L ỜI CẢM ƠN
3.4.4.1 Đánh giá cảm quan về tr à
Trà phải khô, đồng đều về kích thước hạt, không có hiện tượng hút ẩm, không
bị mềm và biến màu.
3.3.4.2 Độ ẩm
Xác định nước trong các thuốc cốm nói chung hay trà an thần dạng cốm theo phương pháp Xác định mất khối lượng do làm khô. Có độ ẩm không quá 5,0%, trừ
các chỉ dẫn khác.
3.4.4.3 Định tính
Tiến hành định tính sản phẩm để định tính alkaloid.
3.3.4.4 Độ rã
Cho một lượng cốm đóng gói trong một đơn vị phân liều vào cốc chứa 200 ml nước ở 15 - 25oC, phải có nhiều bọt khí bay ra. Cốm được coi là rã hết nếu hoà tan hoặc phân tán hết trong nước. Thử với 6 liều, chế phẩm đạt yêu cầu phép thử nếu
Chương 3: Thực nghiệm
3.4.4.5 Kiểm tra độ nhiễm khuẩn
Sản phẩm được Công ty Cổ Phần Dược Phẩm Dược Hậu Giang kiểm tra về
56
CHƯƠNG 4
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1 Đánh giá chất lượng nguyên liệu, dược liệu 4.1.1 Xử lý mẫu sau khi thu hái
Tất cả những nguyên liệu sau khi được thu hái về, loại tạp, rửa sạch với nước
(giống như rửa rau), để ráo, sấy ở 800C, hoặc làm khô tự nhiên trong mát, thoáng gió sau 5 – 7 ngày đạt độ ẩm < 13%.
Về nguyên liệu ban đầu của mỗi dược liệu được lấy về như sau:
Bảng 4.1: Dược liệu ban đầu
Khối lượng Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
Khối lượng lá
ướt(kg) 6 5,7 5,9 5
Khối lượng lá
khô(kg) 1,0 1,8 1,4 1,5
Nhận xét: Với lượng mẫu lấy về trên có thể đủ cho các thí nghiệm trong bài.
4.1.2 Xác định độ ẩm
Sau khi tiến hành đo độ ẩm của dược liệu, mỗi dược liệu đo 1 lần với 4 cốc sứ cùng lúc, trong cùng điều kiện, sau đó lấy kết quả trung bình.
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Bảng 4.2: Độ ẩm của dược liệu
Đơn vị (%)
Lần Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
1 13,0 12,6 12,5 12,3
2 12,7 12,5 12,4 12,3
3 12,8 12,5 12,6 12,4
4 12,8 17,4 12,5 12,3
Trung bình 12,8 12,5 12,5 12,3
Nhận xét: Kết quả đạt được có thể nói đã phù hợp với tiêu chuẩn của Dược Điển IV Việt Nam (< 13%), với kết quả trên thì dược liệu có thể đem đi tiến hành
các bước tiếp theo trong thí nghiệm: một ít đem đi nấu để được cao dùng cho việc
phối trộn tạo sản phẩm sau này, một ít đem đi xay nhuyễn dùng để kiểm tra các tiêu chuẩn trong thí nghiệm tiếp theo.
4.1.3 Xác định tro toàn phần
Cũng với những cốc trên ta tiến hành xác định tro toàn phần cho từng loại dược liệu, sau khi dược liệu đã cho vào cốc bắt đầu nung ở nhiệt độ 600 25oC.
Bảng 4.3: Kết quả tro toàn phần Đơn vị (%)
Trinh nữ Vông nem Lá Sen Lạc tiên
6,3 7,7 4,5 1,8
Nhận xét: Mỗi loại dược liệu đều có một giá trị tro toàn phần riêng, nhưng với
kết quả đã tiến hành xác định trên thì tất cả 4 loại dược liệu đều đạt yêu cầu của Dược Điển IV Việt Nam (Vông nem < 8%, lá Sen < 5%, Lạc tiên < 2%, Trinh nữ do chưa có chuyện luận nào nói về điều này nhưng với kết quả trên có thể chấp nhận được).
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 58
4.1.4 Kết quả phân tích hoạt chất trong dược liệu
4.1.4.1 Định tính alkaloid
Trước tiên chúng tôi tiến hành định tính alkaloid, định tính alkaloid bằng 3
loại thuốc thử: Bouchardat cho tủa nâu, Mayer cho tủa vàng nâu, Dragendorffi cho tủa màu vàng cam. Ngoài ra còn có thể dùng FeCl3 để định tính alkaloid.
Hình 4.2: Định tính alkaloid trong lá Vông nem với 3 loại thuốc thử trên
Hình 4.3: Định tính alkaloid trong lá Sen với FeCl3
Hình 4.4: Định tính alkaloid trong cây Trinh nữ với mẫu chuẩn và thuốc thử
Nhận xét: Kết quả với các thuốc thử định tính alkaloid đều cho hiện tượng đạt
yêu cầu, vậy trong mỗi loại dược liệu đều có sự hiện diện của alkaloid rõ rệt.
Chương 4: Kết quả và thảo luận
4.1.4.2 Định tính saponin
Sau khi định tính alkaloid, saponin là bước định tính tiếp theo. Định tính
saponin chủ yếu ta xem mức độ bọt lên cao hay thấp khi đã được lắc mạnh để tạo
bọt.
Hình 4.5: Định tính Saponin trên cây Trinh nữ và lá Sen
Hình 4.6: Định tính saponin trong Vông nem và Lạc tiên
Nhận xét: Cũng giống như alkaloid, saponin cũng đã hiện diện trong dược liệu nhưng chỉ có Vông nem và Lạc tiên là có, trong khi đó Trinh nữ và lá Sen dường như sự hiện diện của saponin là không.
4.1.4.3 Định tính flavonoid
Flavonoid là cái tên được nhắc đến tiếp theo cho phần định tính dược liệu. Ta
chỉ cần cho H2SO4 đặc vào nếu có flavonoid thì sẽ xuất hiện màu vàng đậm đến
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 60 Hình 4.7: Định tính flavonoid cho 4 loại dược liệu
Nhận xét: Nhìn vào những hình ảnh trên ta cũng nhận thấy được rằng: Chỉ có
Lạc tiên là không có flavonoid, trong khi đó lá Sen, Trinh nữ và Vông nem đều có
sự hiện diện của flavonoid.
Sau khi đã định tính xong, chúng tôi đã lập ra một bảng tổng kết lại kết quả đạt được trong quá trình định tính dược liệu.
Bảng 4.4:Kết quả định tính dược liệu
Trinh nữ Vông nem Lá Sen Lạc tiên
Alcaloid ++ ++ ++ ++
Saponin – + – +
Flavonoid + + + –
Ghi chú: “+” dương tính, “ – “ âm tính
Nhận xét chung: Với kết quả đạt được có thể nói dược liệu đã đạt yêu cầu theo Dược Điển của Việt Nam. Hàm lượng alkaloid đều hiện diện trong mỗi dược liệu,
với cây Trinh nữ thì chưa có sách nào viết về điều này, với kết quả trên sẽ góp phần
cho việc xây dựng tiêu chuẩn cho cây Trinh nữ sau này, góp phần bổ sung thêm một
loại dược liệu nữa vào Dược Điển Việt Nam tạo sự phong phú và đa dạng hơn.
4.1.5 Định lượng alkaloid trong dược liệu
Trong phạm vi nghiên cứu này chỉ yêu cầu định lượng hàm lượng alkaloid
trong mỗi dược liệu, mỗi một dược liệu đều có một phương pháp và quy trình định lượng riêng biệt.
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Bảng 4.5: Kết quả định lượng alkaloid trong dược liệu
Đơn vị (%)
Trinh nữ Vông nem Lá Sen Lạc tiên
0,127 0,165 0,810 0,725
Nhận xét: Trong 4 loại dược liệu thì vông nem có hàm lượng alkaloid nhiều hơn trong chuyên luận Dược Điển, có thể do trong quá trình làm thí nghiệm có một
số sai sót nào đó mà chúng tôi chưa thể khắc phụ. Với những số liệu trên thì hoàn toàn hợp lý với chuyên luận được quy định theo Dược Điển Việt Nam. Như đã nói
ở trên thì cây Trinh nữ chưa có trong dược điển Việt Nam, với kết quả định lượng
trên cũng đã góp phần làm giàu thêm một chuyên luận và sẽ sớm đưa cây Trinh nữ vào Dược Điển Việt Nam.
4.1.6 Kiểm tra phân tích hàm lượng chì trong dược liệu
Sau khi tiến hành làm mẫu thử và mẫu dược liệu, tiến hành so màu như sau:
Hình 4.8: Kết quả so màu của cây Vông nem, lá Sen
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 62
Kết quả: Nhìn vào kết quả trên ta có thể thấy rằng: hàm lượng chì trong dược
liệu ít hơn vì so màu thấy màu ống chuẩn (10ppm) có màu đậm hơn. Với kết quả
này chỉ có thể so sánh chứ không thể nào biết được chính xác hàm lượng chì trong
dược liệu.
4.2 Điều chế cao dược liệu 4.2.1 Số lượng mỗi loại dược liệu
Tiếp theo ta tiến hành nấu cao, dược liệu phải được rửa sạch để loại bỏ một số
tạp chất. Quá trình chiết cao được chiết trong nước nóng, mỗi loại dược liệu được
chia ra làm 4 lần nấu, mỗi lần với một lượng dược liệu khác nhau.
Bảng 4.6: Số liệu sau mỗi lần chiết cao
Đơn vị: gram
Số thí nghiệm Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
Lần 1 250 250 250 250
Lần 2 250 400 350 350
Lần 3 250 500 400 450
Lần 4 250 650 400 450
Tổng cộng 1000 1800 1400 1500
Nhận xét: Với lượng dược liệu quá lớn nên chúng tôi đã chia ra làm nhiều lần
chiết để tiện cho việc khảo sát mọi yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết. Với nhiều dược liệu như thế nên chúng tôi mất rất nhiều thời gian cho công việc ban đầu.
4.2.2 Khảo sát thời gian nấu cao
Sau khi đã phân ra làm nhiều lần chiết, thời gian nấu rất quan trọng, nếu quá
ngắn thì chưa trích hết dược liệu và nếu kéo dài thời gian nấu thì sẽ làm cho dược
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Bảng 4.7: Khảo sát thời gian nấu cao
Thời gian Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
2h00’ 2h30’ 3h00’ 3h30’ 4h00’ 4h30’ Kết luận
Mức độ cao khi nấu:
: Còn nhiều
: Còn ít
: Hết
Nhận xét:Như đã nói ở trên thời gian nấu cực kì quan trọng, nó ảnh hưởng rất
lớn đến hàm lượng cao, sau khi khảo sát ở nhiều thời điểm khác nhau. Ta dễ nhận
thấy rằng với một thời gian khác nhau thì mức độ ta thu được dược liệu cũng khác
nhau, với thời gian ngắn thì ta không thu được nhiều cao và thời gian kéo dài hơn
thì trong cao dễ bị lẫn tạp chất. Vì thế chúng tôi chọn thời gian nấu là 4h để có được
cao tốt nhất và có tính kinh tế hơn khi đưa vào quy mô công nghiệp.
Sau khi khảo sát được một mốc thời gian hợp lý để chiết dược liệu, cao sau
khi chiết cần phải được lọc sạch và cô tiếp tục để tiện cho việc khảo sát cũng như
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 64 Bảng 4.8: Số liệu có được sau khi đã nấu cao và cô cao
Đơn vị: gram
Trinh nữ Vông nem Lá Sen Lạc tiên
Số thí nghiệm Dược liệu Cao Dược liệu Cao Dược liệu Cao Dược liệu Cao Lần 1 250 20,0 250 18,1 250 16,0 250 18,3 Lần 2 350 28,2 350 25,2 400 25,4 250 19,8 Lần 3 450 36,2 400 29,0 500 31,7 250 20,0 Lần 4 450 36,1 400 28,4 650 41,2 250 22,5 Tổng cộng 1500 120,5 1400 100,7 1800 114,3 1000 80,6
4.2.3 Độ ẩm cao dược liệu
Để biết khi nào cao đã đạt được yêu cầu thì ta tiến hành đo độ ẩm cao. Tiến hành đo độ ẩm cũng làm tương tự như xác định theo phương pháp trên.
Bảng 4.9: Độ ẩm cao dược liệu
Đơn vị: %
Số thí nghiệm Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
Lần 1 29,03 27,32 26,1 28,37
Lần 2 27,39 26,98 29,2 29,76
Lần 3 29,57 28,04 28,95 27,93
Lần 4 28,98 28.13 28,899 29,32
Kết luận 28,72 27,62 28,29 28,84
Nhận xét: Theo phụ lục 9.6 DĐVN IV thì độ ẩm cao không nhỏ hơn 30%. Với
kết luận như trên thì ta có thể thấy mọi cao đều đạt yêu cầutheo Dược Điển IV Việt
Chương 4: Kết quả và thảo luận
4.2.4 Kết quả thử nghiệm độ cồn
Sau khi ta nấu cao xong, công việc tiếp theo là tủa cao với cồn, nhưng cái khó ở đây là chúng ta phải tìm được một độ cồn tối ưu dược liệu. Sau nhiều thí nghiệm
nghiên cứu và cuối cùng chúng tôi đã đưa ra được một bảng số liệu như sau:
Bảng 4.10: Tìm lượng cồn tối ưu
Cồn (°) Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
99,5 +++++ +++++ +++++ +++++ 96 +++++ +++++ +++++ +++++ 90 ++++ +++++ ++++ ++++ 80 +++ ++++ ++++ ++++ 75 ++ +++ +++ +++ 70 ++ ++ ++ ++ 60 + ++ + + 50 + + + + Mức độ tủa: +++++: Rất nhiều ++++: Nhiều +++: Ít ++: Hết +: Tốt
Nhận xét: Với kết quả trên thì cồn 70o được coi là lượng cồn tủa tối ưu nhất
cho 4 loại dược liệu: Vông nem, lá Sen, Trinh nữ và Lạc tiên.
4.2.5 Kết quả phân tích hoạt chất trong cao dược liệu
Sau khi nấu cao xong ta tiến hành định tính hoạt chất trong cây.
4.2.5.1 Định tính alkaloid
Tiến hành định tính alkaloid trong cao dược liệu cho 4 cây: Vông nem, Trinh
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 66 tiếp theo, cho vào ống nghiệm. Kết quả khi cho vào từng ống nghiệm các loại thuốc
thử dùng để định tính alkaloid.
Hình 4.10: Định tính alkaloid cao Vông nem và lá Sen
Hình 4.11: Định tính alkaloid cao Lạc tiên và Trinh nữ
Nhận xét: Ban đầu ta đã định tính và đã biết được trong mỗi loại cây đều có
alkaloid.
4.2.5.2 Định tính saponin
Saponin cũng được định tính bằng phương pháp đo cột bọt. Hòa tan ít cao
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Hình 4.12: Định tính Saponin trên cao cây Trinh nữ và lá Sen
Hình 4.13: Định tính saponin trong cao Vông nem và Lạc tiên
Nhận xét: Cuối cùng thì kết quả cũng tương tự như định tính dược liệu: Cây
Trinh nữ, lá Sen không có saponin, còn Vông nem và Lạc tiên có saponin.
4.2.5.3 Định tính flavonoid
Cũng như định tính alkaloid và saponin, flavonoid cũng tiến hành định tính.
Lấy một ít cao sau đó hòa tan với nước, tiến hành định tính. Kết quả là cao dược
liệu đều có flavonoid.
Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3 Mẫu 4
Hình 4.14: Định tính flavonoid cho 4 loại cao dược liệu
Nhận xét chung: Sau khi tiến hành định tính cao dược liệu, tất cả kết quả thu được cũng giống như khi định tính dược liệu khô. Có thể kết luận rằng khi dược
Chương 4: Kết quả và thảo luận
Võ Văn Quốc 68
4.2.6 Định lượng alkaloid trong cao dược liệu
Tiến hành định lượng hàm lượng alkaloid toàn phần trong cao dược liệu. Vẫn
tiến hành giống như định lượng alkaloid toàn phần trong dược liệu, chỉ khác ở chỗ
là trong phần này dùng cao sau khi nấu để tiến hành định lượng. Kết quả như sau:
Bảng 4.11: Định lượng alkaloid cho cao dược liệu
Trinh nữ Vông nem Lá Sen Lạc tiên
0,092 0,120 0,586 0,512
Nhận xét: Kết quả trên cho thấy alkaloid trong cao dược liệu sẽ ít hơn trong dược liệu do quá trình chiết không kiệt.
4.3 Nghiên cứu, điều chế trà an thần 4.3.1 Công thức cho một đơn trà an thần
Theo sách “Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam – GS.TS Đỗ Tất Lợi” thì mỗi cây dược liệu sẽ tùy thuộc vào đơn thuốc khác nhau. Vì thế với tác dụng an
thần như sau:
Bảng 4.12 Công thức cho một đơn thuốc với một dược liệu dưới dạng dược liệu khô
Lạc tiên Lá Sen Vông nem Trinh nữ
Khối lượng 6 – 16g 15 – 20g 2 – 4g 6 – 12g
Kết luận 14g 15g 3g 10g
Kết luận: Vì đây là nghiên cứu nhằm đưa ra thị trường một sản phẩm mới có
tác dụng an thần, nên mọi thứ đều phải tuân thủ theo sách của Giáo Sư – Tiến Sĩ Đỗ Tất Lợi. Cuối cùng chúng tôi đã chọn một công thức nghiêng về mức độ an toàn
hơn là giống với đơn thuốc đã đưa ra, với đơn thuốc đã được đưa ra trên thì vẫn có
tác dụng an thần. Nhưng với công thức trên chỉ áp dụng đơn thuốc cho một cây dược liệu, với sản phẩm trà an thần là hỗn hợp của 4 loại dược liệu trên thì hàm
lượng mỗi loại dược liệu sẽ giảm đi ¼ số liệu ban đầu.
Sau khi đã tham khảo tài liệu để tìm ra một toa thuốc ứng với từng loại dược
liệu trên cho từng cây, do mỗi cây ứng với dược liệu khô dùng để sắc uống, nhưng
trong phần luận văn này chúng tôi đã nấu ra thành cao để tiện cho việc phối trộn sau
này. Vì thế sau khi nấu cao xong chúng tôi tiến hành tính toán thêm vài bước nữa để