3. ĐỐI TƯỢNG ĐỊA ĐIỂM – NỘI DUNG – PH ƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
3.3.5. Nghiờn cứu tổn thương bệnh lý ở phổi chú mắc bệnh viờm phổ
+ Tổn thương đại thể: tiến hành mổ khỏm, quan sỏt cỏc tổn thương bệnh lý. + Tổn thương vi thể: lấy miếng phổi ở vựng phổi viờm ngõm trong dung dịch focmon 10% để làm tiờu bản tổ chức học vi thể.
* Cỏch làm tiờu bản: Phổi chú mắc bệnh được cố định bằng dung dịch
Formol 10% (thể tớch Formol gấp 10 – 20 lần thể tớch tổ chức phổi). - Tẩy nước làm trong
+ Lấy bệnh phẩm ra khỏi dung dịch Formol 10% rồi đem rửa nước từ 12 – 24 giờ (rửa dưới vũi nước chảy nhẹ) để trụi hết Formol.
+ Khử nước: mẫu bệnh phẩm rửa nước xong thấm nhẹ trờn giấy lọc rồi cho vào hệ thống cồn Ethylic với thời gian như sau: cốc 1 là cồn 700 với thời
gian 2 - 4 giờ; cốc 2, 3, 4 là cồn 1000 với thời gian 4 – 6 giờ. Thời gian cú thể thay đổi tựy mẫu tổ chức to hay nhỏ.
+ Làm trong: lấy miếng tổ chức ra khỏi cồn, thấm nhẹ trờn giấy lọc rồi cho vào hệ thống 3 lọ Xylen, mỗi lọ 2 giờ. Thời gian cú thể thay đổi tựy theo miếng tổ chức to hay nhỏ. Sau khi đi qua lần lượt 3 lọ Xylen, miếng tổ chức trong như đường phốn là được, nếu khụng phải khử lại từ cồn tuyệt đối rồi lại đưa vào dung dịch làm trong.
- Tẩm parafin gồm: Cốc 1: Parafin + Xylen theo tỷ lệ 1:1 từ 2 – 12 giờ ở 370C, sau đú lần lượt cho qua 3 cốc parafin ở nhiệt độ 560C mỗi cốc 4 – 6 giờ. (Khi tẩm cần theo dừi nhiệt độ liờn tục, nếu nhiệt độ quỏ cao hoặc quỏ thấp miếng tổ chức sẽ bị hỏng).
- Đổ Block: chuẩn bị đầy đủ dụng cụ, khuụn giấy, parafin phải núng chảy hoàn toàn nhưng nhiệt độ khụng được quỏ cao sẽ ảnh hưởng đến chất lượng tiờu bản sau nàỵ Đợi cho parafin đụng đặc hoàn toàn, búc bỏ khuụn giấy và sửa lại Block cho vuụng vắn.
- Cắt dỏn mảnh: cắt miếng tổ chức trờn mỏy cắt Microtom với độ dày 3àm. Mảnh tổ chức khi được cắt ra sẽ được để tói phẳng nhờ nước trứng trờn ngọn lửa đốn cồn. Để miếng tổ chức khụ nhờ khụng khớ sau một thời gian thỡ cho vào tủ ấm 370C.
- Nhuộm tiờu bản:
+ Tẩy parafin: cho tiờu bản lần lượt qua 3 lọ Xylen mỗi lọ 3 – 5 phỳt. Khi cho tiờu bản qua Xylen phải thường xuyờn nhấc lờn nhấc xuống cho tan parafin, dựng khăn lau sạch parafin xung quanh miếng tổ chức.
+ Tẩy Xylen: dựng cồn Ethylic, cốc 1 dựng cồn 960 từ 3 – 5 phỳt; cốc 2, 3 dựng cồn 1000 từ 3 – 5 phỳt.
+ Nhuộm Hematoxylin: ngõm tiờu bản trong dung dịch Hematoxylin khoảng 5 – 10 phỳt tựy theo chất lượng thuốc nhuộm và độ dày tiờu bản. Sau
khi nhuộm Hematoxylin phải kiểm tra, nếu màu tiờu bản nhạt cú thể nhỳng nhanh tiờu bản qua NaHCO3 1% để tiờu bản đậm hơn (Cỏch pha dung dịch NaHCO3 1%: NaHCO3 1 gam, nước cất 100ml), nếu tiờu bản đậm quỏ cú thể nhỳng nhanh qua cồn Axit chlohydric. Sau khi điều chỉnh màu rửa sạch tiờu bản bằng nước cất.
+ Nhuộm Eosin: cho tiờu bản vào Eosin khoảng 30 giõy – 2 phỳt tựy theo thực tế, nếu màu Eosin nhạt cú thể cho vào dung dịch Eosin 1 – 2 giọt Axit axetic. Sau đú rửa bằng nước cất 1 – 2 phỳt.
+ Tẩy nước: dựng cồn Ethylic tẩy nước trong tiờu bản. Cốc 1 dựng cồn 900 trong 2 – 3 phỳt; cốc 2, 3 dựng cồn 1000 trong 3 – 5 phỳt.
+ Làm trong: cho tiờu bản qua 2 cốc Xylen mỗi cốc 3 – 5 phỳt - Gắn lamen, dỏn nhón và đọc kết quả trờn kớnh hiển vị
3.3.6.Điều trị thử nghiệm
Chỳng tụi tiến hành điều trị thử nghiệm 25 chú mắc bệnh viờm phổi ở mức độ bệnh như nhau và chia làm 2 nhúm, điều trị bằng 2 phỏc đồ.
Nhúm chú bệnh 1 (13 con): chỳng tụi điều trị bằng phỏc đồ 1. Nhúm chú bệnh 2 (12 con): chỳng tụi điều trị bằng phỏc đồ 2.
* Phỏc đồ 1: chỳng tụi sử dụng khỏng sinh Gentatylo với liều lượng 0,2ml/kgTT (2 lần/ngày); kết hợp với việc dựng thuốc giảm ho, long đờm (Codein phosphat với liều 0,03g/kgTT ) và thuốc trợ sức, trợ lực (VitaminC 500mg với liều lượng 0,5 - 1g/con/ngày, B.Complex với liều 2ml/con/ngày).
* Phỏc đồ 2: chỳng tụi cũng dựng khỏng sinh Gentatylo với liều lượng 0,2ml/kgTT (2 lần/ngày); kết hợp với dựng thuốc giảm ho, long đờm và thuốc trợ sức, trợ lực với liều lượng như phỏc đồ 1. Nhưng ở phỏc đồ này chỳng tụi cũn dựng thờm thuốc giảm viờm, giảm kớch ứng vỏch phế quản (Prednisolon) với liều 0,5 – 1ml/10kgTT) và thuốc tăng cường giải độc, lợi tiểu cho cơ thể (dung dịch đường Glucoza 20% với liều 6ml/kgTT, Urotropin 10% với liều 5
– 10ml/con/ngày), truyền chậm vào tĩnh mạch ngày 1 lần.
So sỏnh hiệu quả điều trị của 2 phỏc đồ và thời gian chú khỏi bệnh sau cỏc ngày điều trị.