3.4.1. Phương pháp hóa học
3.4.1.1. Phương pháp xác định hàm lượng nitơ tổng số
Nguyên tắc:
Khi đốt nóng sản phẩm đem phân tích với H2SO4 đậm đặc, các hợp chất hữu cơ bị oxi hóa. Carbon và hydro tạo thành CO2 và H2O. Còn nitơ sau khi được giải phóng ra dưới dạng NH3 kết hợp với H2SO4 tạo thành (NH4)2SO4 tan trong dung dịch. Đuổi NH3 khỏi dung dịch bằng NaOH, đồng thời cất và thu NH3 bằng một lượng dư H2SO4 0,1N còn lại bằng dung dịch NaOH 0,1N chuẩn, qua đó tính ddwwocj lượng nitơ có trong mẫu nguyên liệu thí nghiệm.
Tiến hành: xem chi tiết ở muc 3.1, phụ lục 3.
• Tính kết quả:
Hàm lượng nitơ toàn phần X1 tính bằng g/l theo công thức:
Trong đó:
V1: số ml dung dịch H2SO4 0,1N cho vào bình hứng. V2: số ml dung dịch NaOH 0,1N để chuẩn độ acid dư. V: dung tích bình định mức
v’: số ml mẫu pha loãng cho vào mấy cất đạm 0,0014: số gam nitơ tương ứng với 1ml NaOH 0,1N 1000: hệ số đổi ra g/l [9]
3.4.1.2. Xác định hàm lượng nitơ amoniac
Nguyên tắc:
Giải phóng NH3 ra khỏi dung dịch bằng NaOH. Dùng ding dịch H2SO4 dư để hấp thụ NH3, xác định lượng acid dư bằng dung dịch kiềm.
Tiến hành: xem chi tiết ở muc 3.2, phụ lục 3
• Tính kêt quả:
Hàm lượng NNH3 tính bằng g/l theo công thức:
Trong đó:
V1: số ml dung dịch H2SO4 0,1N cho vào bình hứng V2: số ml dung dịch NaOH 0,1N để chuẩn độ acid dư V: thể tích nước tương lấy để vô cơ
0,0014: số gam nitơ tương ứng với 1ml NaOH 0,1N 1000: hệ số đổi ra g/l [9]
3.4.1.3. Xác định hàm lượng acid amin
Nguyên tắc:
Các andehyd dễ kết hợp với nhóm amin. Khi cho formandehyd tác dụng với acid amin, nhóm amin bị methylen hóa tạo thành dẫn xuất methylen amino acid. Hợp chất tạo thành có tính acid mạnh hơn acid amin tự do, các nhóm cacboxyl của chúng dễ dàng định phân bằng kiềm, qua đó gián tiếp tính được lượng acid amin của các acid amin có trong dung dịch.
2((NH4)2SO4 + 6CH2O → (CH2)6N4 + 6H2O + 2H2SO4
Tiến hành: xem chi tiết ở muc 3.3, phụ lục 3
• Tính kết quả: Trong đó: a: thể tích NaOH 0,05N đã dùng để chuẩn độ, ml 29 2 9
0,0007: lượng nitơ ứng với 1ml NaOH, g V0: dung tích bình định mức, ml
V1: thể tích dug dịch lấy để chuẩn độ, ml V: thể tích nước tương lấy để định mức [9]
3.4.1.4. Xác định pH
Xác định pH của nước tương bằng máy đo pH.