- Real-time PCR có ưu điểm chính so với PCR truyền thống là cho phép chúng ta định lượng số copy khởi đầu của khuôn mẫu với độ chính xác và
độ nhạy cao trên một phạm vi động học lớn. Các kết quả của real-time PCR có thể là chất lượng (sự có mặt hoặc không của trình tự đích) hoặc định lượng (số bản copy của ADN). Real-time PCR định lượng còn được biết
đến như là qPCR. Số liệu của real-time PCR có thể đánh giá mà không cần
liệu đưa vào quá trình được tăng lên. Cuối cùng, do các phản ứng được chạy và số liệu được đánh giá trong một hệ thống ống đóng kín, nên các cơ
hội nhiễm chéo được giảm thiểu và sự cần thiết của các thao tác hậu khuếch đại được loại bỏ.
- Chúng tôi sử dụng cặp mồi MY09/11 và cặp mồi GP 5+/GP6+, trong
đó cặp mồi MY 09/11 lấy từđoạn gen L1, có chiều dài ADN 150 bp, cặp mồi GP 5+/GP6+ có đoạn gen ngắn hơn là 140 bp, cặp mồi GP5+/GP6+ có độ
nhạy cao hơn cặp mồi MY09/11. Mẫu bệnh phẩm của chúng tôi được đựng trong lọ Eppendorf và bảo quản ở chếđộ đông lạnh và tiến hành thử gen sớm do đó có độ nhậy cao. Theo Kashima kết quả nghiên cứu ADN chiết xuất từ
mô u nhú đông lạnh cho kết quả mẫu tốt hơn là mô cốđịnh trong parafin, xét nghiệm sớm thì cho kết quả chính xác hơn, 20% dương tính ở mẫu bệnh phẩm lưu 1 năm, 2% dương tính ở mẫu bệnh phẩm lưu 6 năm.
- Bảng 3.23 và 3.24 cho thấy tỷ lệ HPV (+) là 63% và khác biệt này có ý nghĩa thống kê (p<0,05), trong đó tỷ lệ dương tính ở u nhú thường chiếm 71,4%, dương tính ở UNĐN là 59,3%. Tỷ lệ HPV dương tính trong nghiên cứu của chúng tôi vẫn nằm trong giới hạn thống kê của thế giới nhưng ở mức cao, theo Lawson thống kê 11 nghiên cứu PCR sử dụng cặp mồi như của chúng tôi trong 349 bệnh nhân thì tỷ lệ dương tính ADN HPV là từ 2-67%, theo chúng tôi có sự khác biệt lớn giữa các tỷ lệ phát hiện HPV trong các nghiên cứu là do số lượng bệnh nhân nghiên cứu khác nhau và phân bổ loại tổn thương trong mỗi nghiên cứu cũng khác nhau [108, 119, 179].
Đối chiếu tỷ lệ HPV (+) theo loại u nhú của chúng tôi cũng tương tự như
các nghiên cứu trên thế giới là tỷ lệ HPV (+) ở u nhú thường cao hơn ở
UNĐN, Lawson và Schlecht tổng kết 14 nghiên cứu cho thấy tỷ lệ dương tính
Bảng 4.3 So sánh tỷ lệ phát hiện HPV theo phân loại MBH với các tác giả khác Tác giả Năm UNĐN U nhú thường Brandsma 1987 2/9 (22,2%) 3/4 (75,0%) McLachlin 1992 4/17 (23,5%) 3/5 (60%) Kashima 1992 7/29 (24,1%) 4/26 (15,4%) Tang 1994 0/26 (0%) 6/7 (85,7%) Ogura 1996 3/9 (33,3%) 2/3 (66,7%) Fischer 2005 4/6 (66,7%) 2/3 (66,7%) Katori 2006 21/29 (72,4%) 3/7 (42,9%)
Nguyễn Quang Trung 2012 19/32 (59,3%) 10/14 (71,4%) Số liệu các tác giả khác: theo Lawson [119]