- Nhiệt độ khớ vào 55oC.
2.2.3.4. Cỏc phương phỏp đỏnh giỏ cỏc chỉ tiờu chất lượng của hạt và viờn glipizid 10 mg giải phúng kộo dà
Chỉ tiờu chất lượng của hạt glipizid GPKD:
Xỏc định độ trơn chảy: Tốc độ chảy của cốm đó trộn tỏ dƣợc trơn đo trờn mỏy đú ERWEKA GWF với đƣờng kớnh lỗ phễu 9mm. Tốc độ trơn chảy đƣợc tớnh theo cụng thức:
V= tg α Trong đú:
V: Tốc độ chảy (g/s)
α: Gúc giữa đƣờng thẳng biểu diễn sự phụ thuộc của khối lƣợng hạt chảy theo thời gian và trục hoành ( trục thời gian)
Xỏc định khối lượng riờng biểu kiến: Đo trờn mỏy ERWEKA SVM và tớnh kết quả theo quy định chung.
Xỏc định mất khối lượng do làm khụ:Thực hiện trờn cõn xỏc định độ ẩm nhanh PRESCISA XM 60.
Chỉ tiờu chất lượng của viờn nộn glipizid 10 mg GPKD:
Độ đồng đều khối lượng: Theo chỉ dẫn của DĐVN IV, phụ lục 11.3
Độ cứng: Đo độ cứng trờn mỏy đo độ cứng ERWEKA, tiến hành thử 20 viờn. Yờu cầu: độ cứng đạt 5-9 kP.
Định lượng glipizid trong viờn:
Phƣơng phỏp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)[31]:
Điều kiện sắc kư:
- Cột C18 (250 mm x 4,6mm; 5m). - Detector PDA: 223 nm, 275 nm. - Tốc độ ḍng: 1,0ml/phỳt.
36 - Thể tớch tiờm: 20l.
- Pha động: acetonitril – đệm phosphat 3,5 (điều chỉnh pH bằng acid phosphoric) 50:50.
Cỏch tiến hành:
- Dung dịch chuẩn: Pha dung dịch glipizid nồng độ 10àg/ml: cõn chớnh xỏc 100 mg glipizid cho vào b́nh định mức 100 ml, thờm khoảng 80ml methanol. Siờu õm khoảng 15 phỳt để hoà tan, thờm methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều. Hỳt 1 ml dung dịch này cho vào b́nh định mức 100ml, bổ sung pha động đến vạch, lắc đều.
- Dung dịch thử: nghiền nhỏ 20 viờn, cõn một lƣợng chớnh xỏc tƣơng ứng với 100 mg glipizid cho vào b́nh định mức 100 ml, thờm khoảng 80 ml methanol. Siờu õm khoảng 15 phỳt để hoà tan, thờm methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều. Lọc bỏ 2 ml dịch lọc đầu. Hỳt 1 ml dung dịch này cho vào b́nh định mức 100ml, bổ sung pha động đến vạch, lắc đều.
Từ diện tớch pic của cỏc dung dịch thử và dung dịch chuẩn, hàm lƣợng của chuẩn, tớnh ra hàm lƣợng glipizid trong viờn. Tớnh kết quả theo cụng thức sau:
Hàm lƣợng glipizid (%) =
Trong đú:
St: diện tớch pic của mẫu thử. Sc: diện tớch pic của mẫu chuẩn. Cc: nồng độ mẫu chuẩn.
V: thể tớch pha loăng.
: khối lƣợng trung bỡnh viờn. Phƣơng phỏp đo quang phổ hấp thụ
Cỏch tiến hành:
Pha cỏc dung dịch thử và dung dịch chuẩn nhƣ ở phƣơng phỏp định lƣợng bằng HPLC. Đo mẫu chuẩn và thử ở bƣớc súng 223nm. Tớnh toỏn kết quả dựa vào cụng thức sau:
Hàm lƣợng % glipizid trong viờn đƣợc tớnh theo cụng thức:
Hàm lƣợng glipizid so với hàm lƣợng ghi trờn nhón:
G’ = %G ì mtb
10
37
G’: Hàm lƣợng % glipizid trong viờn so với hàm lƣợng ghi trờn nhón. mt, mc: Lần lƣợt là khối lƣợng mẫu thử và mẫu chuẩn.
Dt, Dc: lần lƣợt là độ hấp thụ của mẫu thử và mẫu chuẩn. Độ hũa tan:
Tiến hành trờn mỏy thử hũa tan PHARMA TEST.
-Điều kiện thử hũa tan: Sử dụng mỏy cỏnh khuấy.
-Thể tớch mụi trƣờng: 900ml đệm phosphat pH 6,8.
-Tốc độ quay: 100±2 vũng/phỳt.
-Mẫu trắng: dung dịch đệm phosphat pH6,8
-Mẫu chuẩn: Dung dịch glipizid 10 àg/ml trong đệm phosphat pH 6,8.
-Thời gian lấy mẫu: Thời điểm lấy mẫu: 2h, 4h, 6h, 8h,10h, 12h, 16h, thể tớch lấy mẫu 5 ml.
Mẫu thu đƣợc đem đo quang phổ hấp thụ ở bƣớc súng 223 nm hoặc sử dụng phƣơng phỏp HPLC nhƣ trờn.
Nồng độ glipizid trong mẫu thử tại thời điểm bất kỳ đƣợc tớnh toỏn nhƣ sau: Đối với phƣơng phỏp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC, % glipizid giải phúng tại giờ thứ n là:
(%)HL glipizid =
Trong đú:
Sn: diện tớch pic của mẫu thứ n. Si: diện tớch pic của mẫu thứ i. Sc: diện tớch pic của mẫu chuẩn. Cc: nồng độ mẫu chuẩn.
Đối với phƣơng phỏp đo quang phổ hấp thụ UV-Vis, % glipizid giải phúng tại giờ thứ n là:
(%)HL glipizid =
Trong đú:
Dch: độ hấp thụ của mẫu chuẩn. Dn: độ hấp thụ của mẫu thứ n. Di: độ hấp thụ của mẫu thứ i. Cch: nồng độ mẫu chuẩn
38
Phương phỏp đỏnh giỏ sự tương đồng của hai đồ thị giải phúng dược chất
Đỏnh giỏ sự tƣơng đồng đƣờng cong hũa tan giữa viờn nộn nghiờn cứu và viờn đối chiếu: So sỏnh hai đồ thị giải phúng dƣợc chất in vitro bằng chỉ số f2. Chỉ số f2 thể hiện sự giống nhau giữa 2 đồ thị giải phúng dƣợc chất và đƣợc tớnh theo cụng thức sau:
Trong đú:
n: Số điểm lấy mẫu thử.
Ri, Ti: % dƣợc chất giải phúng tại thời điểm t của mẫu đối chiếu, mẫu thử.
Giỏ trị f2 = 50 đến 100 thỡ 2 đồ thị đƣợc coi là giống nhau. Nếu f2 = 100 hai đồ thị đƣợc coi là giống nhau hoàn toàn, nếu f2 = 50 thỡ 2 đồ thị cú sự sai khỏc trung bỡnh tại mỗi thời điểm là 10%.