J: R= OCH2CHOHCH2NHCH(CH 3)2 R'= CH2CH2OCH3R'
2.4.2. Phương phỏp nghiờn cứu độc tớnh bỏn trường diễn
2.4.2.1. Đối tượng nghiờn cứu:
a. Thuốc và cỏc hoỏ chất, mỏy múc phục vụ nghiờn cứu:
Thuốc nghiờn cứu:
Mẫu thuốc thử atenolol dạng bột màu trắng, đựng trong lọ thủy tinh nỳt kớn do GS.TSKH Đặng Như Tại bàn giao ngày 20/12/2009.
Atenolol được pha trong dung dịch carboxymethylcellulose 0,5% ( CMC 0,5%) thành cỏc nồng độ khỏc nhau để cho sỳc vật uống.
Mẫu thuốc thử metoprolol tartrat dạng bột màu trắng đựng trong lọ thủy tinh nỳt kớn do GS.TSKH Đặng Như Tại bàn giao ngày 25/11/2009
Hoỏ chất và mỏy múc dựng trong nghiờn cứu:
- Húa chất phục vụ nghiờn cứu:
+ Kit định lượng cỏc enzym và chất chuyển hoỏ trong mỏu : ALT (alanin aminotransferase), AST (aspartat aminotransferase), bilirubin toàn phần, protein, cholesterol và creatinin của hóng Hospitex Diagnostics (Italy) và hóng DIALAB GmbH (Áo).
+ Dung dịch xột nghiệm mỏu ABX Minidil LMG của hóng ABX –
Diagnostics.
+ Cỏc hoỏ chất xột nghiệm và làm tiờu bản mụ bệnh học. - Mỏy múc phục vụ nghiờn cứu:
+ Mỏy Screen master của hóng Hospitex Diagnostics (Italy).
+ Mỏy Vet abcTM Animal Blood Counter của hóng Ugo- Basile (Italy) b. Động vật thực nghiệm:
Thỏ chủng Newzealand White cả hai giống, khoẻ mạnh, lụng trắng, trọng lượng 1,8-2,5 kg do Trung tõm chăn nuụi Viện Kiểm nghiệm cung cấp.
Sỳc vật được nuụi trong phũng thớ nghiệm 3 - 5 ngày trước khi nghiờn cứu bằng thức ăn chuẩn dành riờng cho thỏ (do Cụng ty liờn doanh Guyomarc’h-VCN sản xuất), uống nước tự do.
2.4.2.2. Phương phỏp nghiờn cứu:
Thỏđược chia làm 3 lụ, mỗi lụ 10 con, mỗi con nhốt riờng một chuồng.
Với atenolol
- Lụ chứng: uống nước cất 3ml/kg/ngày
- Lụ trị 1: uống atenolol liều 6 mg/kg/ngày (liều cú tỏc dụng tương đương liều dự kiến trờn người, tớnh theo hệ số 3)
- Lụ trị 2: uống atenolol liều 18 mg/kg/ngày (gấp 3 lần lụ trị 1).
Với metoprolol tartrat
- Lụ trị 1: uống metoprolol tartrat liều 15mg/kg/ngày (liều cú tỏc dụng tương đương liều dự kiến trờn người, tớnh theo hệ số 3)
- Lụ trị 2: uống metoprolol tartrat liều 45mg/kg/ngày (gấp 3 lần lụ trị 1). Thỏđược uống nước hoặc thuốc thử trong 4 tuần liền, mỗi ngày một lần vào buổi sỏng.
Cỏc chỉ tiờu theo dừi trước và trong quỏ trỡnh nghiờn cứu:
- Tỡnh trạng chung, thể trọng của thỏ.
- Đỏnh giỏ chức phận tạo mỏu thụng qua số lượng hồng cầu, thể tớch trung bỡnh hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, số lượng bạch cầu, cụng thức bạch cầu và số lượng tiểu cầu.
- Đỏnh giỏ chức năng gan thụng qua định lượng một số enzym và chất chuyển hoỏ trong mỏu: ALT, AST, bilirubin toàn phần, protein và cholesterol. - Đỏnh giỏ chức năng thận thụng qua định lượng nồng độ creatinin huyết
thanh.
Cỏc thụng số theo dừi được kiểm tra vào trước lỳc uống thuốc thử, sau 2 tuần và 4 tuần uống thuốc thử.
- Mụ bệnh học:
Sau 4 tuần uống thuốc thử, thỏ được mổđể quan sỏt đại thể toàn bộ cỏc cơ quan.
Kiểm tra ngẫu nhiờn cấu trỳc vi thể gan, thận của 30% số thỏở mỗi lụ. Cỏc xột nghiệm vi thể được thực hiện tại Trung tõm nghiờn cứu và phỏt hiện sớm ung thư- Liờn hiệp cỏc hội khoa học và kỹ thuật Việt Nam (do PGS. TS. Lờ Đỡnh Roanh đọc kết quả vi thể).
2.4.2.3. Xử lý số liệu
Cỏc số liệu nghiờn cứu được xử lý thống kờ theo phương phỏp t-test Student và test “trước- sau”.
Số liệu được biểu diễn dưới dạng : X ± SD Sự khỏc biệt cú ý nghĩa khi p < 0,05.
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Qui trỡnh cụng nghệ tổng hợp atenolol