L ỜI CẢM ƠN
3.4.1.5 Định lượng alkaloid trong dược liệu
Với từng loại dược liệu đều có nguyên tắc chiết và kỹ thuật chiết khác nhau, trên cơ sở chiết với cloroform sau đó cho bốc hơi rồi cân.
Mỗi một dược liệu sẽ có một cách định lượng riêng, cụ thể như sau:
Cây trinh nữ
Sau khi tham khảo sách “Bài giảng Dược liệu” và “Luận văn Thạc Sĩ của
Nguyễn Minh Thư”, cuối cùng chúng tôi đã tìm ra cách để định lượng alkaloid trong
cây trinh nữ vì cây trinh nữ chưa nằm trong Dược Điển của Việt Nam nên phương pháp định lượng của nó cũng rất khó.
Thuyết minh quy trình
Cân chính xác 10g bột dược liệu cho vào bình nón 250ml, thêm 100ml ethanol
90°, đun hồi lưu cách thủy trong 30 phút. Lọc qua bông. Làm lại như trên vài lần cho đến khi kiệt alkaloid[1]. Gộp toàn bộ dịch chiết, bốc hơi dung môi đến cắn. Hòa tan cắn với dung dịch acid hydrochloric 1% (3 lần, mỗi lần 10ml). Lọc dịch acid
này vào bình gạn, rửa bông với một ít dung dịch acid hydrochloric 1%. Kiềm hóa
dịch acid này bằng ammoniac đặc đến pH = 10. Sau đó, chiết lại bằng cloroform 5
lần, mỗi lần 10ml. Gộp toàn bộ dịch chiết cloroform, làm khan bằng natri sulfat
khan, lọc vào chén cân khô đã cân bì trước. Bay hơi đến cắn, sấy ở 100°C đến khối lượng không đổi và đem cân.
Chương 3: Thực nghiệm
Quy trình
Hình 3.5: Sơ đồ định lượng alkaloid trong cây Trinh nữ
Kết quả: Sau khi tiến hành định lượng alkaloid trong cây Trinh nữ được 0,12% hàm lượng alkaloid toàn phần. Do cây trinh nữ chưa có tiêu chuẩn dược liệu
chung nên khó biết được hàm lượng alkaloid như thế có đạt yêu cầu không.
Vông nem (lá)
Cây vông nem đã có quy trình định lượng alkaloid trong “Dược Điển Việt
Nam” cũng như “Bài giảng dược liệu” của Phạm Thanh Kỳ nên chúng tôi đã dựa theo đó mà tiến hành định lượng alkaloid.
Thuyết minh quy trình
Cân chính xác 10g bột dược liệu cho vào bình nón 250ml, thêm 100ml ethanol
90°, đun hồi lưu cách thủy trong 30 phút. Lọc qua bông. Làm lại như trên vài lần cho đến khi kiệt alkaloid[1]. Gộp toàn bộ dịch chiết, bốc hơi dung môi đến cắn. Hòa tan cắn với dung dịch acid sulfuric 2% (3 lần, mỗi lần 10ml). Lọc dịch acid này vào bình gạn, rửa bông với một ít dung dịch acid sulfuric 2%. Kiềm hóa dịch acid này
Chương 3: Thực nghiệm
Võ Văn Quốc 38 bằng ammoniac đặc đến pH = 10. Sau đó, chiết lại bằng cloroform 5 lần, mỗi lần
10ml. Gộp toàn bộ dịch chiết cloroform, làm khan bằng natri sulfat khan, lọc vào
chén cân khô đã cân bì trước. Bay hơi đến cắn, sấy ở 100°C đến khối lượng không đổi và đem cân.
Quy trình
Hình 3.6: Sơ đồ định lượng alkaloid trong lá Vông nem
Kết quả: Trong tài liệu tham khảo thì hàm lượng alkaloid toàn phần khoảng 0,15%, nhưng kết quả sau khi định lượng là 0,165% alkaloid toàn phần.
Chương 3: Thực nghiệm
Lá Sen
Cây sen là một trong những cây có công dụng an thần rất tốt, nên có nhiều
nghiên cứu về nó.
Thuyết minh quy trình[1], [8], [9]
Cân chính xác khoảng 2g bột dược liệu đã sấy khô, thấm ẩm bằng amoniac
đậm đặc (TT), để 1 giờ, sau đó cho vào túi làm bằng giấy lọc, đặt vào bình Soxhlet, chiết bằng ethanol 96% (TT) cho đến kiệt alkaloid. Cất thu hồi dung môi, hòa tan cắn trong dung dịch acid hydrocloric 5% (TT) 5 lần, mỗi lần 5ml. Lọc, rửa dịch lọc
acid bằng ether dầu hỏa (TT) 3 lần, mỗi lần 10ml. Kiềm hóa dịch chiết acid bằng
amoniac đậm đặc (TT) đến pH = 10, sau đó lắc với cloroform (TT) 5 lần, mỗi lần 10
ml. Gộp dịch chiết cloroform, rửa dịch cloroform bằng nước cất đến pH trung tính,
rồi bốc hơi dung môi tới khô. Hòa tan cắn với một lượng chính xác 10 ml acid
hydrocloric 0,1N (CĐ). Thêm 5ml nước cất và 2 giọt methyl đỏ (TT). Chuẩn độ
dung dịch acid hydrocloric 0,1N (CĐ) thừa bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (CĐ).
Hàm lượng alkaloid toàn phần (X) trong lá Sen tính bằng phần trăm theo công
thức: a 2,95 n) - (10 X%
n: Số ml dung dịch natri hydroxyd 0,1N (CĐ) đã dùng. a: Khối lượng bột dược liệu đem định lượng đã trừ độ ẩm.
Dược liệu phải chứa ít nhất 0,80% alkaloid toàn phần tính theo nuciferin
(C19H21O2N).
Kết quả: Đúng như kết quả trong Dược Điển IV Việt Nam, 0,810% là kết quả sau khi định lượng alkaloid toàn phần trong lá Sen.
Chương 3: Thực nghiệm
Võ Văn Quốc 40
Quy trình
Hình 3.7: Sơ đồ định lượng alkaloid trong lá Sen
Lạc tiên
Lạc tiên vẫn chưa có nghiên cứu nào về định lượng cả, sau khi tham khảo
nhiều sách, tài liệu. Cuối cùng chúng tôi tìm ra được một quy trình có thể định lượng.
Thuyết minh quy trình[1], [8], [9]
Cân chính xác 15g bột dược liệu khô kiệt, cho vào bình nón 250ml có nút mài, thẩm ẩm đều bằng amoniac đặc (5ml). Thêm vào 150ml cloroform. Lắc mạnh để
yên qua đêm. Lọc, lấy 100ml dịch lọc tương ứng với 10g bột dược liệu, chiết 4 lần,
mỗi lần 10ml H2SO4 10%. Gộp chung các dung dịch acid , kiềm hóa bằng amoniac đặc trong điều kiện lạnh đến pH = 10. Chiết alkaloid bằng cloroform 4 lần, (3 lần đầu tiên mỗi lần 15ml, lần thứ 4 bằng 10ml). Loại nước trong dung dịch cloroform
Chương 3: Thực nghiệm
bằng Na2SO4 khan. Cho dịch chiết vào một bình đã cân bì. Bốc hơi dung môi cho đến khô. Cho vào bình hút ẩm với silicagel đến khối lượng không đổi, sau đó cân.
Theo Dược điển Việt Nam IV quy định dược liệu là lá phải chứa ít nhất 0,7%
alkaloid toàn phần.
Quy trình
Hình 3.8: Sơ đồ định lượng alkaloid trong cây Lạc tiên
Kết quả: Định lượng Lạc tiên là 0,725% alkaloid toàn phần.