J: R= OCH2CHOHCH2NHCH(CH 3)2 R'= CH2CH2OCH3R'
2.4.1. Phương phỏp xỏc định độc tớnh cấp
2.4.1.1 Thuốc nghiờn cứu:
- Nghiờn cứu được tiến hành tại Bộ mụn dược lý / Đại học Y Hà Nội - Metoprolol tartrat dạng bột màu trắng đựng trong lọ thủy tinh nỳt kớn do đề tài bàn giao ngày 25/11/2009. Pha thuốc thử với nước cất thành cỏc nồng độ khỏc nhau để cho chuột uống.
- Atenolol dạng bột màu trắng đựng trong lọ thủy tinh nỳt kớn đề tài bàn giao ngày 20/12/2009. Vỡ bột atenolol khụng tan hoàn toàn trong nước nờn thuốc thửđược pha trong dung dịch carboxymethylcellulose 0,5% (CMC 0,5%) thành cỏc nồng độ khỏc nhau trước khi cho chuột uống.
2.4.1.2 Động vật thực nghiệm:
Chuột nhắt trắng chủng Swiss, khoẻ mạnh, cả 2 giống, trọng lượng 18- 22g do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp.
Chuột được nuụi trong phũng thớ nghiệm từ 3 ngày trước khi nghiờn cứu bằng thức ăn chuẩn do Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương sản xuất, uống nước tự do.
2.4.1.3. Phương phỏp nghiờn cứu
Xỏc định độc tớnh cấp và tớnh LD50 của metoprolol tartrat và atenolol trờn chuột nhắt trắng bằng đường uống theo phương phỏp Litchfield - Wilcoxon. Sau khi dũ liều, tiến hành nghiờn cứu tỡm liều tối đa của thuốc thử khụng gõy chết chuột và liều tối thiểu gõy chết 100 % chuột nghiờn cứu.
* Thửđộc tớnh cấp của metoprolol tartrat
Trước khi uống thuốc, cho chuột nhịn ăn qua đờm. Chuột được chia ngẫu nhiờn thành 12 lụ, mỗi lụ 10-20 con.
Cho chuột uống metoprolol tartrat theo liều tăng dần từ 375mg/kg đến 3000 mg/kg, với lượng thuốc uống hằng định 0,2 ml/ 10g cõn nặng chuột
* Thửđộc tớnh cấp của atenolol
Trước khi uống thuốc, cho chuột nhịn ăn qua đờm. Chuột được chia ngẫu nhiờn thành 8 lụ, mỗi lụ 10 con.
Cho chuột uống atenolol theo liều tăng dần từ 1,0g/kg đến 6,0 g/kg ( với lượng thuốc uống hằng định mỗi lần 0,2ml/10g cõn nặng, uống 3 lần/24 giờ, cỏc lần uống cỏch nhau 2 giờ).
Liều 6,0 g/kg là liều cao nhất cú thể cho chuột uống được (nồng độ và thể tớch tối đa cho phộp)
Theo dừi tỡnh trạng chung của chuột và số lượng chuột chết ở mỗi lụ trong 72 giờ sau khi uống thuốc thử (những chuột chết trong 2 giờ đầu đều
được mổ quan sỏt đại thể). Sau đú tiếp tục theo dừi tỡnh trạng chung của chuột đến hết ngày thứ 7 sau uống thuốc.
Tớnh LD50 theo phương phỏp Litchfield- Wilcoxon