phản ứng multiplex pcr

... 12 2.4. Kỹ thuật PCR 14 2.4.1. Khái niệm 14 2.4.2. Nguyên tắc 14 2.4.3. Các thành phần cần thiết của phản ứng PCR 15 2.4.4. Phân tích kết quả PCR 16 2.4.5 Multiplex – PCR 16 2.4.6. Ứng dụng 16 3. ... Danh pháp các thành viên trong họ Stx 6 Bảng 3.1. Trình tự các đoạn mồi sử dụng trong phản ứng multiplex – PCR 22 Bảng 4.1. Kết quả phát hiện gen độc lực của E. coli trong từng nhóm khuẩn lạc ... khảo sát 32 x ĐÀM THỊ MINH THƠ, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, tháng 9/2005. ỨNG DỤNG KĨ THUẬT MULTIPLEX – PCR ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ GEN ĐỘC LỰC CỦA NHÓM E. COLI SẢN SINH ĐỘC TỐ SHIGA (STEC)...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:23

... Chamberlain năm 1988 và kể từ đó multiplex – PCR được ứng dụng rất nhiều trong các lĩnh vực kiểm tra DNA (Protocol online). 2.2.2. Các giai đoạn của phản ứng PCR Phản ứng PCR là một chuỗi gồm nhiều ... và 2 x : Số bản sao của chuỗi mã hóa * Số chu kỳ của phản ứng PCR - Trong thực tế, không vượt quá 40 chu kỳ trong 1 phản ứng, vì phản ứng PCR diễn ra qua hai giai đoạn: + Giai đoạn đầu, số lượng ... lập được bằng multiplex - PCR - Việc phát hiện các gen độc lực của E. coli được thực hiện bằng 2 phản ứng multiplex – PCR với máy luân nhiệt (thermal cycler):  Multiplex – PCR1 : Phát hiện...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:23

... vitro, không cần sự hiện diện của tế bào. 2.4.2. Nguyên tắc Phản ứng PCR được thực hiện trên cơ sở phản ứng sinh tổng hợp DNA, là phản ứng gồm nhiều chu kì nối tiếp nhau. Mỗi chu kì gồm 3 bước: Bước ... R GCGAAAACTGTGGAATTGGG TGATGCTCCATCACTTCCTG 252 (Feng và Monday, 2000) (2) Các thành phần của phản ứng PCR: (Feng và Monday, 2000) Mỗi phản ứng là 25 µl, gồm các thành phần sau: PCR buffer 1,1X; MgCl 2 3mM; mỗi dNTP 200 µM; mỗi loại ... phân bò, heo và bề mặt thịt bò. - Li trích DNA của E. coli phân lập được. - Thực hiện phản ứng multiplex – PCR để phát hiện các gen eae, ehxA, stx1, stx2 và uid của E. coli. 3.3. Phương pháp...

Ngày tải lên: 31/10/2012, 09:07

... thuật PCR 11 2.2.1. Nguyên tắc 11 2.2.2. Các giai đoạn của phản ứng PCR 12 2.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR 14 2.2.4. Phân tích kết quả PCR 15 2.2.5. Những ứng dụng của PCR 15 2.2.5.1. PCR ... PCR 13 Hình 2.2. Chu kỳ nhiệt độ của phản ứng PCR 14 Hình 3.1. Kết quả điện di sản phẩm multiplex - PCR1 26 Hình 3.2. Kết quả điện di sản phẩm multiplex - PCR2 26 SƠ ĐỒ Sơ đồ 3.1. Phân lập, xác ... Nutrient agar PCR : Polymerase chain reaction SMAC : Sorbitol MacConkey agar ST : Heat stable toxin viii DANH SÁCH CÁC HÌNH, SƠ ĐỒ, BIỂU ĐỒ HÌNH TRANG Hình 2.1. Nguyên lý của phản ứng PCR 13 Hình...

Ngày tải lên: 15/11/2012, 09:28

... phẩm DNA ly trích 40 3.6.1 Qui trình phản ứng PCR 40 3.6.2 Điện di sản phẩm PCR 42 Phần 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 4.1 Quá trình ly trích 44 4.2 Phản ứng PCR 44 Phần 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ... thuật PCR, hàng triệu đoạn DNA đặc hiệu và đồng nhất sẽ đƣợc thu nhận từ DNA mẫu. Hình 2.3:Nguyên tắc cơ bản của phản ứng PCR 2.4.2 Thành phần và vai trò của các chất trong phản ứng PCR  ... đại, là kỹ thuật kết hợp giữa RFLP và PCR. AFLP sử dụng enzyme cắt giới hạn cắt DNA bộ gene, sử dụng những phân đoạn DNA làm khuôn cho phản ứng khuếch đại PCR. AFLP có thể dùng để phân biệt các...

Ngày tải lên: 02/11/2012, 17:14

... phản ứng PCR DNA mẫu Phản ứng PCR tối ƣu xảy ra khi đoạn DNA khuôn mẫu không đƣợc quá dài, 3.4.4 Thực hiện phản ứng s -PCR 22 3.4.5 Tối ƣu hóa phản ứng m -PCR 24 3.4.5.1 Thực hiện phản ... mẫu dò. - Ứng dụng trong khuếch đại DNA, RNA. - Ứng dụng để phân tích đa dạng di truyền. - Ứng dụng trong chẩn đoán bệnh. 2.4.6 Nguyên tắc multiplex PCR Multiplex PCR là phản ứng PCR cho phép ... 130 0 C/15’. (2) Thực hiện phản ứng single PCR (s -PCR) đối với DNA từ ba loại thịt tƣơi (heo, bò, cừu) để làm cơ sở cho phản ứng multiplex PCR (m -PCR) . (3) Tối ƣu hóa quy trình m -PCR để xác định loại...

Ngày tải lên: 23/04/2013, 15:11

... của PCR hai giai đoạn đó là hai phản ứng PCR xảy ra liền nhau, phản ứng thứ nhất của PCR phát sinh ra sợi khuôn mẫu tương ứng với gen tổng hợp và sau đó nó được khuếch đại trong phản ứng PCR ... DNA. Hình 3.2. Sơ đồ phản ứng chuỗi polymerase Hình 3.3. Các chu kỳ của kỹ thuật PCR Có ba kỹ thuật PCR thông dụng: PCR chuẩn, PCR mỏ neo và PCR đảo ngược. Trong PCR chuẩn (standard PCR) , DNA khuôn ... sản phẩm PCR xấp xỉ gấp đôi trong mỗi chu kỳ. Tuy nhiên, khi phản ứng diễn ra thành phần phản ứng sẽ bị tiêu hao, cuối cùng làm cho một hoặc nhiều thành phần bị hạn chế. Ở điểm này phản ứng chậm...

Ngày tải lên: 19/08/2013, 08:58

Ngày tải lên: 28/08/2013, 09:48

Ngày tải lên: 03/09/2013, 09:59

... tiêu) cần khuếch đại số lượng lớn DNA 10 Tìm ki m trình t sinh h cế ự ọ Thành phần trong phản ứng PCR Phản ứng PCR được thực hiện khi có:  DNA mẫu  Primers (mồi xuôi và ngược dài khoảng 18-30 ... tương đồng của của các primer Gi i thi u môn h cớ ệ ọ 42 Nguyên tắc trong phản ứng PCR Gi i thi u môn h cớ ệ ọ 8 Phản ứng PCR gồm có 3 giai đoạn: • Biến tính DNA mẫu T=94 0 C • Bắt cặp mồi Tm ... Salmonella enterica bằng phương pháp PCR. Hãy kiểm tra lại bằng blast và kiểm tra khả năng hình thành dimer, hairpin… Gi i thi u môn h cớ ệ ọ 47 Kết quả phản ứng của Tm của mồi xuôi Gi i thi u...

Ngày tải lên: 20/10/2013, 03:15

... Hình 7.3. Hình ảnh điện di sản phẩm PCR (Đinh Duy Kháng, 2002) 1.2. Phản ứng RT -PCR (PCR ngược) 1.2.1. Nguyên lí Thực chất của RT -PCR là phản ứng nhân một trình tự từ khuôn ARN, gồm ... nước, dung dịch đệm, 1.5. Các lĩnh vực ứng dụng của phản ứng PCR Phản ứng chuỗi trùng hợp PCR, từ khi được Kary Mullis đề xuất hoàn thiện, đã có những ứng dụng hết sức rộng rãi trong nhiều ... lại 65% sau 50 chu kì phản ứng. Nồng độ enzyme Taq tối ưu cho phản ứng PCR là 0,5-2,5 đơn vị, nhưng nếu nồng độ enzyme quá cao sẽ làm giảm hiệu suất xúc tác của phản ứng. Ngoài ra, nồng độ...

Ngày tải lên: 23/10/2013, 16:20

Ngày tải lên: 10/12/2013, 16:02

... tƣơi), 1,9 (thịt xử lý nhiệt)- tinh sạch, đạt tiêu chuẩn. 2) Sau khi tiến hành tối ƣu hóa phản ứng multiplex PCR bằng việc thử nghiệm nhiều quy trình (gồm quy trình của Matsunaga và ctv (1998) và ... chúng tôi tiến hành thiết lập quy trình phân biệt ba loại thịt heo, bò, cừu bằng phƣơng pháp multiplex PCR. Kết quả đạt đƣợc nhƣ sau: 1) Tách chiết DNA từ thịt tƣơi và thịt đã xử lý nhiệt ở nhiệt ... THỊ THANH HUYỀN, thực hiện khóa luận “Phân biệt ba loại thịt heo, bò cừu bằng phƣơng pháp multiplex PCR . Hƣớng dẫn khoa học: PGS. TS. Nguyễn Ngọc Tuân KS. Lƣơng Quý Phƣơng Thời gian thực...

Ngày tải lên: 25/02/2014, 12:20

... 210b n thành ẫu đối chứng dương chuẩn phân lập từ lợn bệnh. o ờ Phản ứng PCR dương tính với mồi VT1 Phản ứng PCR dương tính với mồi VT2 Hình 1. Phản ứng PCR với mồi VT1 và VT2 ... gen mã hóa yếu tố độc lực là verotoxin, đã thiết lập được phản ứng PCR đ E.coli Trong các điều kiện bước đầu, phương pháp PCR được ứng dụng trong giám định E.coli gây 5. TÀI LIỆU THAM KHẢO ... S 2: 134-138 I HC NễNG NGHIP H NI THIếT LậP PHảN ứNG PCR ứNG DụNG TRONG GIáM ĐịNH VI KHUẩN E.COLI GÂY DUNG HUYếT PHù ĐầU ở LợN CON A study on PCR application for identifying hemorrhagic E.coli...

Ngày tải lên: 11/03/2014, 18:20

Ngày tải lên: 12/03/2014, 06:20

Ngày tải lên: 03/04/2014, 13:20

Ngày tải lên: 12/04/2014, 12:00