II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
3.3.1.Nguyên liệu nghiên cứu:
a. Nguồn vi sinh vật
- Các vi khuẩn lactic và Bacillus phân lập từ các chế phẩm probiotic cho người có bán trên thị trường.
- Nấm men Saccharomyces cerevisiae (chủng SABG1, SABG2), các vi sinh vật kiểm ựịnh và ựối chứng: E.coli, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimuriumẦ từ nguồn giống của Bộ môn Công nghệ Vi sinh, Khoa Công nghệ sinh học, trường đại học Nông nghiệp Hà nội.
- Nấm mốc Aspergillus oryzae phân lập từ men rượu và mốc tương ở Hoài đức Ờ Hà Nội.
b. Môi trường nghiên cứu
Các môi trường sử dụng trong nghiên cứu gồm:
Môi trường MRS (de Man, Rogosa and Sharpe) lỏng (g/l):
đường kắnh 20,0 K2HPO4 2,0
Cao thịt 10,0 Triamoni xitrat 2,0
Pepton 10,0 MgSO4.7H2O 0,58
Cao nấm men 5,0 MnSO4.4H2O 0,28
Tween 80 1 giọt Nước 1000 ml
pH = 7,0; khử trùng ở 121oC/15 phút.
Môi trường thạch thêm 15,0 gam agar/lắt và 5.0 gam CaCO3 .
Môi trường LB (Luria-Bertani) (g/l):
Pepton 10,0 NaCl 10,0
Cao nấm men 5,0 Thạch 15
Nước tới 1000ml
Môi trường thử hoạt tắnh enzyme ngoại bào:
Thạch 0.7%
Tinh bột (CMC, Casein) 1% đệm phosphat pH 7 0.1M
Môi trường YPD (yeast peptone dextrose) (g/l):
Cao nấm men 10,0 đường 20,0
Pepton 20,0 Nước tới 1000ml
pH = 7; khử trùng ở 121oC/15 phút.
Môi trường Czapek- Dox (g/l):
NaNO3 2,0 FeSO4 0,01
K2HPO4 1,0 đường kắnh 30
MgSO4 .H2O 0,5 Thạch 15
KCl 0,5 Nước tới 1000ml
pH = 7; khử trùng ở 121oC/15 phút. Môi trường dịch thể bỏ thạch
Môi trường dịch chiết ựu ựủ: 1kg quả ựu ựủ chắn ựược xay nhuyễn, lọc lấy
dịch trong, hấp khử trùng, ly tâm bỏ bã thu dịch chiết.
Môi trường xốp: gạo lật nấu chắn, hấp vô trùng ở 121ỨC, 1.5 atm trong 20
phút.
Môi trường giá ựỗ (g/l):
Giá ựỗ 100,0 K2HPO4 1,0 đường kắnh 20,0 MgSO4.7H2O 0,5 Nước 1000ml
Chú ý: Giá ựỗ ựược rửa sạch, ựun sôi trong 30 phút, sau ựó lọc lấy dịch trong. Sau khi pha môi trường, chỉnh pH về 6,5 Ờ 7 và khử trùng ở 121oC/15 phút.