Trong đề tài này tơi khảo sát 3 yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh trưởng và phát triển của vi khuẩn Lactobacillus acidophilus: Cao nấm men, Triamonium hydrogen citrate, K2HPO4.
Kế hoạch hĩa thực nghiệm và đầy đủ các yếu tố 23 :
Bảng 3.2: Kế hoạch thực nghiệm và đầy đủ các yếu tố Mơi trường Z1 Z2 Z3 Z1Z2 Z1Z3 Z2Z3 yj 1 + + + + + + y1 2 - - + + - - y2 3 + - + - + - y3 4 - + + - - + y4 5 + + - + - - y5 6 - - - + + + y6 7 + - - - - + y7 8 - + - - + - y8 9 0 0 0 0 0 0 y9 10 0 0 0 0 0 0 y10 11 0 0 0 0 0 0 y11
Z1: Hàm lượng cao nấm men bổ sung vào mơi trường Z2: Hàm lượng Triamonium hydrogen citrate
Z3: Hàm lượng K2HPO4
Bảng 3.3: Các mức của ba yếu tố tối ưu
Các mức Các yếu tố ảnh hưởng
Z1, (%) Z2,(%) Z3, (%)
Mức cơ sở (0) 2.2 1 0.2
Mức dưới (-1) 1.2 0.7 0.1
Khoảng biến thiên (λ ) 1 0.3 0.1
Tween 0.1 0.1 0.1
Tiến hành: Tương ứng với kế hoạch chuẫn bị 11 mơi trường, từ mơi
trường thứ 1 đến 8 theo kế hoạch hĩa thực nghiệm ở mức trên (+) và mức dưới(-), từ 9 đến 11 là thực nghiệm ở mức cơ sở. Chuẩn bị mỗi mơi trừơng 30 ml, do hàm lượng Triamonium hydrogen citrate và K2HPO4 nhỏ, để đảm bảo nồng độ ta tiến hành pha dung dịch Triamonium hydrogen citrate với nồng độ 10g/ 20 ml và K2HPO4 với nồng độ 10g/100ml. Tiến hành pha mơi trường với các thành phần bảng 3.3, sau đĩ bổ dung dịch chiết nước dứa đủ 30 ml.
Bảng 3.4: Thành phần các mơi trường theo kế hoạch thực nghiệm
Mơi trường Z1(%) Z2(%) Z3(%) 1 3.2 1.3 0.3 2 1.2 0.7 0.3 3 3.2 0.7 0.3 4 1.2 1.3 0.3 5 3.2 1.3 0.1 6 1.2 0.7 0.1 7 3.2 0.7 0.1
8 1.2 1.3 0.1
9 2.2 1 0.2
10 2.2 1 0.2
11 2.2 1 0.2
Mơi trường được chỉnh pH 6.5 bằng NaOH 1N, mỗi mơi trường phối vào 3 ống nghiệm hấp khử trùng 1210C, 15 phút. L .acidophilus được nuơi cấy sau 18h, cấy giống với tỷ lệ giống 3%, nuơi trong điều kiện tĩnh ở nhiệt độ 370 C, sau 18h đo OD xác định số tế bào của mỗi mơi trường.
Tính tốn các hệ số hồi quy
bj = xjiyi Tính các hệ số hồi quy: b1, b2, b3, b12, b13, b23. N : số thực nghiệm, N = 8
Phương trình hồi quy mơ hình đầy đủ:
Y = b0 + b1x1 + b2x2 + b3x3+b12x12 + b13x13 + b23x23
Đánh giá ý nghĩa của các hệ số hồi quy: Để kiểm tra ý nghĩa của hệ số của phương trình hồi quy và sự tương thích của phương trình hồi quy với thức nghiệm ta phải tìm phương sai tái hiện S2th. Xác định phương sai tái hiện bằng cách lặp lại thí nghiệm ở tâm ( y10, y20, y30).
S2th = (yi0- )2/(n-1) : Giá trị trung bình thí nghiệm tại tâm
Sbj =
Yù nghĩa của các hệ số hồi quy được kiểm định theo tiêu chuẩn student: tj =
So sánh: tj và tp(f):
tj< tp(f): hệ số thứ j của phương trình hồi quy bị loại bỏ (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Phương trình hồi quy dạng tổng quát sau khi loại bỏ các hệ số khơng cĩ ý nghĩa: = b0 + b1x1 + b2x2 + b3x3+b12x12 + b13x13 + b23x23