- Chuẩn bị mẫu hạt bụng để phõn tớch HPLC: Hạt bụng của cỏc giống nghiờn cứu được tỏch loại vỏ, phần nhõn được nghiền thành bột đồng nhất bằng
Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phõn lập gossypol từ hạt bụng
3.2.3.1. Đỏnh giỏ độ tinh khiết húa học của (-)-gossypol và (+)-gossypol
Độ tinh khiết của sản phẩm (-)-gossypol mà chỳng tụi đó phõn tỏch được đỏnh giỏ bằng phương phỏp HPLC. Do khụng cú chất chuẩn (±)-gossypol, (-)- gossypol và (+)-gossypol nờn bước đầu chỳng tụi đỏnh giỏ độ tinh khiết tương đối của cỏc sản phẩm thụng qua diện tớch pic trờn HPLC.
Kết quả phõn tớch trờn HPLC cho thấy ở bước súng 254 nm, sản phẩm (-)-gossypol cho một pic chớnh cú thời gian lưu là 7,95 phỳt (91% tổng diện tớch pic) và 2 pic phụ khỏc cú diện tớch rất nhỏ. Căn cứ thờm trờn phổ tử ngoại của chất ứng với pic này (trờn HPLC) cũng như thời gian lưu của sản phẩm (±)-gossypol (7,94 phỳt) trong cựng một điều kiện chạy mỏy, cú thể khẳng định pớc cú thời gian lưu 7,95 phỳt là tương ứng với sản phẩm (-)-gossypol và cú độ tinh khiết hoỏ học là trờn 91% tớnh theo phần trăm diện tớch pic đo ở bước súng 254 nm (Hỡnh 3.8, Phụ lục 13).
Hỡnh 3.8. Sắc ký đồ HPLC của (-)-gossypol. (-)-Gossypol cú thời gian lưu
t=7,92 phỳt, phần trăm diện tớch pic là S=79,2% (254 nm).
Sản phẩm (+)-gossypol được đem phõn tớch trờn HPLC, với cựng điều kiện như khi phõn tớch (±)-gosspol và (-)-gossypol. Kết quả phõn tớch trờn HPLC cho thấy sản phẩm này cho 5 pic trong đú cú 1 pic cú diện tớch lớn nhất chiếm 79,2% với thời gian lưu là 7,92 phỳt, trựng với thời gian lưu của (±)-gossypol (7,94 phỳt) và của (-)-gossypol (7,95 phỳt) (Hỡnh 3.9, Phụ lục 14). Kết hợp với dữ liệu phổ tử ngoại của chất ứng với pic này, chỳng tụi khẳng định đõy là (+)-gossypol. Cỏc pic cũn lại là tạp chất lẫn trong sản phẩm. Tuy độ tinh khiết của (+)-gossypol chỉ đạt 79,2% nhưng trong khuụn khổ của luận văn chỳng tụi khụng tiếp tục tinh chế (+)-gossypol cú độ tinh khiết cao hơn. Hiện nay đồng phõn (+)-gossypol cũng khụng phải là đối tượng được cỏc nhà nghiờn cứu quan tõm nhiều như đồng phõn (-)-gossypol.