2.1.Nguyên tắc phân tích tổng số nấm men – nấm mốc
Mật độ nấm men và nấm mốc được xác định dưới dạng tổng nấm men và nấm mốc bằng kỹ thuật pha lỗng, trải hộp và đếm khuẩn lạc trên mơi trường Dichloran 18% Glycerol Agar (DG18) hay Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Agar (DRBC)…. Mỗi một khuẩn lạc được phát triển từ một tế bào hay bào tử.
2.2.Dụng cụ, thiết bị, mơi trường, hĩa chất 2.2.1.Dụng cụ và thiết bị
Bảng 2.1. Dụng cụ và thiết bị chỉ tiêu 2
Dụng cụ Thiết bị
Ống nghiệm (∅18 mm) Tủ cấy vơ trùng
Đĩa petri (∅100 mm) Nồi hấp
Cốc thuỷ tinh (100 ml, 250 ml) Tủ ấm
Bình tam giác (250 ml) Máy dập mẫu (Stomacher)
Ống đong (100 ml) Máy trộn mẫu (vortex mixer)
Đầu tip Pipetman (1000, 5000 µl) Cân phân tích (4 số lẻ)
Que trải pH kế
Đèn cồn Pipetman (1000, 5000 µl)
Lị viba
2.2.2Mơi trường và hĩa chất
Bảng 2.2. Mơi trường và hĩa chất chỉ tiêu 2
Mơi trường Hĩa chất
Saline Pepton Water (SPW) Cồn 90o và 70o
DG18 HCl 10%
DRBC NaOH 10%
2.3.Thực hành
2.3.1.Quy trình phân tích
Sơ đồ quy trình định lượng tổng số nấm men - nấm mốc
2.3.2.Các bước thực hiện
Bước 1. Định lượng mẫu 10 g hay 10 ml bằng cân kỹ thuật độ chính xác 0,01 g
Bước 2. Đồng nhất mẫu bằng máy dập mẫu (mẫu dạng mềm) hay xay mẫu (mẫu dạng cứng, dai). Sau đĩ pha lỗng theo cấp 10-n.
Bước 3. Chọn độ pha lỗng phù hợp và hút 0,1 ml dịch VSV trải lên bề mặt thạch của đĩa petri. Mỗi nồng độ cấy 2 đĩa.
Bước 4. Ủ mẫu 30 oC từ 3 – 7 ngày.
Bước 5. Chọn đếm đĩa cĩ từ 25 – 250 khuẩn lạc.
2.3.3. Tính kết quả
Tương tự cách tính tổng số vi khuẩn hiếu khí. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
2.4. Câu hỏi thảo luận
1. Em cho biết ngoài môi trường DRBC, các môi trường nào khác được sử dụng để nuôi cấy tổng số nấm men, nấm mốc?
2 .Tại sao đa số các vi khuẩn không mọc được trong môi trường nuôi cấy DRBC?
Định lượng mẫu
10 g hoặc 10 ml
Đồng nhất và pha lỗng mẫu trong dung dịch SPW
Trải 0,1 ml dung dịch mẫu lên mơi trường DRBC
Đếm khuẩn lạc
Chọn đĩa cĩ 25 - 250 khuẩn lạc
Ủ mẫu