- Hình thái vi thể thận:
b. Định tính alcaloid bằng phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoạ
3.3.2.5. Tạp chất: Không quá 1%
3.3.2.6. Định tính:
* Mẫu nghiên cứu: Lấy khoảng 2 g bột Hắc phụ, cho vào bình nón dung tích 50 ml có nút mài, thấm ẩm bằng amoniac đặc. Sau 10 phút thêm 20 ml ether ethylic (TT), lắc đều, nút kín và để yên 30 phút, thỉnh thoảng lắc. Gạn lấy lớp ether, làm khan bằng natri sulfat khan, lọc, bốc hơi dịch lọc trên cách thuỷ tới khô được cắn. Hoà tan cắn thu được bằng 5 ml dung dịch H2S04
10%, cho vào 3 ống nghiệm. Định tính bằng TT Mayer, TT Bouchardat và TT
Dragendorff.
* Kết quảđịnh tính alcaloid bằng phản ứng hoá học cho thấy: các mẫu nghiên cứu đều cho phản ứng dương tính với 3 thuốc thử chung của alcaloid.
b. Định tính alcaloid bằng phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại
* Mẫu nghiên cứu:
Lấy khoảng 4 g bột thô Hắc phụ, thêm 30 ml ether và 5 ml dung dịch amoniac, lắc trong 20 phút, lọc. Dịch lọc cho vào bình gạn, thêm 20 ml dung
dịch H2SO4 0,5 N lắc mạnh, để yên cho tách lớp, gạn lấy dịch acid. Lấy 1 ml dịch chiết acid pha loãng đến vừa đủ 10 ml; hoà tan aconitin chuẩn trong dung dịch H2SO4 0,5 N với nồng độ thích hợp. Quét phổ hấp thụ tử ngoại của các dung dịch chuẩn và thửở bước sóng từ 200 – 300 nm.
Kết quả phổ tử ngoại của Hắc phụđược ghi ở Hình 3.30
275.2231 231
200 250 300nm
Hac phu phien
0.51.0 1.0 1.5 2.0 Abs Hình 3.30. Phổ UV của alcaloid trong Hắc phụ
Kết quả ở Hình 3.30 cho thấy: Phổ tử ngoại của alcaloid Hắc phụ cho hấp thụ cực đại ở bước sóng 231 và 274 nm.
Căn cứ kết quả nghiên cứu, dược liệu phải cho phản ứng dương tính với thuốc thử chung của alcaloid và phổ hấp thụ tử ngoại của alcaloid có hấp thụ cực đại ở bước sóng 231 và 274 nm.