... E. colixácđịnhtínhchấtenzyme Mục tiêu đề tài: BiểugenTrehalasetáitổhợp E. coli Tách tinh chế enzymeXácđịnh đặc tínhenzyme Ứng dụng enzyme để tổng hợp Trehalose Khoa Công Nghệ Sinh ... Mở Vì vậy, việc nghiêncứu sản xuất enzymeTrehalase ý nghĩa khoa học mà có giá trị kinh tế xã hội Từ lý thực đề tàinghiêncứu sau: NghiêncứubiểugenTrehalasetáitổhợp E. colixácđịnhtính ... Disaccharide thủy phân vào phân tử glucose enzymeTrehalase Có loại Trehalase tìm thấy Saccharomyces cerevisiae (nấm men), Trehalase trung tính (NT )và Trehalase axit (AT) phân loại dựa vào độ pH...
... (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Fementas (Mỹ) Sigma (Mỹ) Eco RI Hind III Fementas ... nghiêncứu 2.4.1 Sơ đồ nghiêncứu Lên men: (xác định điều kiện lên men chủng táitổ hợp: IPGT, pH, t0C) Tách tinh protein táitổhợp Đánh giá tính kháng nguyên Protein táitổhợpgen RoTAT 1.2 Xây ... protein táitổhợp E. coli Có nhiều chủng vi khuẩn E. coli sử dụng biểugen chủng E. coli BL21 chủng E. coli ưa chuộng sử dụng rộng rãi để biểu loại gen khác 35 Tuy nhiên có hạn chế sau: Cácgen mã hóa...
... biểu protein táitổhợpEcoli Có nhiều chủng vi khuẩn Ecoli sử dụng biểugen chủng Ecoli BL21 chủng Ecoli ưa chuộng sử dụng rộng rãi để biểu loại gen khác Tuy nhiên có hạn chế sau: Cácgen ... ADN – polymerase Fementas (Mỹ) Pfu turbo ADN polymerase Fementas (Mỹ) Peptone Fementas (Mỹ) Yeast Extract Fementas (Mỹ) Nacl, NaOH, MgSo4, MgCl2, glycerol, CaCl2 Fementas (Mỹ) Agar Fementas (Mỹ) ... khuẩn táitổhợpgen ROTAT 1.2 Lên men: (xác định điều kiện lên men chủng táitổ hợp: IPGT, pH, t0C) Tách tinh protein táitổhợp Đánh giá tính kháng nguyên Protein táitổhợpgen RoTAT 1.2 Xây...
... vào vector • Biến nạp DNA plasmid vào tế bào E. coli • Cắt DNA enzyme giới hạn • Xácđịnh trình tự gen máy giải trình tự gen tự động • Biểugen tế bào E. colitáitổhợp • Tinh protein táitổhợp ... Western Blot 2+ KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Thiết kế vector biểu pET32a(+) mang gen gp120B Khuếch đại gen gp120B_EX cặp mồi biểu ĐC1: Thang DNA chuẩn 1kb ĐC2: sản phẩm PCR Tạo vector táitổhợp pET32a(+) ... (đoạn gen gp120B_EX) Tinh DNA plasmid ĐC1-3: Tương ứng với dòng plasmid táitổhợp số 4, 10, 12 Gen gp120B_EX vector biểu pET32a(+) giải trình tự Kiểm tra khung đọc gen gp120B vector pET32a(+) Biểu...
... 2.3.9 Xácđịnh trình tự gen máy giải trình tự gen tự động Theo Frederick Sanger, nguyên tắc phương pháp Dideoxy dựa vào hoạt động enzyme DNA polymerase trình tổng hợp DNA Enzyme DNA polymerase xúc ... Sequencer (Applied Biosystems-Mỹ) với kit xácđịnh trình tự BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing (Applied Biosystems) Quy trình tiến hành theo phụ lục 2.3.10 Biểugen tế bào E. colitáitổ ... Polyvinylidene difluoride RNA Ribonuclecin Acid SDS Sodium dodecyl sulphat SDS-PAGE Sodium dodecyl sulphat-Polyacrylamide gel electrophoresis TAE Tris-Acetate-EDTA Taq Thermus aquaticus TBS Tris Buffered...
... hưởng tới vùng liên kết với LF [21] V Biểugen pagA Hệ thống biểu 1.1 Vector biểu Vector biểugen (expression vector) vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen ... khiển biểugen gây độc vi khuẩn B anthracis Người ta xácđịnh có hai nhân tố điều hoà dịch mã biểugen atxA acpA Gen acpA nằm plasmind pXO2 hoạt hoá biểugen capB (mét gen mã hoá vỏ capsule) Gen ... Đưa gen vào vector biểu biến nạp vào tế bào Ecoli DH5α 31 Lê Thu Trang 04-04 Khóa luận tốt nghiệp Bước 8: Tách plasmid từ thể biến nạp Ecoli kiểm tra gen đặc biệt chiều gen vector biểu Gen...
... plasmid táitổhợp 55 3.4.3.3 Kiểm tra khung đọc vector táitổhợp pET-TRX-FUS-pagA 57 3.4.3.4 Biến nạp plasmid táitổhợp pET-TRX-pagA vào Ecoli BL21 (DE3) 58 3.4.4 Nghiêncứubiểugen pagA Ecoli ... biến nạp Ecoli kiểm tra gen đặc biệt chiều gen vector biểuGen cần biểu phải nằm chiều promoter Bước 9: Biến nạp vector biểu có mang gen vào tế bào chủ Ecoli tiến hành biểu Sau tiến hành biểu thành ... IV ảnh hưởng tới vùng liên kết với LF [21] 1.5 Biểugen pagA 1.5.1 Vector biểu Vector biểugen (expression vector) vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen tách...
... Principle of Protein-Dye Binding Anal Biochem 72:248-254 [4] Towbin, H et al (1979) Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications ... mang loại bỏ hiệu khỏi protein táitổhợp nồng độ vecter táitổhợp cảm ứng IPTG imidazol 50 mM Sau protein táitổhợp đẩy khỏi cột nhờ buffer đẩy (Native Elution Buffer), thu phân đoạn, phân đoạn ... A: phản ứng protein táitổhợp với huyết dương tính, B: phản ứng p24 táitổhợp với huyết âm tính ĐC M: Protein chuẩn; ĐC 1, 3: Protein táitổhợp p24; ĐC 2, 4: Protein Thioredoxin 376 Tuyển...
... hưởng tới vùng liên kết với LF [21] V Biểugen pagA Hệ thống biểu 1.1 Vector biểu Vector biểugen (expression vector) vector tách dòng mang promoter mạnh, cho phép biểu đồng thời gen thị gen ... khiển biểugen gây độc vi khuẩn B anthracis Người ta xácđịnh có hai nhân tố điều hoà dịch mã biểugen atxA acpA Gen acpA nằm plasmind pXO2 hoạt hoá biểugen capB (mét gen mã hoá vỏ capsule) Gen ... Đưa gen vào vector biểu biến nạp vào tế bào Ecoli DH5α 31 Lê Thu Trang 04-04 Khóa luận tốt nghiệp Bước 8: Tách plasmid từ thể biến nạp Ecoli kiểm tra gen đặc biệt chiều gen vector biểu Gen...
... Nhóm gen deoxysugar tham gia sinh tổng hợp dihydrochalcomycin Cơ chế: Enzyme gerF (dTDP-4-keto-6-deoxyglucose 3-epimerase) với tương tác enzyme gerK1(dTDP-4-keto-6-deoxyglucose reductase) tạo ... gen dự đoán tham gia sinh tổng hợp đường D-mycinose trình tổng hợp kháng sinh dihydrochalcomycin gồm gen là: gerD, gerE, gerF, gerK, gerM2, gerM3 (hình 4)[20] Trong gerF gen mã hóa cho enzyme ... chức gen gerF sinh tổng hợp gốc đường khử dTDP- mycinose thành phần quan trọng cấu trúc kháng sinh dihydrochalcomycin 1.7 Enzyme giới hạn Enzyme giới hạn( Restriction enzyme, RE) enzyme Endonuclease...
... 3,5–epimerase mã hóa NovW Bước trình sinh tổng hợp Noviose trình methyl hóa C5 enzyme 5–methyltransferase mã hóa NovU, khử C4 cacbonyl cacbon thể enzyme 4–ketoreductase mã hóa NovS enzyme O–methyltransterase ... Streptomyces roseochromogenes sub sp., Streptomyces caeruleus Trong cosmid (9–6G) cung cấp, gen NovU có độ dài 1.2 kb Theo dự đoán đường sinh tổng hợp đường Noviose gen NovU có chức C–Methyltransferase, ... tài: "Nghiên cứubiểugen NovU tham gia sinh tổng hợp đuờng khử dTDP–L–Noviose thuộc nhóm gen sinh tổng hợp kháng sinh Novobiocin" Mục tiêu đề tài kiểm tra vector táitổhợp có chứa gen NovU nghiên...
... Buffered Minimal Glycerol Yeast BMMY Buffered Minimal Methanol Yeast bp Base pair dNTP 2’- deoxyribonucleotide 5’ – triphosphate EDTA Ethylene diamine tetra acetic acid ETBr Ethidium bromide Ecoli ... Y proteinase 16 B Đột biến gen pep4 làm giảm hoạt tính proteinase A carboxypeptidase Y giảm mạnh hoạt tính proteinase B Gen prb1 mã hóa proteinase B Đột biến gen prb1 hoạt tính proteinase B bị ... nucleotide 713-6853 1.3.3.4 Tích hợpgen ngoại lai vào hệ gen P pastoris Cách đơn giản để vector biểu đƣợc tích hợp vào hệ gen P pastoris mở vòng vector biểuenzyme hạn chế vị trí đƣợc thiết kế sẵn gen...