- Chuẩn bị mẫu hạt bụng để phõn tớch HPLC: Hạt bụng của cỏc giống nghiờn cứu được tỏch loại vỏ, phần nhõn được nghiền thành bột đồng nhất bằng
3.1.3.2.Khảo sỏt thể tớch DEE và tỷ lệ acetic acid băng/DEE
Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phõn lập gossypol từ hạt bụng
3.1.3.2.Khảo sỏt thể tớch DEE và tỷ lệ acetic acid băng/DEE
Để nghiờn cứu cỏc yếu tố này, cao DEE được hoà tan lại trong một thể tớch nhất định DEE (3, 6 và 9 ml). Sau đú, acetic acid băng được thờm vào dung dịch với tỷ lệ acetic acid băng/DEE = 1/3 và 1/5. Kết quả được trỡnh bày ở bảng 3.2.
Theo đú, độ tinh khiết của sản phẩm G-AA khi kết tinh trong cỏc điều kiện khỏc nhau khỏc biệt khụng cú ý nghĩa (P>0,05). Điều này cho thấy độ tinh sạch của sản phẩm ớt chịu ảnh hưởng bởi thể tớch DEE và lượng acetic acid thờm vào. Trong khi đú, khối lượng gossypol tuyệt đối thu được lại dao động khỏ lớn (0,30-
cao DEE càng đặc, tương ứng với lượng dung mụi DEE sử dụng càng ớt. Khối lượng sản phẩm G-AA tuyệt đối thu được nhiều nhiều nhất (0,43 g và 0,42 g) khi lượng DEE được sử dụng là ớt nhất (3 ml) cho dự lượng acetic acid băng được thờm vào theo tỷ lệ tương ứng là 1/5 hay 1/3.
Bảng 3.2. Ảnh hưởng của thể tớch DEE và tỷ lệ acetic acid băng/DEE đến quỏ trỡnh kết tinh G-AA
AcOH băng/
DEE (v/v) Thụng số Thể tớch DEE
3 ml 6 ml 9 ml
1/5 Khối lượng G-AA thụ (g) 0,57±0,02 0,47±0,02 0,37±0,02
Độ tinh khiết (%) 76,1±1,6 78±2,0 79,2±2,3
Khối lượng G-AA thực (g) 0,43±0,02 0,37±0,02 0,30±0,02
1/3 Khối lượng G-AA thụ (g) 0,56 ±0,02 0,50±0,02 0,47±0,03
Độ tinh khiết (%) 75,5±1,5 78,3±1,5 78,3±1,5
Khối lượng G-AA thực (g) 0,42±0,01 0,39±0,02 0,37±0,02
Ghi chỳ: Cỏc giỏ trị được biểu thị dưới dạng: giỏ trị trung bỡnh ± sai số
Lượng acetic acid cũng tỏc động đến khối lượng sản phẩm G-AA kết tinh từ dung dịch theo xu hướng lượng sản phẩm thu được tăng lờn khi lượng acetic acid sử dụng nhiều hơn (1/3).Sự khỏc biệt này thể hiện rừ rệt nhất khi kết tinh trong dung dịch loóng (sử dụng 9 ml DEE, P<0,01), tỏc động này giảm dần khi kết tinh trong dung dịch đặc hơn (sử dụng 6 ml DEE, P<0,05). Tuy nhiờn, ở nồng độ cao nhất, khi thể tớch DEE sử dụng là 3 ml, thỡ tỷ lệ acetic acid/DEE là 1/5 hay 1/3 khụng làm thay đổi hiệu suất kết tinh G-AA (P>0,05).
Từ cỏc kết quả nờu trờn, chỳng tụi đó tỡm được kiện kết tinh G-AA từ cao chiết DEE với hiệu xuất cao như sau: cao chiết DEE từ 100 g bột hạt bụng (G. barbadense L., HD139) được hũa trong 3 ml DEE, thờm 0,6 ml acetic acid (tương ứng 1/5 thể tớch DEE) trong điều kiện nhiệt độ phũng và trỏnh ỏnh sỏng. Kết quả này rất cú ý nghĩa, đặc biệt là khi nõng quy trỡnh tinh chế gossypol lờn quy mụ lớn.