Đang tải... (xem toàn văn)
► Phòng nuôi cấy mô Phòng nuôi cấy mô ► Dụng cụ nuôi cấy Dụng cụ nuôi cấy ► Vật liệu nuôi cấy Vật liệu nuôi cấy ► Thao Thao tác tác nuôi nuôi cấy cấy.. Ba nhân tố đảm bảo thành. Ba nhân [r]
(1)BÀI 6:
BÀI 6:
(2)I KHÁI NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP I KHÁI NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO
NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO
II CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA PHƯƠNG II CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO
PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO
III QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ NHÂN GI III QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ NHÂN GI
(3)III.QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ
(4)Phân loại:
Phân loại: Có bốn cách ni Có bốn cách ni cấy mơ
cấy mô
Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng
Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng
Nuôi cấy chồi đỉnh
Nuôi cấy chồi đỉnh
Nuôi cấy chồi nách
Nuôi cấy chồi nách
Nuôi cấy từ chồi bất định (callus)
(5)Nuôi cấy mô tế bào có ý nghĩa nào cơng tác giống trồng?
1 Ý nghĩa (SGK):
Có thể nhân giống trồng quy mơ cơng nghiệp kể đối tượng khó nhân giống phương pháp thông thường
Hệ số nhân giống cao, tiết kiệm vật liệu giống Cho sản phẩm đồng mặt di truyền
(6)2 Quy trình cơng nghệ nhân giống bằng nuôi cấy mô tế bào:
a)
a) Chọn vật liệu nuôi cấy:Chọn vật liệu nuôi cấy:
Các mô phát triển mạnh như:
Mô phần sinh nhọn Chồi bên
Thượng tầng Đầu rễ
(7)b) Phân cắt khử trùng – vô trùng
b) Phân cắt khử trùng – vô trùng
(8)Ba nhân tố đảm bảo thành
Ba nhân tố đảm bảo thành
công cấy mô thực vật là:
công cấy mô thực vật là:
Bảo đảm điều kiện vô trùngBảo đảm điều kiện vô trùng
Chọn môi trường chuẩn bị môi Chọn môi trường chuẩn bị môi trường cách
trường cách
Chọn mơ cấy thích hợp, xử lý mơ cấy Chọn mơ cấy thích hợp, xử lý mơ cấy thích hợp trước sau cấy
(9)Dung dịch
Dung dịch Hóa chấtHóa chất Nồng độ (g/l)Nồng độ (g/l) Số ml /1 lít mtSố ml /1 lít mt A
A EDTAEDTA Fe
Fe22(SO(SO44))55
0.80 0.80 0.39 0.39 29 29 B
B NHNH44NONO55 KNO
KNO55
82.50 82.50 95 95 20 20 C
C HH55POPO44 KH
KH22P0P044 KI
KI
NaMnO
NaMnO44.2H.2H22OO
CaCl
CaCl22.6H.6H22OO
1.25 1.25 34 34 0.166 0.166 0.050 0.050 0.005 0.005 5 5 D
D MgSOMgSO44.7H.7H22OO MnSO
MnSO44.4H.4H22OO ZnSO
ZnSO44.7H.7H22OO CuSO
CuSO44.5H.5H22OO
74 74 4.45 4.45 1.72 1.72 0.005 0.005 5 5 E
E CaClCaCl22.2H.2H22OO 8989 55 F
F Thamin HClThamin HCl 0.020.02 0.1 0.1 0.1 0.1 0.4 0.4 5 5 G
G NAANAA 0.10.1 11 H
H 0.40.4 0.50.5
(10)(11)c) T o ch i môi tr ng ạ ồ ườ
nhân t o:ạ
• Ch i đ c t o nên môi tr ng ồ ượ ạ ườ
có cytokinin 0.5 – mg/l.
• M u non cho kh t o ch i cao.ẫ ả ạ ồ
• Ch i nh n ch i bên xu t hi n sau ồ ọ ồ ấ ệ
(12)(13)(14)(15)d) Tạo rễ:
Cây cấy vào mơi trường có chứa auxin
0.1 – mg/l
Cây nhúng – giây dd auxin
nồng độ cao (50 – 1000 mg/l)
Tạo rễ thường kết hợp với việc hóa
giúp làm quen với chế độ tự dưỡng.
Giảm độ ẩm từ 90% xuống 30 – 50%, dày
(16)(17)(18)(19)e) C y vào môi trấ ường
e) C y vào mơi trấ ường
thích h pợ
thích h pợ
• C y chuy n sang môi trC y chuy n sang môi trấấ ểể ườường ng
thích h p.ợ
thích h p.ợ
• Giúp thu n hóa invitro.Giúp thu n hóa invitro.ầầ
• ỔỔn đ nh s sinh trn đ nh s sinh trịị ựự ưởưởng chu n b ng chu n b ẩẩ ịị
đ a vư ườ ươn m.
(20)(21)(22)(23)f) Trồng vườn ươm
f) Trồng vườn ươm
►Cây phát triên ổn định đủ rễ, Cây phát triên ổn định đủ rễ,
chuyển sang vườn ươm.
chuyển sang vườn ươm.
►Vườn ươm cấy mô phải mát, cường Vườn ươm cấy mô phải mát, cường
độ chiếu sáng thấp, nhiệt độ khơng khí
độ chiếu sáng thấp, nhiệt độ khơng khí
mát, độ ẩm cao…
mát, độ ẩm cao…
►Rễ cũ lụi dần, rễ xuất hiện.Rễ cũ lụi dần, rễ xuất hiện.
►Phun chất kích thích lên để rút ngắn Phun chất kích thích lên để rút ngắn
thời gian rễ.
(24)(25)(26)(27)Một số thực vật ni cấy mơ điển hình
(28)(29)(30)(31)DÂU
(32)