Nghiên cứu tác dụng của các chế phẩm từ hạt keo giậu ( leucaena leucocephala ) đến khả năng trị bệnh giun ký sinh trong ruột các loài cá nước ngọt

B GIO DC V O TO TRNG I HC VINH ảnh hớng của mật độ nuôi tới tỉ lệ sống và sự sinh trởng của tôm sú (Penaeus monodon) trong ao nuôi thơng phẩm tại huyện kiên lơng tỉnh kiên giang KHểA LUN TT NGHIP K S NUễI TRNG THY SN Ngi thc hin: Phựng Anh V Ngi hng dn: Nguyn ỡnh Vinh Vinh - 1/2009 1 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành bản báo cáo khóa luận tốt nghiệp này ngoài sự nỗ lực của bản thân tôi đã nhận được sự giúp đỡ, hướng dẫn nhiệt tình, chu đáo cũng như đã nhận được rất nhiều những lời khuyên bổ ích từ các thầy cô giáo. Qua đây tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc của mình tới Ban chủ nhiệm khoa, các thầy cô giáo trong Khoa Nông Lâm Ngư - Trường Đại học Vinh, Khoa Thủy Sản - Trường Đại học Nông Lâm Huế. Đặc biệt cho tôi gửi lời cảm ơn chân thành nhất tới Phó giáo sư, Tiến sỹ Ngưyễn Kim Đường - Giảng viên Khoa Nông Lâm Ngư - Trường Đại học Vinh. Thạc sỹ Nguyễn Ngọc Phước - Trưởng bộ môn Ngư y, phó trưởng Khoa thủy sản, giảng viên Trường Đại học Nông Lâm Huế. Cuối cùng tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn vô hạn của mình đối với gia đình, bạn bè và người thân đã luôn bên cạnh động viên, giúp tôi hoàn thành tốt kỳ thực tập cuối khóa này. Tôi xin chân thành cảm ơn! Vinh, tháng 10 năm 2008 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thùy MỤC LỤC 2 Trang LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC .ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT .v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH .vii MỞ ĐẦU 1 Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Đặc điểm về đối tượng nghiên cứu 3 1.1.1. Giun đầu móc (Acanthocephala) .3 1.1.2. Cây Keo giậu (Leucaena leucocephala) 5 1.2. Tình hình dịch bệnh ký sinh trùng trên các đối tượng thủy sản nước ngọt. .6 1.2.1. Tình hình nghiên cứu về giun sán .6 1.2.2. Tình hình dịch bệnh do giun sán trên các loài cá nước ngọt ở Việt Nam 8 1.3. Giới thiệu một số loài thảo dược sử dụng để điều trị bệnh giun sán 11 1.3.1. Cây Dầu giun (Chenopodium amprosioides L.) .11 1.3.2. Cây Bách bộ (Stemona tuberosa Lour.) . .12 1.3.3. Cây Xoan (Melia azedarach L.) .12 1.3.4. Cây Thùn mũn (Embelia ribes Burn. 13 1.3.5. Hạt Bí ngô (Cucurbita pepo L.) .13 1.3.6. Cây Chân bầu (Combretun quadrangulare Kurz) 13 3 1.3.7. Cây Thạch lựu (Punica granatum L.) .14 1.3.8. Cây Cau (Areca catechu L.) .14 1.3.9. Cây Sử quân tử (Quisqualisindica L.) 15 1.4. Giới thiệu về các loại dược liệu và dung môi điều chế dịch chiết 15 1.4.1. Dược liệu .15 1.4.2. Dung môi .15 1.5. Giới thiệu về chế phẩm Bokashi 18 1.5.1. Bokashi kỵ khí .19 1.5.2. Bokashi háo khí .19 1.5.3. Bokashi keo . .20 1.6. Liều lượng gây độc (LD 50 ) .20 Chương 2. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1. Đối tượng nghiên cứu .22 2.2. Vật liệu nghiên cứu 22 2.3. Nội dung nghiên cứu 22 2.4. Phương pháp nghiên cứu 22 2.4.1. Phương pháp thu mẫu 22 2.4.2. Phương pháp xử lí mẫu .22 2.4.3. Phương pháp sản xuất Bokashi keo .23 2.5. Phương pháp thử nghiệm tác dụng của Bokashi keo lên giun 24 4 2.5.1. Phương pháp sàng lọc nồng độ ức chế hoạt động của giun từ dịch chiết hạt keo giậu và Bokashi keo 24 2.5.2. Phương pháp thử nghiệm nồng độ tiêu diệt giun của dịch chiết hạt keo và Bokashi keo 25 2.6. Phương pháp thử tính độc của dịch chiết hạt keo và Bokashi keo lên cá .25 2.7. Phương pháp xử lý số liệu 26 2.7.1. Tính cường độ và tỷ lệ cảm nhiễm 26 2.7.2. Xác định LD 50 26 2.7.3. Xử lý số liệu 27 2.8. Địa điểm và thời gian nghiên cứu 27 2.8.1.Địa điểm nghiên cứu 27 2.8.2. Thời gian nghiên cứu .27 Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1. Kết quả xác định cơ quan cảm nhiễm giun trên các loài cá nước ngọt 31 3.2 Kết quả thử nghiệm tác dụng của dịch chiết hạt keo với các loại dung môi. 32 3.3. Kết quả sàng lọc nồng độ diệt giun của dịch chiết hạt keo và Bokashi keo .33 3.4. Kết quả thử nghiệm nồng độ tiêu diệt giun của dịch chiết hạt keo và Bokashi hạt keo 36 3.5. Kết quả thử nghiệm độc lực của dịch chiết hạt keo và Bokashi hạt keo lên các loài cá nước ngọt 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .42 TÀI LIỆU THAM KHẢO .43 5 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT NTTS: Nuôi trồng thủy sản EM: Vi sinh vật hữu hiệu - Effective microorganisms. DLM: Liều ít nhất có thể gây chết - Dosis lethalis minima. LD 50 : Liều gây chết 50% số động vật thí nghiệm - Mean lethal dose. ID 50 : Liều gây nhiễm 50% - Mean infective dose. MIC: Nồng độ ức chế tối thiểu - Minimal inhibitoring concentration MPC: Nồng độ tiêu diệt tối thiểu - Minimal parasitidal concentration. 6 DANH MỤC CÁC BẢNG Số bảng Tên bảng Trang 3.1 Vị trí ký sinh, cường độ cảm nhiễm và tỷ lệ cảm nhiễm giun 31 3.2 Kết quả thử nghiệm tác dụng của dịch chiết hạt keo với các dung môi 33 3.3 Kết quả sàng lọc nồng độ giai đoạn 1 34 3.4 Kết quả sàng lọc nồng độ giai đoạn 2 35 3.5 Kết quả xác định nồng độ gây chết của dịch chiết hạt keo và Bokashi hạt keo 36 3.6 Nồng độ ức chế và tiêu diệt tối thiểu của dịch chiết hạt keo và Bokashi hạt keo 37 3.7 Kết quả thí nghiệm độ độc lực của Bokashi hạt keo lên cá 39 3.8 Kết quả thử nghiệm độ độc lực của dịch chiết hạt keo lên cá 40 7 DANH MỤC HÌNH Số hình Tên hình Trang 2.1 Quy trình sản xuất Bokashi và dịch chiết hạt keo 28 2.2 Thí nghiệm thử nghiệm tác dụng của Dịch chiết và Bokashi hạt keo 29 2.3 Thí nghiệm thử nghiệm độ độc của dịch chiết và Bokashi hạt keo 30 MỞ ĐẦU Thủy sản là một trong những thế mạnh của Việt Nam. Năm 2003, ngành thuỷ sản Việt Nam đã đạt được tổng sản lượng khoảng 2,53 triệu tấn, trong đó thủy sản nuôi trồng là 1,11 triệu tấn, góp phần đưa kim ngạch xuất khẩu của ngành đạt hơn 2,24 tỷ USD và tỷ trọng giá trị thủy sản trong nông nghiệp chiếm 21,3% (tăng 4,80% so với năm 2002). Các số liệu này cho thấy ngành thủy sản ngày càng đóng vai trò quan trọng trong nền kinh tế quốc dân và là một trong những lĩnh vực đang được chính phủ đầu tư phát triển [9]. Hiện nay, nghề nuôi cá nước ngọt phát triển rộng khắp cả nước, không chỉ ở các tỉnh đồng bằng, ven biển mà ở cả các tỉnh miền núi, nhằm mục tiêu kinh tế vừa xuất khẩu vừa cải thiện nguồn cung cấp thực phẩm cho dân cư trong nước [10].Trong đó, nuôi cá ao hồ, lồng bè là nghề truyền thống đã có từ lâu ở nước ta. Do lợi nhuận từ nghề cá mang lại khá cao nên trong những năm gần đây số lượng ao, bè nuôi tăng lên một cách đáng kể và trở thành nguồn thu nhập chính của nhiều hộ gia đình. Các loài cá nuôi nước ngọt như: cá Tra, cá Ba sa, cá Rô phi, cá Điêu hồng, cá Lóc, . . . đã trở thành những đối 8 tượng nuôi chính [11]. Tuy nhiên, do phát triển một cách tự phát và với xu thế thâm canh hóa trong nghề nuôi thủy sản hiện nay thì dịch bệnh xảy ra trong quá trình nuôi là điều khó tránh khỏi và nó cũng đã gây ra nhiều tổn thất cho người nuôi [9]. Một trong những bệnh thường gặp ở các loài cá nuôi nước ngọt là bệnh giun ký sinh trong ruột cá. Bệnh không gây thành dịch lớn, không làm chết cá hàng loạt nhưng ảnh hưởng đến sức tăng trưởng của cá và là tác nhân mở đường cho vi khuẩn, vi rút tấn công, phát triển và gây bệnh cho cá, gây ra thiệt hại lớn về kinh tế [12]. Hiện nay việc sử dụng thuốc trong điều trị bệnh do ký sinh trùng ở cá còn nhiều hạn chế và việc sử dụng hoá chất và thuốc thú y thủy sản trong một số trường hợp có thể gây nên những hiệu ứng phụ ảnh hưởng trực tiếp đến động vật thủy sinh, kể cả các đối tượng nuôi, quần thể sống trong môi trường tự nhiên và cả con người [13]. Để khắc phục tình trạng lệ thuộc vào việc dùng hoá chất trong phòng trị bệnh cho cá nuôi, thời gian qua nhiều nơi đã sử dụng một số loài thảo dược để điều trị bệnh trên cá và bước đầu đã có kết quả [14]. Theo nhiều người thì ý tưởng dùng thuốc nam trị bệnh cho cá bắt nguồn từ những bài thuốc dân gian có tác dụng trên con người và vật nuôi, cải biến cho phù hợp với môi trường thủy sản [15]. Keo giậu là một loại thảo dược được dân gian dùng để trị bệnh giun sán cho con người, trong những năm gần đây nó cũng được sử dụng để trị bệnh giun sán cho cá và bước đầu đã có những kết quả khả quan. Tuy nhiên đa số chỉ mới dừng lại theo kinh nghiệm, theo tập quán, mà chưa hiểu được các thành phần, hoạt chất của thảo dược cũng như chưa xác định được liều lượng và phương pháp dùng hợp lý [15]. Trên cơ sở thành công trong nghiên cứu tác dụng của lá trầu trong việc điều trị bệnh do vi khuẩn và nấm xảy ra trên cá tôm (Nguyễn Ngọc Phước và cộng tác viên, 2007), được sự đồng ý của giáo viên hướng dẫn tôi đã chọn 9 thực hiện đề tài: “Nghiên cứu tác dụng của các chế phẩm từ hạt keo giậu (Leucaena leucocephala) đến khả năng trị bệnh giun ký sinh trong ruột các loài cá nước ngọt”. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Xác định khả năng diệt giun ký sinh trong ruột các loài cá nước ngọt của các chế phẩm từ hạt keo giậu. - Tìm ra liều lượng và phương pháp tối ưu cho việc chữa trị các bệnh có liên quan đến bệnh giun sán. - Góp phần hạn chế việc sử dụng hoá chất trong phòng trị bệnh cho động vật thủy sản. 10