III. Nội dung nghiên cứu
2.3.Phơng pháp nghiên cứu
2.3.1. Phơng pháp bố trí thực nghiệm
Thí nghiệm đợc bố trí theo phơng pháp ngẫu nhiên hoàn toàn trong 12 bể gồm 4 công thức, mỗi công thức lặp lại 3 lần thể hiện qua hình 2.1.
Bể 1 CT4 Bể 2 CT3 Bể 3 CT2 Bể 4 CT2 Bể 5 CT1 Bể 6 CT2 Bể 7 CT4 Bể 8 CT4 Bể 9 CT1 Bể 10 CT3 Bể 11 CT1 Bể 12 CT3 Hình 2.1. Sơ đồ bố trí thí nghiệm
2.3.2. Sơ đồ khối nghiên cứu
Nghiên cứu ảnh hởng của các mức protein nhân hạt cao su thay thế protein bột cá tới một số chỉ tiêu sinh lý
của cá Rô phi vằn (Oreochromis niloticus)
Đánh giá ảnh hởng của các mức protein nhân hạt cao su thay thế protein bột cá tới một số chỉ tiêu sinh lý của
Hình 2.2. Sơ đồ hình khối biểu diễn quy trình nghiên cứu
2.3.3. Phơng pháp thu mẫu
- Hạt cao su đợc thu mua tại nông trờng cao su Nghĩa Đàn - Nghệ An. Hạt cao su đợc tách vỏ sau đó mẫu đợc xử lý bằng phơng pháp sấy ở nhiệt độ 60 - 65oC cho đến trọng lợng khô tuyệt đối.
Các yếu tố khống chế trong thực nghiệm: - Nhiệt độ - pH - DO - Độ kiềm - Con giống
Các chỉ tiêu nghiên cứu:
- Thành phần dinh dỡng nhân hạt cao su - Tỉ lệ sống
- Sự sinh trởng
- Số lợng hồng cầu, bạch cầu, hàm lợng Hemoglobin
- Hệ số chuyển đổi thức ăn và chi phí thức ăn
CT1 CT2 CT3 CT4
Xử lí và phân tích số liệu
Kết luận và đề nghị Nhận xét và thảo luận
- Mẫu cá đợc thu trực tiếp định kỳ 2 tuần/lần bằng cách tháo cạn nớc trong bể tiến hành đếm số lợng, cân khối lợng, đo chiều dài thân toàn phần sau đó thả trở lại bể.
- Máu cá đợc thu vào buổi sáng của đợt thu mẫu cuối cùng, mỗi bể chọn 3 con để lấy máu.Phơng pháp lấy máu cá theo phơng pháp của Ovanova (1983) [18]
2.3.4. Phơng pháp thu thập số liệu:
2.3.4.1 Phơng pháp xác định các yếu tố môi trờng
+ Xác định nhiệt độ bằng máy đo Oxy meter + Xác đinh pH bằng máy đo pH meter
+ Xác đinh oxy hoà tan bằng máy đo DO meter + Xác định hàm lợng NH3 bằng test thử
2.3.4.2. Phơng pháp xác định giá trị dinh dỡng nhân hạt cao su
- Phơng pháp xác định protein tổng số bằng phơng pháp Kjeldahl theo tài liệu của Nguyễn Văn Mùi [19] trên máy phân tích đạm tự động - UDK 132 Semi Automatic Steam Distilling Unit tại phòng thí nghiệm cơ sở thuỷ sản khoa Nông - Lâm - Ng - Trờng đại học Vinh.
- Phơng pháp xác định lipit bằng phơng pháp Soclex theo tài liệu của Nguyễn Văn Mùi [19] trên máy cất dung môi tự động (Solvent Extraction) tại phòng thí nghiệm nông học khoa Nông - Lâm - Ng - Trờng Đại Học Vinh.
- Phơng pháp xác định mức năng lợng bằng phơng pháp công phá mẫu trên máy đo năng lợng Parr 6100 tại phòng thí nghiệm cơ sở thuỷ sản khoa Nông - Lâm - Ng - Trờng đại học Vinh nhằm xác định gián tiếp gluxit.
- Phơng pháp xác định axit amin bằng phơng pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) trên máy phân tích axit amin tự động HP - Aminoquan Series II bao gồm RP - 1090 Win HPLC với Dio - Arrory Detector với 2 hệ bớc sóng 338 nm cho các axit amin bậc 1 và 262 nm cho các axit amin bậc 2.
- Xác định tỷ lệ sống (%) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Xác định tỷ lệ sống tích luỹ tại thời điểm (2 tuần/lần) bằng cách đếm số lợng cá thể trong các bể thí nghiệm.
- Xác định khối lợng và kích thớc cá Rô phi vằn
Khối lợng đợc xác định bằng phơng pháp cân trên cân điện tử Model AND GX - 600với độ chính xác đến 0,01 g.
Chiều dài thân toàn phần của cá đợc xác định bằng phơng pháp đo trên giấy kẻ ô li, mỗi vạch tơng ứng với 1 mm.
- Xác định các chỉ số huyết học bằng phơng pháp đo trở kháng trên máy phân tích huyết học tự động PCE - 170 Operation Manual tại khoa xét nghiệm bệnh viện Ba Lan - T.P Vinh - Nghệ An.
2.3.5. Phơng pháp xử lý số liệu
* Một số công thức toán đợc sử dụng trong xử lý số liệu + Tỷ lệ sống ( ) 100(%) i T T TLS T − = ì Trong đó: TLS: Tỷ lệ sống, T : Số cá thả, Ti: Số cá chết + Tốc độ tăng trởng tuyệt đối về khối lợng
( s t) t W W AWR − = ∆ (g/ngày)
+ Tốc độ tăng trởng tuyệt đối về chiều dài thân toàn phần
( s t) t L L AGR − = ∆ (mm/ngày)
+ Tốc độ tăng trởng tơng đối (%) về khối lợng
. s t t t W W RWR W − = ∆ ì100 (%/ngày)9
+ Tốc độ tăng trởng tơng đối về chiều dài thân toàn phần
. s t t t L L RGR L − = ∆ ì100 (%/ngày)
Trong đó
s
W , Lt: Là khối lợng và chiều dài thân ở thời điểm trớc.
t
W , Ls: Là khối lợng, chiều dài thân ở thời điểm thu mẫu kế tiếp
t
∆: Khoảng thời gian giữa 2 lần thu mẫu kế tiếp
AGR
AWR, : Tốc độ tăng trởng tuyệt đối về khối lợng và chiều dài thân toàn phần
RGR
RWR, : Tốc độ tăng trởng tơng đối về khối lợng và chiều dài thân toàn phần
+ Hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR) Khối lợng thức ăn đã sử dụng Khối lợng tăng lên của cá
+ Chi phí thức ăn/ Kg tăng trọng = Hệ số thức ăn * Giá thức ăn
* Các số liệu tính toán và so sánh đều đợc xử lý theo phơng pháp thống kê thờng dùng trong sinh học với sự hỗ trợ của phần mềm Exell và phần mềm SPSS 12.0, sử dụng trắc nghiệm Ducan để so sánh sự khác nhau giữa các nghiệm thức.
2.4. Địa điểm nghiên cứu
Thực nghiệm đợc tiến hành tại trại thuỷ sản nớc ngọt Hng Nguyên - Đại Học Vinh (khối 2 - Thị Trấn Hng Nguyên - Nghệ An). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
2.5. Thời gian thực hiện đề tài: Đề tài đợc thực hiện từ tháng 1/2008 đến tháng
12/2008.
Chơng 3
Kết quả nghiên cứu và thảo luận 3.1. Các yếu tố khống chế trong thực nghiệm
Số liệu về biến động một số yếu tố môi trờng ở bể nuôi trong quá trình nghiên cứu thể hiện qua các biểu đồ 3.1, 3.2, 3.3, 3.4.
Biểu đồ 3.1. Biến động nhiệt độ trong các công thức thực nghiệm
Biểu đồ 3.3. Biến động hàm lợng oxi hoà tan (DO) trong các công thức thực nghiệm
Biểu đồ 3.4. Biến động độ kiềm trong các công thức thực nghiệm Trong quá trình tiến hành thực nghiệm, các yếu tố môi trờng đợc kiểm soát trong giới hạn tiêu chuẩn cho phép. Kết quả quan trắc các chỉ số môi trờng cho thấy, nhiệt độ nớc trong suốt thời gian thí nghiệm nằm trong khoảng 27,3 - 29,80C, pH dao động trong khoảng 7,21 - 7,56, hàm lợng oxi hoà tan 3,1 - 4,2 mgO2/l, độ kiềm 40 - 52 mg/l. Theo Lê Quang Long (1986), nhiệt độ cực thuận cho sự sinh truởng và phát triển của cá Rô phi 25 - 320C [14], hàm lợng DO thích hợp 3 - 4 mgO2/l, pH 6,5 - 8,5 [15]. Điều này chứng tỏ việc quản lí môi tr-
ờng đã đợc tiến hành nghiêm ngặt theo yêu cầu, đảm bảo tơng đối đồng nhất giữa các bể nuôi và phù hợp cho cá Rô phi vằn sinh trởng và phát triển.
3.1.2 Chất lợng con giống
Con giống sử dụng trong quá trình thực nghiệm đợc kiểm soát dựa trên những tiêu chuẩn sau thể hiện ở bảng 3.1 và 3.2 đảm bảo chất lợng con giống tơng đối nh nhau giữa các lô thí nghiệm.
Bảng 3.1. Chỉ tiêu cảm quan chọn cá Rô phi vằn
Cá CT1 CT2 CT3 CT4
Đồng đều về kích cỡ Đạt Đạt Đạt Đạt Màu sắc tơi sáng Đạt Đạt Đạt Đạt Hoạt động nhanh nhẹn Đạt Đạt Đạt Đạt Không bị bệnh Đạt Đạt Đạt Đạt
Bảng 3.2. Chỉ tiêu khối lợng chọn cá Rô phi vằn
Lô thực nghiệm CT1 CT2 CT3 CT4
Khối lợng 2,58 0,20± a 2,31 0,04± a 2,59 0,53± a 2,43 0,21± a
( Theo hàng những nghiệm thức nào có mặt ít nhất một chữ cái trùng nhau thì sai khác không có ý nghĩa thống kê)
3.2. Kết quả phân tích thành phần dinh dỡng nhân hạt cao su
Nhân hạt cao su thu đợc sau khi tách bỏ vỏ hạt cao su, nghiền nhỏ và sấy ở nhiệt độ 60 - 65oC cho đến trọng lợng khô tuyệt đối. Tiến hành phân tích, chúng tôi đã xác định đợc một số thành phần dinh dỡng chính nhân hạt cao su và so sánh với một số nghiên cứu thể hiện ở bảng 3.3.
Kết quả nghiên cứu (bảng 3.3) cho thấy hàm lợng protein, lipit và gluxit nhân hạt cao su ở Nghệ An thấp hơn nghiên cứu của Lawn Tjin, Giok, M. D., Samsudin 34,3%, lipit 14% [45]. Đối chiếu với nghiên cứu của F. N. Madubuike về thành phần dinh dỡng nhân hạt cao su ở Kenya (protein 32,98%, lipit 13,09%) [42] thì kết quả nghiên cứu của chúng tôi ít sai khác.
Bảng 3.3. So sánh một số thành phần dinh dỡng chính nhân hạt cao su (NHCS) nghiên cứu với các nghiên cứu khác
Thành phần NHCS nghiên cứu NHCS theo nghiên cứu của Lawna cứu của MadubuikeNHCS theo nghiên b
Protein (%) 32,8 34,3 32,98
Lipit (%) 14,6 14 13,09
Gluxit (%) 39,8 - -
(Nguồn: Lawna[45], Madubuikeb[42] )
So sánh thành phần nhân hạt cao su với thành phần dinh dỡng của nhóm nguyên liệu có nguồn gốc thực vật đợc chỉ ra ở bảng 3.4.
Bảng 3.4. So sánh thành phần dinh dỡng trong bột nhân hạt cao su nghiên cứu với một số loại nguyên liệu có nguồn gốc thực vật
Tên nguyên liệu Độ ẩm Phần trăm trọng lợng khô Protein (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
thô Lipit Gluxit Tro Nhân hạt cao su 5,7 32,8 14,6 39,8 14,4 Bột sắna 7,2 17,2 3,0 70,6 9,2 Bột khô dừaa 7,3 22 7,4 61,9 8,7 Bột lá keoa 4,4 25,2 5,6 63,5 5,8 Bột bắpa 77,3 7,5 1,4 90,3 0,8 Bột đậu nành thôa 8,4 42,7 20,5 29,9 20,9 Khô đậu nànha 8,5 43,6 1,8 51,1 7,6
(Nguồn a theo Lai Văn Hùng 2004) [11]
Qua bảng 3.4, ta thấy giá trị dinh dỡng của nhân hạt cao su cao hơn so với cám gạo, bột bắp và bột sắn, bột dừa khô, chỉ thấp hơn bột đầu nành thô và khô đậu nành.
Mặt khác, đối chiếu hàm lợng các axit amin thiết yếu trong bột nhân hạt cao su với tiêu chuẩn của FAO.
Bảng 3.5. So sánh hàm lợng axit amin thiết yếu trong protein bột nhân hạt cao su với tiêu chuẩn của FAO
STT Axit amin Bột nhân hạt cao su Tiêu chuẩn của FAOa
1 Isoleucine 3,1 4,2
2 Leucine 6,7 4,8
4 Phenylalanin 3,8 2,8
5 Methionine 0,7 2,2
6 Threonine 2,8 2,8
7 Triptophan 1,3 1,2
8 Valine 6,4 4,2
(Nguồn a: Tiêu chuẩn của FAO về giá trị dinh dỡng của protein) [41] .
Chúng tôi nhận thấy, bột nhân hạt cao su có mặt 8 axit amin thiết yếu cho động vật nói chung đặc biệt là 7 axit amin tối cần thiết cho hoạt động của động vật gồm lysine, phenynalanine, isoleusine, valine, threonine, methionine, leucine.
Trong đó, lysine là loại axit amin thờng thiếu trong nhiều thực phẩm nhất là những thực phẩm từ ngũ cốc nh gạo, ngô, khoai, sắn nh… ng trong nhân hạt cao su thì hàm lợng lysine cao hơn tiêu chuẩn của FAO. Đây là axit amin đóng vai trò quan trọng trong sinh tổng hợp hemoglobin, axit nucleic, ảnh hởng đến tiêu hoá, thần kinh, sự hình thành mô xơng, cải thiện tốt chức năng của các cơ quan nội tạng, thiếu axit amin này trong thức ăn sẽ gây kém ăn, thiếu máu [13].
Phenylalanine là tiền chất dẫn truyền thần kinh, kích thích hormon tăng trởng, đẩy mạnh hoạt động miễn dịch. Hàm lợng axit amin này trong nhân hạt cao su nghiên cứu cũng cao hơn so với tiêu chuẩn của FAO.
Valine ảnh hởng đến hoạt động của tuyến tụy. Nếu thiếu axit amin này trong thức ăn sẽ gây rối loạn trong phối hợp hoạt động. Hàm lợng của axit amin valine trong protein nhân hạt cao su trong nghiên cứu của chúng tôi cao hơn tiêu chuẩn của FAO.
Arginine kích thích sản xuất hormon tăng trởng và tham gia vào quá trình chuyển hoá cơ thể. Arginine giữ vai trò quan trọng trong sinh sản ở động vật. Hàm lợng axit amin này trong nhân hạt cao su nghiên cứu cũng cao hơn so với tiêu chuẩn của FAO.
Nh vậy, trong 7 axit amin tối cần thiết cho động vật thì trong nhân hạt cao su có 5 axit amin có hàm lợng cao hơn hoặc bằng tiêu chuẩn của FAO,
isoleusine sấp xỉ bằng tiêu chuẩn của FAO riêng methionine thấp hơn tiêu chuẩn của FAO.
Do vậy, có thể khẳng định nhân hạt cao su là một loại nguyên liệu có nguồn gốc thực vật có giá trị, có thể thay thế một phần bột cá trong khẩu phần ăn của cá Rô phi vằn nói riêng và động vật thuỷ sản nói chung.
3.3. ảnh hởng của các mức thay thế protein bột cá bằng bột nhân hạt cao su đối với tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn su đối với tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn
Kết quả theo dõi tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn trong các công thức thí nghiệm đợc thể hiện qua bảng 3.6.
Bảng 3.6. Tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn trong các lô thực nghiệm (%) Tuần nuôi CT1 CT2 CT3 CT4 2 93,33 11,55± a 88,9 10,18± a 93,33 5,77± a 94,44 6,94± a 4 88,89 10,18± a 86,67 6,67± a 92,22 6,94± a 92,22 3,85± a 6 89,89 10,18± a 86,67 10,00± a 83,33 11,55± a 84,44 15,03± a 8 89,89 10,18± a 86,67 10,00± a 83,33 11,55± a 83,33 13,33± a 10 89,89 10,18± a 85,56 6,94± a 83,33 11,55± a 83,33 13,33± a 12 88,89 6,94± a 84,44 8,39± a 83,33 11,55± a 83,33 13,33± a
(Theo hàng các nghiệm thức có mặt ít nhất một chữ cái trùng nhau thì sai khác không có ý nghĩa thống kê (P > 0,05)
Qua bảng 3.6 cho thấy:
- Trong quá trình thí nghiệm ở giai đoạn sau 2 tuần nuôi, tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn có biến động lớn trong cả 4 công thức. Nguyên nhân là do cá chuyển từ ao nuôi sang bể composite nên môi trờng sống thay đổi. Sau giai đoạn 4 - 12 tuần nuôi, tỷ lệ sống có dao động ở mức thấp và khá ổn định.
- Tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn ở bốn công thức thực nghiệm tơng đối cao, dao động trong khoảng 83,33 - 88,89 do cá thả ban đầu có chất lợng tốt,
không bị bệnh, cỡ đồng đều, môi trờng sống thích hợp. Mặt khác, cá Rô phi có u điểm là phổ thích nghi rộng, ngỡng chịu đựng cao. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Đồng thời nghiên cứu còn cho thấy giữa các lô thực nghiệm có sự sai khác trong đó CT1 có tỷ lệ cá sống cao nhất (88,89%) sau đó là CT2, thấp nhất là CT3 và CT4 (83,33%) tuy nhiên sai khác về tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn ở CT1 và các công thức thức ăn thay thế không có ý nghĩa thống kê với P > 0,05 chứng tỏ việc thay thế bột cá bằng bột nhân hạt cao su trong khẩu phần ăn không ảnh hởng đến tỷ lệ sống của cá Rô phi vằn.
Nghiên cứu của chúng tôi cho kết quả cao hơn kết quả nghiên cứu của Nguyễn Thị Diệu Phơng (2001) khi nuôi cá Rô phi vằn trong bể compozite bằng thức ăn viên của Viện nghiên cứu NTTS I (25% protein). Theo tác giả trên, tỷ lệ sống của cá thấp và dao dộng lớn (66,67% - 83,33%) [20].
3.4. ảnh hởng của các mức thay thế protein bột cá bằng protein nhân hạt cao su lên sự sinh trởng của cá Rô phi vằn
Sinh trởng là quá trình cơ thể lớn lên, tăng về kích thớc và khối lợng trên cơ sở phân hoá và tăng trởng của các cơ quan trong cơ thể sống. Đại đa số các loài cá sinh trởng liên tục và suốt đời. Tuy nhiên, tốc độ tăng trỏng không đồng đều, phụ thuộc vào nhiều yếu tố trong đó có yếu tố thức ăn. Vì vậy, khi tiến hành thay thế protein bột cá trong khẩu phần ăn của cá Rô phi vằn ở mức 0%,