Tạp chí Khoa học – Công nghệ Thủy sản: Số 3/2017

Tạp chí Khoa học – Công nghệ Thủy sản: Số 3/2017 trình bày ảnh hưởng của mật độ đến sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng nổi điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852); đánh giá khả năng nuôi thuần dưỡng trong điều kiện lưu giữ ngoại vi loài hải sâm vú (Holothuria fuscogilva), hải sâm lựu (Thelenota ananas) phân bố ở vùng biển Bình Thuận; ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng nổi điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852)...

Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 MỤC LỤC THƠNG BÁO KHOA HỌC Ảnh hưởng mật độ đến sinh trưởng tỉ lệ sống ấu trùng điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852) Phùng Bảy, Tôn Nữ Mỹ Nga, Võ Hồng Phương Phân lập, tuyển chọn nấm men từ trái địa phương thử nghiệm lên men dịch xoài Nguyễn Thị Thanh Hải, Đỗ Thị Ánh Hòa Đánh giá khả nuôi dưỡng điều kiện lưu giữ ngoại vi loài hải sâm vú (Holothuria fuscogilva), hải sâm lựu (Thelenota ananas) phân bố vùng biển Bình Thuận 17 Đặng Ngọc Hảo, Tôn Nữ Mỹ Nga, Nguyễn Văn Hùng Thử nghiệm cảm nhiễm bào tử perkinsus olseni vào nghêu bến tre (Meretrix lyrata) phương pháp ngâm 23 Phạm Quốc Hùng, Nguyễn Thị Hồng Nhung Điều tra nguồn lợi hai loài hải sâm vú (Holothuria fuscogilva Cherbonnier, 1980), hải sâm lựu (Thelenota ananas Jaeger, 1833) phân bố vùng biển Khánh Hịa, Bình Thuận 28 Nguyễn Văn Hùng, Tơn Nữ Mỹ Nga, Đặng Ngọc Hảo Điều khiển robot ba bánh sử dụng điều PID 36 Trần Văn Hùng, Nguyễn Văn Hân Ảnh hưởng chế độ cho ăn đến hoạt động enzym tiêu hóa ấu trùng cá giị (Rachycentron canadum Linnaeus, 1766) 42 Nguyễn Quang Huy, Elin Kjørsvik Thực trạng ngư cụ hoạt động khai thác thủy sản Đầm Nại, tỉnh Ninh Thuận 49 Nguyễn Trọng Lương, Nguyễn Đức Sĩ, Lê Xuân Tài Ảnh hưởng thức ăn đến sinh trưởng tỉ lệ sống ấu trùng điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852) 57 Tôn Nữ Mỹ Nga, Phùng Bảy Biến động phân bố số lượng tàu thuyền khai thác nghề lưới kéo, lưới vây lưới rê xa bờ biển Nam giai đoạn 2014 - 2015 64 Nguyễn Như Sơn, Tô Văn Phương, Đinh Xuân Hùng Nghiên cứu ứng dụng hỗn hợp alcalase flavourzyme để thủy phân cá nục gai (Decapterus Russelli) thu hồi dịch đạm thủy phân 73 Đỗ Thị Thanh Thủy, Nguyễn Anh Tuấn Một số kết nghiên cứu nghề lưới rê trôi lớp tầng đáy xã Duy Vinh, huyện Duy Xuyên, tỉnh Quảng Nam 80 Hồng Văn Tính , Võ Văn Long , Vũ Kế Nghiệp , Nguyễn Như Sơn Một vài trao đổi đánh giá phát triển bền vững 87 Nguyễn Văn Quỳnh Bơi Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 THÔNG BÁO KHOA HỌC ẢNH HƯỞNG CỦA MẬT ĐỘ ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ TỈ LỆ SỐNG CỦA ẤU TRÙNG NỔI ĐIỆP QUẠT (Chlamys nobilis Reeve, 1852) EFFECT OF DENSITY ON GROWTH AND SURVIVAL RATE OF PLANKTONIC LARVAE SCALLOP (Chlamys nobilis Reeve, 1852) Phùng Bảy1, Tôn Nữ Mỹ Nga2, Võ Hồng Phương2 Ngày nhận bài: 21/7/2017; Ngày phản biện thơng qua: 30/68/2017; Ngày duyệt đăng: 25/9/2017 TĨM TẮT Thí nghiệm thực để đánh giá ảnh hưởng mật độ lên sinh trưởng tỉ lệ sống ấu trùng điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852) Ấu trùng chữ D nuôi ngày giai đoạn đỉnh vỏ, nghiệm thức mật độ khác nhau: (i) NT1 (2 con/mL), (ii) NT2 (4 con/mL), (iii) NT3 (6 con/mL), (iv) NT4 (8 con/mL) với thức ăn hỗn hợp tảo Pavlova salina + Isochrysis galbana + Chromonas sp + Dicteria sp với tỷ lệ 1:1:1:1 có bổ sung Vitamin B, C Calcium Frippack, Lansy, No Mật độ tảo 10.000 -15.000 tế bào/mL; liều lượng vitamin, calcium 0,1 g/m3/ngày, liều lượng thức ăn tổng hợp 1g/m3/ngày Số lần lặp Kết cho thấy mật độ ảnh hưởng lên sinh trưởng tỉ lệ sống ấu trùng điệp quạt Ở NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL), chiều cao vỏ ấu trùng điệp quạt 176,8µm 176,5µm, chiều dài vỏ 201,8µm 201,6 µm tỷ lệ sống 40,5% 35,5%, cao nghiệm thức cịn lại (p < 0,05) Do đó, mật độ ương ấu trùng điệp quạt thích hợp 2- con/mL Từ khóa: Chlamys nobilis, điệp quạt, mật độ, sinh trưởng, tỉ lệ sống ABSTRACT An experiment was carried out to evaluate the effect of density on growth and survival rate of scallop (Chlamys nobilis Reeve, 1852) at planktonic larval stage D’S veliger larvae were reared for days until Umbo stage, at four different density treatments: (i) NT1 (2 individuals/mL; (ii) NT2 (4 individuals/mL); (iii) NT3 (6 individuals/mL); and (iv) NT4 (8 individuals/mL) with food of algae mixture of Pavlova salina + Isochrysis galbana + Chromonas sp + Dicteria sp with a ratio of 1:1:1:1 and a supplement of Vitamin B, C and Calcium and Frippack, Lansy, No Algae density was 10,000 -15,000 cells/mL; the doses of vitamine and calcium were 0.1g/m3/day, the dose of formulated food was 1g/m3/day The number of replications was The result showed that the density affected growths and survival rates of the larvae of scallops At the NT1 (2 individuals/mL) and NT2 (4 individuals/mL), larvae’ shell heights were 176.8µm and 176.5µm, their shell lengths were 201.8µm and 201.6µm, respectively, their survival rates were 40.5% and 35.5%, respectively, higher than other treatments (p < 0.05) Therefore, the most suitable density of scallop D’S Veliger larvae for rearing was 2- individuals/mL Keywords: Chlamys nobilis, density, growth, scallop, survival rate Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III Trường Đại học Nha Trang • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản I ĐẶT VẤN ĐỀ Thịt điệp quạt có hàm lượng dinh dưỡng cao Hàm lượng protein khép vỏ điệp quạt chiếm 15%, gần tương đương với cua biển Thành phần chất có thân mềm điệp quạt xác định theo phần trăm khối lượng tươi 9,8% protein, 0,4% lipid, 1,5% khoáng, 84,2% nước Ở Việt Nam, điệp quạt Chlamys nobilis (Reeve, 1852) ba loài động vật thân mềm hai mảnh vỏ nghêu, điệp, sò huyết xuất sang nước khác [2] Điệp quạt loài phân bố rộng, từ vùng biển Bản Châu, Tứ Châu, Cửu Châu (Nhật Bản) xuống đến vùng biển phía Nam Trung Quốc, Việt Nam Indonesia Tại Việt Nam, điệp quạt phân bố tập trung chủ yếu vùng biển Bình Thuận (Tuy Phong, Hàm Tân, Phan Thiết) Ninh Thuận (Cà Ná) Sản lượng khai thác xuất điệp chiếm tỷ lệ đáng kể sản lượng nhuyễn thể khai thác xuất hàng năm nước Tuy nhiên, sản lượng điệp nói chung hay điệp quạt nói riêng ngồi tự nhiên ngày giảm dần khai thác mức người kích thước khai thác nhỏ 40 - 70mm chiếm tỷ lệ lớn, khai thác mùa sinh sản Nếu sản lượng khai thác điệp từ năm 1977 đến 1998 trung bình 17.000 đến (a) Số 3/2017 năm gần đây, sản lượng trung bình đạt khoảng gần 9.000 [1] Vì giá trị điệp mặt kinh tế dinh dưỡng nên chúng ý nghiên cứu nhiều năm Các nghiên cứu tập trung chủ yếu vấn đề phân bố điệp quạt vùng biển Việt Nam [3], đặc điểm sinh học sinh sản [6], kỹ thuật sản xuất giống nuôi thương phẩm [4] Tuy nhiên, nghiên cứu này, tỷ lệ sống ấu trùng thấp tác giả chưa sâu phân tích nguyên nhân dẫn đến tỷ lệ sống thấp giải pháp khắc phục Để bước góp phần nâng cao tỷ lệ sống tốc độ tăng trưởng, tiến tới cải tiến quy trình sản xuất giống điệp quạt, thực đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng mật độ ương đến tăng trưởng tỷ lệ sống ấu trùng điệp quạt Chlamys nobilis (Reeve, 1852) II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thời gian địa điểm nghiên cứu Thời gian nghiên cứu: 13/2/2017 26/5/2017 Địa điểm nghiên cứu: Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III Vật liệu nghiên cứu Điệp quạt (Chlamys nobilis) giai đoạn ấu trùng chữ D đến giai đoạn đỉnh vỏ (b) (c) Hình Điệp quạt trưởng thành (a), ấu trùng chữ D (b) ấu trùng đỉnh vỏ (c) Phương pháp bố trí thí nghiệm Thí nghiệm bố trí xơ nhựa tích 10 L Nước biển có độ mặn 30 ppt lọc dùng để ương ấu trùng điệp sục khí liên tục 24/24h Thí nghiệm gồm nghiệm thức mật độ sau: NT1 (2 con/mL), NT2 (4 con/mL), NT3 (6 con/mL), NT4 (8 con/mL) TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Ấu trùng đưa vào thí nghiệm giai đoạn chữ D, cho ăn lần/ ngày Thức ăn hỗn hợp tảo Pavlova salina + Isochrysis galbana + Chromonas sp + Dicteria sp với tỷ lệ 1:1:1:1 có bổ sung Vitamin B,C Calcium Frippack, Lansy, No Mật độ tảo 10.000 15.000 tế bào/mL; liều lượng vitamin, calcium 0,1g/m3/ngày, liều lượng thức ăn tổng hợp 1g/m3/ngày Nước thay 30 - 50%/ngày định kỳ ngày/ lần ấu trùng chuyển sang xô để vệ sinh đáy xơ Thí nghiệm lặp lại lần Tổng số xơ thí nghiệm 12 xơ Tốc độ tăng trưởng tỉ lệ sống ấu trùng đánh giá suốt thời gian thí nghiệm Phương pháp thu thập số liệu 4.1 Các thông số môi trường Các thông số môi trường nhiệt độ, pH đo lần/ngày, lúc 14 - Nhiệt độ đo nhiệt kế thuỷ ngân, độ xác 0,10C - Độ mặn đo trước cấp nước vào bể đo khúc xạ kế (ATAGO, thang chia từ - 100‰) với độ xác 1‰) - pH đo test pH với độ xác 0,3 4.2 Mật độ ấu trùng bể thí nghiệm Mật độ ấu trùng kiểm tra ngày lần buồng đếm động vật phù du Mỗi xô lấy mẫu (1 mL/mẫu) 4.3 Kích thước ấu trùng Kích thước ấu trùng xác định trắc vi thị kính (vật kính 10), đo ngày lần Số lượng ấu trùng đo lớn 30 cá thể Chiều cao vỏ đo từ mép vỏ phía mặt bụng đến đỉnh vỏ phía sau mặt lưng Chiều dài vỏ đo từ mép vỏ mặt sau đến mép vỏ mặt trước Cơng thức tính: Z = C x L (µm) Z kích thước, đơn vị tính µm L số vạch trắc vi thị kính C hệ số Nếu xem vật kính C = 26,92 Nếu xem vật kính 10 C = 10,6 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Số 3/2017 4.4 Mật độ tảo Mật độ tảo xác định buồng đếm Thomas Mỗi mẫu đếm lần lấy giá trị trung bình 4.5 Các cơng thức tính tốn Mật độ tảo mật độ tảo cho ăn xác định công thức: Trong đó: V2 : Thể tích nước ni tảo (mL); V1: Thể tích nước chứa ấu trùng (mL); N1: Mật độ tảo cần cho ăn (tb/mL); N2: Mật độ tảo thu hoạch từ nuôi sinh khối (tb/mL) Tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ (chiều dài vỏ) ấu trùng tính theo cơng thức (µm/ngày): Trong đó: L1 chiều cao (chiều dài) ấu trùng (µm) thời điểm t1 L2 chiều cao (chiều dài) ấu trùng (µm) thời điểm t2 Tỉ lệ sống (Ts) ấu trùng tính cơng thức: Trong đó: B số lượng cá thể thu thời điểm sau A số lượng cá thể thời điểm ban đầu Phương pháp xử lý số liệu Số liệu thu thập xử lý theo phương pháp thống kê sinh học phần mềm Microsoft Excel 2007 SPSS Version 16.0 phép phân tích phương sai yếu tố (One Way ANOVA) với mức ý nghĩa p < 0,05 để so sánh giá trị trung bình trường hợp có nhiều hai nhóm Các giá trị trình bày giá trị trung bình ± sai số chuẩn III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Các yếu tố môi trường Bảng cho thấy yếu tố môi trường q trình thí nghiệm nằm khoảng thích hợp ấu trùng Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Số 3/2017 Bảng Yếu tố mơi trường nước bể thí nghiệm cơng nghiệp Vì vậy, yếu tố pH bể ương ni điệp ổn định, phù hợp với phát triển bình thường ấu trùng Nhiệt độ (oC) 25,0- 29,0 Độ mặn (ppt) 30,0- 33,0 pH 7,9- 8,0 Theo [3], nhiệt độ từ 25 - 310C, ấu trùng phát triển biến thái sang giai đoạn chữ D bình thường Tuy nhiên, nhiệt độ thích hợp cho phát triển ấu trùng Điệp quạt 27- 290C Điệp quạt phân bố vùng có độ dao động mức 30 - 35‰ Nguồn nước dùng để thay cho ấu trùng bơm biển vào qua hệ thống lọc học dự trữ bể chứa ngày để ổn định nhiệt độ trước cho vào bể ương nuôi Nguồn nước không bị ảnh hưởng nước từ sông đổ vào nằm xa khu Ảnh hưởng mật độ lên tốc độ sinh trưởng ấu trùng điệp quạt 2.1 Ảnh hưởng mật độ khác đến chiều cao vỏ ấu trùng điệp quạt Kết nghiên cứu ảnh hưởng mật độ lên chiều cao vỏ điệp quạt trình bày Bảng Bảng cho thấy mật độ có ảnh hưởng tới chiều cao vỏ ấu trùng điệp quạt Từ ngày thứ trở đi, chiều cao vỏ ấu trùng có khác biệt nghiệm thức mật độ khác Ấu trùng mật độ con/mL có kích thước chiều cao vỏ lớn (176,8 µm) có khác biệt có ý nghĩa thống kê với nghiệm thức mật độ khác (p < 0,05) Bảng Chiều cao vỏ ấu trùng điệp quạt mật độ ương khác Chiều cao trung bình (µm) Ngày thí nghiệm (Ngày) NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL) NT3 (6 con/mL) NT4 (8 con/mL) 86,9±0,04 86,6 ± 0,32 86,6 ± 0,52 86,6 ± 0,32 106,3 ± 0,33c 103,0 ± 0,58b 99,7 ± 0,33a 98,8 ±0,46a 138,3 ± 0,46c 136,0 ± 0,58c 128,2 ± 0,39b 125,2 ± 0,12a 165,0 ± 0,35c 164,3 ± 0,66c 155,6 ± 0,23b 140,9 ± 0,67a 176,8 ± 1,35c 176,5 ± 1,09c 160,6 ± 0,30b 145,5 ±0,27a Giá trị bảng giá trị trung bình ± sai số (SE) Các chữ a,b,c,d hàng giá trị trung bình khác có ý nghĩa mặt thống kê (p < 0,05) Vậy, mật độ con/mL cho ấu trùng có chiều cao vỏ lớn (176,8 µm) 2.2 Ảnh hưởng mật độ lên tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ ấu trùng điệp Tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ ấu trùng điệp ương mật độ khác trình bày Hình Hình Tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ ấu trùng điệp quạt ương mật độ khác TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 Hình cho thấy tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ ấu trùng NT1 NT2 cao (lần lượt 11,24 11,19 µm/ngày), NT3 NT4 thấp (lần lượt 9,25 7,36 µm/ngày) Sự khác tốc độ tăng trưởng chiều cao vỏ nghiệm thức NT1 NT2 khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05), khác nghiệm thức với nghiệm thức cịn lại khác có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Vậy, nghiệm thức NT1 (mật độ con/mL) NT2 (mật độ con/mL) cho tốc độ tăng trưởng bình quân chiều cao vỏ ấu trùng cao (lần lượt 11,24 11,19 µm/ngày) so với nghiệm thức cịn lại (p < 0,05) 2.3 Ảnh hưởng mật độ lên chiều dài vỏ ấu trùng điệp Kết nghiên cứu chiều dài vỏ ấu trùng điệp ương mật độ khác trình bày Bảng Bảng cho thấy từ ngày thứ trở đi, ấu trùng NT1 NT2 (mật độ con/mL con/mL) tăng trưởng nhanh hơn, đạt chiều dài vỏ 201,8 µm 201,6 µm ngày Giữa mật độ cho chiều dài vỏ ấu trùng không khác mặt thống kê (p > 0,05) Tuy nhiên, chiều dài vỏ ấu trùng mật độ con/mL con/mL lại khác có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với ấu trùng mật độ con/mL con/mL Vậy, mật độ - con/mL cho ấu trùng có chiều dài vỏ lớn mật độ lại Bảng Chiều dài vỏ ấu trùng điệp ương mật độ khác Ngày thí nghiệm Chiều dài trung bình (μm) NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL) NT3 (6 con/mL) NT4 (8 con/mL) 116,2 ± 0,42 116,2 ± 0,36 116,3 ± 0,20 116,2 ± 0,26 133,5 ± 0,24c 133,2 ± 0,6c 130,6± 0,32b 117,8 ± 0,46a 161,3 ± 0,2c 160,1 ± 0,2c 153,8 ± 0,50b 143,0 ± 0,09a 191,6 ± 0,43c 191,3 ± 0,18c 181,2 ± 0,23b 158,2 ± 0,21a 201,8 ± 0,12c 201,6 ± 0,3c 188,9 ± 0,58b 164,6 ± 0,31a Giá trị bảng giá trị trung bình ± sai số (SE) Các chữ a, b, c, d hàng giá trị trung bình khác có ý nghĩa mặt thống kê (p < 0,05) 2.4 Ảnh hưởng mật độ lên tốc độ tăng trưởng bình quân ngày chiều dài vỏ ấu trùng điệp quạt Tốc độ tăng trưởng bình quân ngày chiều dài vỏ ấu trùng điệp quạt ương mật độ khác trình bày Hình Hình Tốc độ tăng trưởng bình quân chiều dài vỏ ấu trùng điệp quạtương mật độ khác • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 Hình cho thấy ngày thứ 9, tốc độ tăng trưởng bình quân ngày chiều dài vỏ ấu trùng điệp NT1 NT2 (mật độ con/mL) cao (lần lượt 10,70 10,67 µm/ngày) so với nghiệm thức cịn lại, sai khác có ý nghĩa (p < 0,05) Tốc độ tăng trưởng chiều dài vỏ NT1 NT2 khác khơng có ý nghĩa (p > 0,05) Từ kết nghiên cứu tăng trưởng chiều cao vỏ chiều dài vỏ ấu trùng điệp quạt thí nghiệm mật độ, ta thấy rõ mật độ ấu trùng có ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng ấu trùng điệp Mật độ cao tốc độ sinh trưởng ấu trùng chậm lại Trong thí nghiệm, mật độ con/mL, ấu trùng sinh trưởng chậm có kích thước nhỏ Điều mật độ ấu trùng cao làm cho không gian sống ấu trùng bị thu hẹp lại, dẫn đến cạnh tranh môi trường sống lớn Đồng thời, lượng thức ăn tăng lên lượng chất thải tạo nhiều, gây ức chế lên sinh trưởng ấu trùng Mật độ con/mL, ấu trùng sinh trưởng nhanh kích thước lớn Nguyễn Thị Xuân Thu (1998) Ngô Anh Tuấn (2005) cho ấu trùng điệp quạt sinh trưởng tốt ương mật độ 1- con/mL, tốt 2- con/mL Vậy, mật độ 2- con/mL, tốc độ tăng trưởng bình quân ngày chiều dài vỏ ấu trùng điệp cao mật độ lại 2.5 Ảnh hưởng mật độ đến tỷ lệ sống ấu trùng điệp quạt Bảng cho thấy tỷ lệ sống ấu trùng NT1 (mật độ con/mL) cao (40,5%) khơng có khác có ý nghĩa thống kê so với tỷ lệ sống ấu trùng NT2 (mật độ con/mL) (40,2%) (p > 0,05) Tỷ lệ sống ấu trùng NT3 (mật độ con/mL) NT4 (8 con/mL) thấp (23,7%) Bảng Tỷ lệ sống ấu trùng điệp quạt ương mật độ khác Ngày thí nghiệm Tỷ lệ sống (%) NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL) NT3 (6 con/mL) NT4 (8 con/mL) 100 100 100 100 81,5 ± 0,35 80,5 ± 0,15 75,4 ± 0,31c b 70,6 ± 0,28a 75,2 ± 0,75c 71,0 ± 0,32b 66,6 ± 0,67a 66,0 ± 0,50c 65,7 ± 1,16c 58,2 ± 0,36b 49,0 ± 0,49a 40,5 ± 0,29c 40,2 ± 0,26c 34,3 ± 0,20b 23,7 ± 0,23a c c 76,7 ± 0,61 Giá trị bảng giá trị trung bình ± sai số (SE) Các chữ a, b, c, d hàng giá trị trung bình khác có ý nghĩa mặt thống kê (p < 0,05) Như vậy, mật độ có ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ sống ấu trùng điệp quạt q trình ương ni Mật độ cao tỷ lệ sống ấu trùng điệp thấp So sánh số kết nghiên cứu trước cho kết tương tự Theo [3], mật độ ấu trùng lớn tỷ lệ sống ấu trùng giảm theo thời gian nuôi ảnh hưởng thức ăn chất thải; mật độ ương thấp khơng tốt lãng phí thức ăn, cơng chăm sóc Nghiên cứu điệp seo, Ngô Anh Tuấn (2005) tỷ lệ sống ấu trùng điệp seo thấp (< 25%) ương mật độ cao 6, 7, con/mL; mật độ thích hợp để ương ni ấu trùng điệp seo 1- con/mL, đặc biệt mật độ 2- con/mL, ấu trùng có tỷ lệ sống cao (47 - 56%) Vậy, mật độ thích hợp để ương ấu trùng điệp quạt 2- con/mL IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Sau ngày ương, ấu trùng điệp quạt NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL) đạt chiều cao vỏ 176,8 µm 176,5 µm, TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản chiều dài vỏ 201,8 µm 201,6 µm sai khác có ý nghĩa với nghiệm thức lại (6 con/mL) (p < 0,05) Chiều cao vỏ ấu trùng ương NT3 NT4 (6 con/mL con/mL) 160,6 µm 145,5 µm, chiều dài vỏ 188,9 µm 164,6 µm - Sau ngày ương, ấu trùng điệp quạt NT1 (2 con/mL) NT2 (4 con/mL) có tỷ lệ Số 3/2017 sống 40,5% 35,5% sai khác có ý nghĩa với hai nghiệm thức TN3 TN4 (p < 0,05) Tỉ lệ sống ấu trùng ương NT3 NT4 34,3% 23,7% Kiến nghị Mật độ ương ấu trùng điệp quạt thích hợp 2- con/mL TÀI LIỆU THAM KHẢO Chi cục Nuôi trồng thủy sản Bình Thuận, 2016 Xây dựng mơ hình quản lý cộng động bảo vệ, tái tạo nâng cao hiệu sử dụng nguồn lợi điệp quạt vùng biển ven bờ xã Phước Thể, huyện Tuy Phong Nguyễn Chính, 1990 Một số lồi động vật nhuyễn thể (Mollusca) có giá trị kinh tế biển Việt Nam Nhà xuất khoa học kỹ thuật Tuyển tập nghiên cứu biển - tập Viện Hải dương học Nha Trang, 1990 Nguyễn Hữu Phụng, Nguyễn Khương, 1991 Báo cáo đề tài nghiên cứu điệp quạt Ch nobilis vùng biển Thuận Hải Báo cáo khoa học lưu trữ Viện Hải dương học, Nha Trang Nguyễn Thị Xuân Thu, 1998 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo điệp quạt (Chlamys nobilis Reeve, 1852) Luận án Tiến sỹ nông nghiệp, Trường Đại học Thủy sản Nha Trang Ngô Anh Tuấn, 2005 Đặc điểm sinh học sinh sản thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo Điệp seo (Comptompallium radula Linnaeus, 1758) Luận án Tiến sĩ nông nghiệp, Đại học Thủy sản Nha Trang, Nha Trang Võ Sĩ Tuấn, 1994 Một số kết nghiên cứu sinh học sinh sản điệp quạt Chlamys nobilis (Reeve) Bình Thuận Tuyển tập Nghiên cứu biển • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 THÔNG BÁO KHOA HOÏC PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN NẤM MEN TỪ TRÁI CÂY ĐỊA PHƯƠNG VÀ THỬ NGHIỆM LÊN MEN DỊCH XOÀI ISOLATION, SELECTION OF YEASTS ASSOCIATED WITH LOCAL FRUITS AND FERMENTATION OF MANGO JUICE Nguyễn Thị Thanh Hải1, Đỗ Thị Ánh Hịa2 Ngày nhận bài: 19/7/2016; Ngày phản biện thơng qua: 15/8/2017; Ngày duyệt đăng: 25/9/2017 TÓM TẮT Sản phẩm nước trái lên men phát triển mạnh thị trường Việt Nam Việc sử dụng chủng nấm men phù hợp trình lên men nước trái vấn đề cần quan tâm Mục tiêu nghiên cứu phân lập, tuyển chọn nấm men từ loại trái địa phương thử nghiệm lên men dịch xoài 16 chủng nấm men phân lập từ mẫu trái lên men tự nhiên, nghiên cứu tuyển chọn hai chủng N11 N23 có khả chịu nồng độ đường 25%w/v, nồng độ cồn 8%v/v có khả kết lắng tốt Hai chủng tiến hành thử nghiệm lên men dịch xồi cho dịch lên men có nồng độ cồn tương ứng 4,7%v/v 4,57%v/v Kết qủa định danh giải trình tự gen 28S rRNA cho thấy chủng tuyển chọn Saccharomyces cerevisiae với độ tương đồng 99% Chủng nấm men tuyển chọn góp phần nâng cao giá trị ổn định chất lượng sản phẩm, thúc đẩy ngành sản xuất đồ uống trái lên men có độ cồn thấp phát triển Từ khóa: 28S rRNA, dịch xồi lên men, nấm men, Saccharomyces cerevisiae ABSTRACT Fermented fruit juice products are growing strongly in Vietnam market The proper use of yeast strains during fermentation of juice should be considered Isolation, selection of yeasts associated with local fruits and fermentation on mango juice have been investigated There were 16 strains of yeast isolated from natural fermented fruit samples and two selected strains are N11 and N23 They can tolerate with glucose concentration of 25% w/v, alcohol content of 8% v/v and can form aggregates These two strains were used to ferment mango juice, which produced fermented liquids with alcohol contents of 4,7% v/v and 4,57% v/v, respectively The results from the sequencing of the 28S rRNA gene showed that both selected strains were Saccharomyces cerevisiae species with an identity of 99% The selected yeasts contribute to enhance the value of products, to stabilize the quality and to promote the development of the fermented fruit drinks industry with low alcohol content Keywords: 28S rRNA, fermented mango juice, Saccharomyces cerevisiae, yeast I ĐẶT VẤN ĐỀ Hệ vi sinh vật tham gia trình lên men trái tự nhiên phức tạp nên thường cho độ cồn không cao, dễ bị nhiễm tạp, chất lượng rượu đảm bảo Cơng nghiệp lên men đại xây dựng dựa việc sử dụng chủng nấm men tuyển chọn có độ tin cậy an tồn, khả lên men tốt, Viện Cơng nghệ Sinh học Môi trường, Trường Đại học Nha Trang Trung tâm Thí nghiệm Thực hành, Trường Đại học Nha Trang TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản góp phần ổn định chất lượng sản phẩm tạo [1], [6], [7] Do đó, chủng nấm men sử dụng phổ biến công nghiệp nước lên men giới [9], [13] Các loài chủng nấm men với đặc tính khác tạo thành chất dễ bay có thành phần tỷ lệ khác sản phẩm lên men [14] Nhiều nghiên cứu cho thấy, chủng Saccharomyces cerevisiae có tính chất sinh hóa đặc trưng tuyển chọn dùng để sản xuất rượu vang từ trái có sẵn địa phương với cơng nghệ thích ứng thực đơn giản, rẻ tiền [1], [4], [9] Xoài đối tượng sản xuất rượu vang với chất lượng tương tự rượu vang nho [6], [11] Tuy nhiên, có thơng tin sản xuất rượu vang xồi, đặc biệt sản xuất rượu vang phù hợp giống xoài địa phương với chủng nấm men [12] Ở Việt Nam có nghiên cứu sử dụng chủng nấm men bánh mỳ Saccharomyces cerevisiae (Pháp) trình lên men rượu vang xoài [2] II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thu thập mẫu trái Mẫu trái (dâu, nho, xồi, vải, nhãn) khơng có chất kích thích chất phịng trừ sâu bệnh thu nhận nhà vườn thuộc tỉnh Ninh Thuận, Khánh Hòa Lâm Đồng Các mẫu trái sau thu nhận làm dập túi nilon vô trùng, ủ lên men tự nhiên giữ làm nguồn phân lập nấm men Trái có vỏ cứng loại bỏ vỏ vơ trùng, tránh tạp nhiễm sau đem làm dập Mẫu sau tuần lên men bảo quản 40C để tiến hành phân lập Phân lập làm chủng nấm men Chủng nấm men phân lập môi trường YPG (YPG: yeast extract peptone glucose medium) YPG có bổ sung g/L tartaric acid, 30 mg/mL chloramphenicol Các môi trường sử dụng thí nghiệm mơi trường Merck (Đức) 10 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Số 3/2017 Lấy 1g mẫu trái lên men pha loãng, cấy trang môi trường YPG, ủ 300C 24 - 48 Sau ủ, chọn khuẩn lạc điển hình cấy ria sang mơi trường YPG có bổ sung chloramphenicol 30 mg/l môi trường ủ điều kiện Khi khuẩn lạc phát triển tốt, cấy chuyển ống thạch nghiêng YPG bảo quản 40C chuẩn bị cho nghiên cứu [8], [9] Tuyển chọn chủng nấm men 3.1 Thí nghiệm kiểm tra khả chịu nồng độ đường chủng phân lập Chủng phân lập thử nghiệm cách nuôi cấy mật độ bình ni cấy chứa canh YPG bổ sung glucose với nồng độ 15%, 20%, 25%, 30% (w/v) 300C 48 giờ, đo mật độ quang OD540nm so sánh khả chịu nồng độ đường thử nghiệm chủng phân lập Việc tăng mật độ quang học bình ni cấy ghi nhận chứng phát triển Nồng độ đường mà tăng trưởng nấm men bị ức chế đánh giá khả chịu đựng đường nấm men [13] 3.2 Thí nghiệm kiểm tra khả chịu nồng độ cồn Chủng phân lập thử nghiệm cách nuôi cấy mật độ bình ni cấy chứa canh YPG bổ sung ethanol tinh khiết với nồng độ tương ứng 0%, 4%, 6%, 8%, 10% (v/v) 300C 48 tương tự xác định OD540nm Nồng độ rượu sinh trưởng nấm men bị ức chế đánh giá khả chịu đựng ethanol nấm men [5], [13] 3.3 Thí nghiệm kiểm tra khả kết lắng chủng lên men Nấm men nuôi cấy ống nghiệm chứa 10ml canh YPG ủ 300C 48 - 72 Sau ủ, lấy ống nghiệm lắc đều, đo chiều cao đoạn lắng ống nghiệm Nếu nấm men có khả lắng tốt ngày sau lên men, chiều cao đoạn dịch >75 % chiều cao khối môi trường lên men Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 sửa chữa máy móc chuyến biển (nếu có) (DT - CP)0,1 chi phí sửa chữa ngư cụ + Lương thuyền viên: hạch toán sau chuyến biển, tính theo biểu thức (7) LTV = L/n = LN(1 – 0,3 – 0,35)/n (7) Trong đó: L tổng lương tồn tàu; LTV lương thuyền viên LTV với thuyền viên; n số thuyền viên; 0,3LN khấu hao tàu, máy; 0,35LN khấu hao ngư cụ; LN lợi nhuận + Hiệu nghề (Q, Tấn/Km3) [3,5]: tỷ số sản lượng cá khai thác với cường lực nghề (khối nước ngư cụ lọc qua) chu kỳ khai thác, tính theo biểu thức: Q = P/U (8) Trong đó: U = F * S = L * H * V * T (9), cường lực nghề (khối nước ngư cụ lọc qua, Km3), F = L * H, diện tích rút gọn vàng lưới; L, H chiều dài chiều cao rút gọn vàng lưới; S = V * T, quãng đường lưới trôi; T thời gian khai thác trung bình; V tốc độ trơi trung bình lưới; Xử lý số liệu: theo phương pháp thống kê mơ tả phần mềm tốn học Excel Thời gian nghiên cứu: từ tháng 1/2015 đến 8/2015 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Kích thước vỏ tàu cơng suất máy Kết nghiên cứu 22 tàu thuộc nhóm cơng suất cho thấy, tàu thuyền nghề lưới rê lớp Duy Vinh có cơng suất máy từ 20 cv trở lên Kích thước trung bình vỏ tàu thể Bảng Bảng Kích thước trung bình vỏ tàu Kích thước trung bình vỏ tàu (m) Nhóm cơng suất (cv) Lmax Bmax Dmax 20 ÷ < 50 14,69 3,82 1,50 50 ÷ < 90 15,42 4,00 1,62 ≥ 90 cv 15,98 4,38 1,74 Phân tích số liệu Bảng cho thấy, so với quy định Nghị định 33/2010 Chính phủ quản lý hoạt động khai thác hải sản vùng biển Việt Nam [1] quy chế “Quản lý khai thác, bảo vệ phát triển nguồn lợi thủy sản địa bàn tỉnh Quảng Nam” ban hành kèm theo Quyết định số 28/2014/ QĐ-UBND ngày 20/10/2014 Ủy ban nhân dân tỉnh Quảng Nam [6], tàu thuyền nghề lưới rê lớp xã Duy Vinh thỏa mãn điều kiện hoạt động khai thác vùng lộng, vùng khơi vùng biển xa bờ Ngư trường hoạt động đối tượng khai thác Ngư trường nghề lưới rê trôi lớp tầng đáy Duy Vinh cách bờ từ 60 đến 100 hải lý, độ sâu từ 50 đến 160m nước, thuộc vùng biển tỉnh Quảng Nam Hiện có ngư trường đội tàu thường khai thác thay đổi theo thời gian năm (Bảng 3) Bảng Ngư trường hoạt động nghề lưới rê lớp Duy Vinh Tọa độ ngư trường Thời gian (Từ tháng đến tháng, âm lịch) Vĩ độ (φ) Kinh độ (λ) Tháng ÷ 16000’÷ 17030’N 108040’ ÷ 108050’E Tháng ÷ 10 15010’ ÷ 16010’N 108040’ ÷ 109000’E Tháng 10 ÷ 15050’ ÷ 16000’N 108030’ ÷ 108040’E Như vậy, ngư trường nghề lưới rê trôi lớp tầng đáy Duy Vinh thuộc vùng lộng, vùng khơi Theo quy định quản lý hoạt động khai 82 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Ghi thác thủy sản vùng biển Việt Nam nước ta, vùng biển đội tàu phép đánh bắt Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Đối tượng khai thác nghề lưới rê trôi lớp tầng đáy xã Duy Vinh chủ yếu loài cá sống tầng đáy gần đáy như: cá đổng, cá bánh đường, cá mối, Mực nang Số 3/2017 cá chai, cá lạt, trác, cá lượng, cá phèn, cá bã trầu, mực nang, ghẹ… Hình số đối tượng nghề lưới rê trôi lớp tầng đáy Cá Cá mối Cá bánh đường Hình Một số đối tượng khai thác lưới rê trơi lớp Duy Vinh Ngư cụ Kết điều tra ngư cụ 22 tàu với nhóm cơng suất: 20 ÷ < 50 cv, 50 ÷ < 90 cv, ≥ 90 cv cho thấy: - Thuyền viên tham gia đầu tư ngư cụ Lợi tức vốn đầu tư ngư cụ chi phí sửa chữa ngư cụ hạch toán theo chuyến biển tính theo tỷ lệ mức đầu tư ngư cụ người Thuyền viên chịu chi phí sửa chữa (chi phí cơng lao động chi phí vật tư) cho phần ngư cụ đầu tư - Thơng số kỹ thuật lưới nhóm tàu giống Tuy nhiên số lượng lưới tàu nhiều hay phụ thuộc nhóm cơng suất Cụ thể sau: + Chiều dài rút gọn lưới: 41,6 m + Chiều cao rút gọn lưới: 3,55 m, gồm lưới chao phao: 1,45 m, áo lưới: 1,62 m, chao chì: 0,48 m + Kích thước mắt lưới (2a): chao phao: 70 mm, chao chì: 60 mm, áo lưới giữa: 70 mm, áo lưới ngoài: 300 mm + Hệ số rút gọn ngang (U1): Tấm giữa: U1g = 0,416, ngoài: U1ng = 0,557, hệ số độ chùng α = 1,1 + Đường kính lưới (d): chao phao: d = 0,50 mm, chao chì: d = 0,75 mm, lưới lớp giữa: d = 0,25 mm, lưới lớp ngoài: d = 0,40 mm + Số lượng lưới chiều dài bình quân vàng lưới (LTBVL) tàu thể Bảng Bảng Số lượng lưới bình quân chiều dài bình qn vàng lưới (LBQVL) tàu Nhóm tàu theo cơng suất 20 ÷ < 50 cv 50 ÷ < 90 cv ≥ 90 cv Số lưới BQ tàu LBQVL/tàu 190 tấm/tàu 7.804 (m) 200 tấm/tàu 8.320 (m) 220 tấm/tàu 9.152 (m) Nghiên cứu cho thấy, số lượng lưới bình quân tàu, chiều dài bình qn vàng lưới tăng theo cơng suất máy Nghĩa là, diện tích rút gọn bình qn vàng lưới nhóm tàu cơng suất ≥ 90 cv lớn nhất, thấp nhóm tàu cơng suất 20 ÷ < 50 cv Thời gian khai thác Kết nghiên cứu 22 tàu ba nhóm cơng suất từ tháng 1/2015 đến tháng 8/2015 cho thấy, tháng nghề lưới rê trôi tầng đáy xã Duy Vinh thực chuyến biển Thời gian chuyến biển từ – 10 ngày Thời gian khai thác thực tế bình qn nhóm tàu thể bảng TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 83 Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 3/2017 Bảng Thời gian khai thác bình quân nhóm tàu (Đvt: Ngày/tàu) Thời gian khai thác bình qn nhóm tàu (Đvt: Ngày/tàu) Nhóm cơng suất (cv) Số mẫu khảo sát (tàu) Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng 20 - < 50 50 - < 90 ≥ 90 13 13,50 13,67 13,92 12,00 12,00 13,83 15,92 17,67 19,00 16,00 18,33 19,83 15,92 17,67 19,50 16,08 18,00 19,33 16,00 18,00 19,67 16,08 18,33 19,67 Số liệu bảng cho thấy, thời gian từ Thời gian đánh bắt ngày: Kết tháng 1-8/2015, thời gian hoạt động trung bình điều tra cho thấy, ngày đêm tàu (ngày/tàu) nhóm tàu khác đánh bắt mẻ lưới Thời gian trôi lưới từ - tháng Số ngày hoạt động trung bình giờ, bình quân giờ/1 mẻ Tốc độ lưới trôi: tháng tàu tăng theo công suất máy 1,2 km/giờ Bình qn tháng số ngày hoạt động Hiệu khai thác bình quân tháng nhóm tàu 5.1 Sản lượng khai thác công suất ≥ 90 cv cao (trung bình 18,1 Kết nghiên cứu sản lượng khai thác ngày/tháng), thấp nhóm tàu cơng suất 22 tàu thuộc ba nhóm cơng suất từ tháng 20 -