9 11-18 Khang Dân Cây bình thường, lá biến vàng ựỏ 18/05 Bắc Giang 10 11-20 Nhị ưu 838 Cây lùn, lá biến vàng ựỏ 11/05 Hòa Bình
4.2.11.đánh giá về mẫu khô, mẫu tươi và mẫu nghiền, mẫu không nghiền
Trong chẩn ựoán ELISA virus vàng lụi, việc cố ựịnh mẫu thông thường mất rất nhiều thời gian như phải chuẩn bị chày, cối sứ; cân mẫu , nghiền mẫu, ựặc biệt là khi phải kiểm tra số lượng mẫu lớn trong thời gian ngắn. để khắc phục vấn ựề này, chúng tôi tiến hành khảo sát phương pháp cố ựịnh mẫu bằng cách không nghiền mẫu mà chỉ cắt nhỏ mẫu ựể cho vào bản ELISẠ
Cũng ựồng thời với việc khảo sát này, chúng tôi cũng tiến hành thử nghiệm so sánh sự khác biệt về mẫu khô, mẫu tươi trong phản ứng ELISẠ Kết quả thu ựược ở bảng 4.12.
Bảng 4.12. đánh giá về mẫu nghiền và mẫu không nghiền; mẫu khô và mẫu tươi
Mẫu OD sau 1 ựêm KL Bệnh 1 (tươi) 0.236 + Bệnh 2 (tươi) 0.304 + Bệnh 3 (tươi) 0.315 + Bệnh 1 (KN) 0.258 + Bệnh 2 (KN) 0.377 + Bệnh 3 (KN) 0.216 + Mẫu nghiền và
mẫu không nghiền
TB khỏe (SD) 0.167 (0.002) - Bệnh 1 (tươi) 0.265 + Bệnh 2 (tươi) 0.401 + Bệnh 3 (tươi) 0.311 + Bệnh 1 (khô) 0.217 + Bệnh 2 (khô) 0.215 + Bệnh 3 (khô) 0.302 + Mẫu tươi và mẫu
khô
TB khỏe (SD) 0.178 (0.004) -
Ghi chú: độ hòa loãng của KHT 1/200, ựộ hòa loãng của kháng thể chuột liên kết AP là 1/5000. OD của các mẫu cây khỏe là giá trị trung bình của 3 mẫụ KL là kết luận. (+): Phản ứng dương; (-): phản ứng âm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 47
Hình 4.13. Kiểm tra ELISA ựánh giá mẫu tươi, mẫu khô; mẫu nghiền, không nghiền
Nhận xét:
Với kết quả so sánh giữa mẫu không nghiền và mẫu nghiền trong chẩn ựoán virus RYSV thì mẫu không nghiền hoàn toàn có thể phân biệt ựược giữa cây bệnh và cây khỏe với giá trị OD cao nhất ở mẫu nghiền, mẫu bệnh không nghiền và mẫu khỏe tương ứng là 0.315; 0.377 và 0.167. Như vậy chúng ta có thể sử dụng mẫu không nghiền trong chuẩn ựoán bệnh.
đối với việc chẩn ựoán virus với mẫu khi ựể khô thì sự phân biệt giữa mẫu bệnh và mẫu khỏe hoàn toàn có thể ựược. Tuy nhiên, có sự khác nhau về giá trị OD của mẫu bệnh tươi (0.401) và mẫu bệnh khô (0.302), vì vậy chẩn ựoán bệnh khi mẫu còn tươi vẫn cho kết quả cao hơn.
Như vậy, ựể phát hiện virus trong phương pháp chẩn ựoán bệnh bằng ELISA chúng ta có thể tiến hành nghiền mẫu hoặc không nghiền và tốt nhất nên chọn mẫu tươi ựể kiểm trạ