Nguyên tắc: mẫu được vô cơ hoá bằng axít H2SO4 (d=1,84) đậm đặc với sự tham gia của chất xúc tác, muối amonium sunfat (NH4)2SO4 được tạo thành tác dụng với kiềm mạnh (NaOH) sẽ phóng thích ra NH3. Và qua dung dịch 0,25 N H3BO3 tự phân ly. Lượng BO2- được tạo thành tương đương lượng NH3 bị đẩy ra trong quá trình cất đạm và được định lượng bằng cách chuẩn độ ngược với HCl (0,25 N).
Cách tiến hành:
- Vô cơ hoá mẫu: cân 0,2 g mẫu đã nghiền mịn (chính xác đến 0,002 g) cho vào ống phá mẫu chuyên dụng, bổ sung 1 g chất xúc tác và hút 5 ml axít H2SO4 (d=1,85) đậm đặc, nối với bộ thu khí và bắt đầu phá mẫu trên bếp đun chuyên dụng của máy mẫu kết thúc, để ống phá mẫu nguội và thêm vào 50 ml nước cất, trộn đều và để nguội, lắp vào máy chưng cất.
- Chưng cất: lắp ống phá mẫu vào máy chưng cất Kjeldahl bán tự động Prolabo, bơm chính xác 80 ml NaOH 32%, dịch chưng cất tự động chuyển sang bình tam giác 250 ml có chứa sẵn 20 ml dịch axít boric 4% có chỉ thị màu. Quá trình chưng cất kết
thúc khi không còn NH3 (thử bằng giấy quỳ). Mẫu chưng cất được đem chuẩn độ bằng HCl 0,25N cho tới khi dung dịch xuất hiện màu phớt đỏ.
- Thông qua lượng HCl 0,25N chuẩn độ biết được lượng axít boric kết hợp với NH3 và do vậy xác định được lượng NH3 giải phóng từ mẫu. Cứ 1 ml HCl 0,25N tương ứng với 0,0035 g nitơ.
Tính kết quả: hàm lượng nitơ tổng số được tính bằng phần trăm (%) theo công thức sau:
%Nitơ tổng số =
Trong đó: VHCl: thể tích axít HCl 0,25N dùng để chuẩn độ, ml
g: lượng mẫu đem xác định, g