- Hình thái vi thể thận:
b. Định tính alcaloid bằng phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoạ
3.3.3. XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ BẠCH PHỤ
Bạch phụ là sản phẩm được chế biến từ rễ củ con (Phụ tử) của cây Ô
đầu (Aconitum carmichaelii Debx.) họ Hoàng liên (Ranunculaceae) bằng cách ngâm với dung dịch muối MgCl2, đun sôi với dịch ngâm; gọt vỏ, thái phiến, ngâm rửa với nước, hấp hơi nước và sấy ở 60°C đến khô.
3.3.3.1. Mô tả: Phiến rộng ở phía trên, hẹp dần về phía dưới, dài từ 2-6cm, rộng 1-3 cm. Đã gọt sạch vỏ, mặt cắt có màu vàng sẫm, nhuận bóng, đục mờ. rộng 1-3 cm. Đã gọt sạch vỏ, mặt cắt có màu vàng sẫm, nhuận bóng, đục mờ. Thể chất cứng, chắc. Mùi thơm nhẹ, vị cay tê nhẹ.
3.3.3.2. Độ ẩm: Không quá 12%
3.3.3.3. Tỷ lệ vụn nát: Tỷ lệ qua rây có kích thước mắt rây 4mm: Không quá 5% 5%
3.3.3.4. Tro toàn phần: Không quá 6%
3.3.3.5. Tạp chất: Không quá 1%
3.3.3.6. Định tính:
* Mẫu nghiên cứu: Lấy khoảng 2 g bột Bạch phụ, cho vào bình nón dung tích 50 ml có nút mài, thấm ẩm bằng amoniac đặc. Sau 10 phút thêm 20 ml ether ethylic (TT), lắc đều, nút kín và để yên 30 phút, thỉnh thoảng lắc. Gạn lấy lớp ether, làm khan bằng natri sulfat khan, lọc, bốc hơi dịch lọc trên cách thuỷ tới khô được cắn. Hoà tan cắn thu được bằng 5 ml dung dịch H2S04
10%, cho vào 3 ống nghiệm. Định tính bằng TT Mayer, TT Bouchardat và TT
Dragendorff.
* Kết quảđịnh tính alcaloid bằng phản ứng hoá học cho thấy: các mẫu nghiên cứu đều cho phản ứng dương tính với 3 thuốc thử chung của alcaloid.
b. Định tính alcaloid bằng phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại
* Mẫu nghiên cứu:
Lấy khoảng 4 g bột thô Bạch phụ, thêm 30 ml ether và 5 ml dung dịch amoniac, lắc trong 20 phút, lọc. Dịch lọc cho vào bình gạn, thêm 20 ml dung dịch H2SO4 0,5 N lắc mạnh, để yên cho tách lớp, gạn lấy dịch acid. Lấy 1 ml dịch chiết acid pha loãng đến vừa đủ 10 ml; hoà tan aconitin chuẩn trong dung dịch H2SO4 0,5 N với nồng độ thích hợp. Quét phổ hấp thụ tử ngoại của các dung dịch chuẩn và thửở bước sóng từ 200 – 300 nm.
276.4230.6 230.6 200 250 300nm Bach phu 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 Abs Hình 3.32. Phổ UV của alcaloid trong Bạch phụ
Kết quảở Hình 3.32 cho thấy: Phổ tử ngoại của alcaloid Bạch phụ cho hấp thụ cực đại ở bước sóng 231 và 274 nm.
Căn cứ kết quả nghiên cứu, dược liệu phải cho phản ứng dương tính với thuốc thử chung của alcaloid và phổ hấp thụ tử ngoại của alcaloid có hấp thụ cực đại ở bước sóng 231 và 274 nm.
3.3.3.7. Giới hạn diester alcaloid:
Căn cứ kết quả nghiên cứu hàm lượng diester alcaloid trong Bạch phụ
0,033±0,003%, Dược liệu được quy định chứa không quá 0,15% diester
alcaloid tính theo aconitin.
3.3.3.8. Giới hạn aconitin:
Định lượng aconitin bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao. Sắc ký đồđịnh lượng aconitin trong Bạch phụđược nêu ở Hình 3.33
Hình 3.33. Sắc ký đồđịnh lượng aconitin trong Bạch phụ
Căn cứ kết quả nghiên cứu hàm lượng aconitin trong Bạch phụ
0,0013±0,0002, Dược liệu được quy định hàm lượng Aconitin không quá 0,01%.
3.3.3.9. Định lượng:
Căn cứ kết quả định lượng alcaloid toàn phần trong Bạch phụ
0,24±0,02%, dược liệu được quy định phải chứa ít nhất 0,2% alcaloid toàn phần tính theo aconitin (C34H47NO11) trên dược liệu khô kiệt.
3.3.3.10. Giới hạn nhiễm khuẩn: Đạt yêu cầu mức 4 - phụ lục 10.7, DĐVN III. III.