương quan giữa chất lượng và số lượng phôi chuyển với thai
lâm sàng
Nhóm
Chất lượng phơi chuyển
Thai lâm sàng(N) Khơng có thai lâm sàng(N) Tỷ lệ % Tổng (N) 1 1 phôi tốt 35 14 71,43 49 2 1 phôi xấu 1 11 8,33 12 3 2 phôi tốt 147 49 75 196
4 2 phơi khơng có phơi tốt 8 14 36,36 22
5 2 phơi (có 1 phơi tốt) 47 29 61,84 76
So sánh(OR) tương quan của nhóm 1 với nhóm 2,3,4,5 ta được kết quả như sau:
Bảng 3.7. So sánh (OR) tương quan của nhóm 1 với nhóm 2,3,4,5
Phân tích kết quả có sự khác biệt giữa nhóm 1 với nhóm 3, nhóm 5 nhưng khơng có ý nghĩa thống kê p>0.05. Sự tương quan của nhóm 1 với nhóm 2 có sự khác biệt và có ý nghĩa thống kê p=0.0001<0.05. Sự tương quan của nhóm