Các phương pháp phân tích thành phần hóa học

Một phần của tài liệu Nghiên cứu sử dụng kết hợp enzyme trong chiết tách và làm giàu một số sản phẩm nguồn gốc thiên nhiên (LA tiến sĩ) (Trang 61 - 62)

2.3.2.1.Phương pháp xác định thành phần tinh dầu bằng GC-MS

Thành phần hóa học của tinh dầu quế được xác định trên máy sắc ký khí Agilent HP mode 7890A gas chromatograph trang bị cột tách mao quản (60 m x 0.25 mm x 0.25 µm) Hewlett Packard HP5-MS (5% phenyl methyl siloxane), kết nối với máy đo phổ khối Agilent 5975C mass spectrometer. Các điều kiện phân tích sắc ký bao gồm: nhiệt độ injector và detector là 250oC; chương trình nhiệt độ từ 60 đến 240°C (tốc độ 4°C/phút); khí mang là He (lưu lượng 1.0 ml/phút); lượng mẫu đo là 1 µl; tỉ lệ chia dòng là 100:1. Máy đo phổ khối chạy ở chế độ EI-MS, năng lượng ion hóa là 70 eV. Các chất được nhận dạng bằng cách so sánh phổ khối lượng và chỉ số thời gian lưu của chúng với các dữ liệu có trong các ngân hàng dữ liệu GC-MS bao gồm NIST 08, Wiley 09 và HPCH1607. Phần mềm xử lý số liệu phổ Mass Finder 4.0.

Thành phần hóa học của tinh dầu trầm hương cũng được xác định trên máy sắc ký khí Agilent HP mode 7890A gas chromatograph tương tự như tinh dầu quế nhưng có sự khác biệt là trang bị cột tách mao quản (60 m x 0.25 mm x 0.25 µm) Hewlett Packard DB- XLB kết nối với máy đo phổ khối Agilent 5975C mass spectrometer và chương trình chạy sắc ký nhiệt độ từ 40oC (tăng 20o/phút), giữ ở 140oC (trong 5 phút), tiếp tục tăng lên 2700C (tốc độ 4°C/phút).

2.3.2.2.Phương pháp xác định thành phần axit béo

Mẫu được đo trên hệ thống thiết bị sắc ký khí và phổ ký liên hợp GC/MS của hãng Agilent Technologies HP 6890N trang bị cột mao quản DB‐ Wax (60 m × 0,25 mm, 0,25 µm) và DB‐ 23 (60 m × 0,25 mm, 0,25 µm). Agilent Technologies HP 6890N ghép nối với khối phổ Agilent 5973 Network Mass Selective Detector. Chạy theo chương trình nhiệt độ: 140oC/5 phút, 165oC/10 phút, sau đó tăng nhiệt độ lên 190oC (tốc độ 5oC/phút) và giữ ở 190oC/55 phút. Tăng nhiệt độ lên 280oC, nhiệt độ nguồn ion 210oC, khí mang He, tốc độ dòng 1,5ml/phút. Tỷ lệ chia dòng 30:1. Máy đo phổ khối chạy ở chế độ EI-MS, năng lượng ion hóa là 70 eV.

Các axit béo được nhận dạng bằng cách so sánh phổ khối lượng và chỉ số thời gian lưu của chúng với các dữ liệu có trong các ngân hàng dữ liệu GC-MS bao gồm NIST 08, FAME DB23.L Wiley 09 và HPCH1607. Phần mềm xử lý số liệu phổ Mass Finder 4.0.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu sử dụng kết hợp enzyme trong chiết tách và làm giàu một số sản phẩm nguồn gốc thiên nhiên (LA tiến sĩ) (Trang 61 - 62)