Phân lập vi khuẩn sinh cellulase từ ruột mối

Một phần của tài liệu Nghiên cứu cellulase từ vi khuẩn ruột mối phân lập ở việt nam (Trang 40 - 41)

Quá trình làm giàu vi khuẩn sinh cellulase được thực hiện theo nghiên cứu của Sreena và cs., 2015 [25]. Lấy 1g mối sau khi thu nhận từ các thân cây gỗ mục, từ rơm, thân cây mía được rửa sạch, khử trùng bề mặt bằng ethanol 70% sau đĩ cắt bỏ đầu, giữ lại phần thân, sau đĩ cho vào ống nghiệm, nghiền nhỏ và thêm 5ml nước muối sinh lý vơ trùng. Sau khi trộn đều, hút 1ml dịch mối nghiền cho vào bình tam giác cĩ chứa mơi trường làm giàu (M1, M2, M3, M4 và M5 và đem nuơi lắc ở nhiệt độ phịng. sau 3 ngày đối với mơi trường CMC và 14 ngày đối với cơ chất giấy lọc. Quá trình hoạt hĩa kết thúc khi mơi trường bị đục hoặc cơ chất giấy lọc bị phân giải. Quá trình phân lập được tiến hành trên mơi trường rắn trên đĩa thạch (D5), pha lỗng mẫu mối đã được hoạt hĩa với hệ số pha lỗng từ 10-4 đến 10-7, hút 0,1ml cấy lên mơi trường rắn và chang đều, nuơi ở 30ºC trong 2-7 ngày cho đến khi thấy xuất hiện khuẩn lạc, quan sát hình thái khuẩn lạc, sau đĩ cấy vào mơi trường thạch nghiêng để xác định khả năng sinh cellulase và giữ giống [25]. Các chủng phân lập được, tiếp tục được cấy chấm điểm trên mơi trường rắn và thử với thuốc thử congo để xác định chủng cĩ khả năng tạo vịng thủy phân. Chủng cĩ khả năng phân giải CMC sẽ tạo ra xung quanh khuẩn lạc vịng thủy phân trong suốt.

Quá trình phân lập vi khuẩn sinh cellulase từ mơi trường làm giàu như mơ tả trên Hình 2.2.

Hình 2.2Các bước phân lập vi khuẩn sinh cellulase từ ruột mối [25]

Một phần của tài liệu Nghiên cứu cellulase từ vi khuẩn ruột mối phân lập ở việt nam (Trang 40 - 41)