Khảo sát độctínhvàtácdụnghướngsinhdụcnam của viên nén bao phim phối hợp cao chiết dâm dương hoắc và cao chiết mật nhân

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRƢƠNG THỊ NGỌC DIỄM KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG HƢỚNG SINH DỤC NAM CỦA VIÊN NÉN BAO PHIM PHỐI HỢP CAO CHIẾT DÂM DƢƠNG HOẮC VÀ CAO CHIẾT MẬT NHÂN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC TP Hồ Chí Minh – Năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC TP HỒ CHÍ MINH - TRƢƠNG THỊ NGỌC DIỄM KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG HƢỚNG SINH DỤC NAM CỦA VIÊN NÉN BAO PHIM PHỐI HỢP CAO CHIẾT DÂM DƢƠNG HOẮC VÀ CAO CHIẾT MẬT NHÂN Chuyên ngành: Dƣợc lý Dƣợc lâm sàng Mã số: 8720205 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS ĐỖ THỊ HỒNG TƢƠI TP Hồ Chí Minh – Năm 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu C c số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chƣa đƣợc sử dụng để công ố ất kì cơng trình nghiên cứu kh c Ngày 15 th ng 10 năm 2020 Tác giả Trƣơng Thị Ngọc Diễm Khảo sát độc tính tác dụng hƣớng sinh dục nam viên nén bao phim phối hợp cao chiết Dâm dƣơng hoắc cao chiết Mật nhân Học viên: Trƣơng Thị Ngọc Diễm Thầy hƣớng dẫn: PGS TS Đỗ Thị Hồng Tƣơi TÓM TẮT Mục tiêu: Đề tài khảo sát độc tính tác động hướng sinh dục nam chuột nhắt viên nén bao phim phối hợp cao chiết Dâm dương hoắc cao chiết Mật nhân (DDH-MN) Phương pháp: Khảo sát độc tính cấp đường uống chế phẩm chuột đực cái, theo dõi tỷ lệ chết biểu độc tính 72 Tác động hướng sinh dục nam thực chuột đực gây suy sinh dục natri valproat 500 mg/kg cho uống chế phẩm liều 300 450 mg/kg ngày 14 ngày; testosteron mg/kg (Testocaps) sử dụng làm thuốc đối chứng Theo dõi cân nặng chuột hàng tuần, sau 14 ngày khảo sát trọng lượng quan sinh dục, nồng độ testosteron protein huyết tương, xác định tỷ lệ tinh trùng di động, mật độ tinh trùng tỷ lệ tinh trùng sống Độc tính bán trường diễn chế phẩm khảo sát liều 300 mg/kg 600 mg/kg, cho uống 01 lần/ngày, liên tục 28 90 ngày Ghi nhận trọng lượng thể tuần; số huyết học, chức gan thận ghi nhận vào ngày 28 90 Phân tích đại thể quan vi thể gan, thận sau 90 ngày thử nghiệm Kết quả: Viên nén bao phim DDH-MN khơng thể độc tính cấp đường uống với liều tối đa cho uống (Dmax) 50 g/kg Trên mơ hình chuột suy sinh dục nam, sau tuần điều trị, viên nén DDH-MN liều 300 450 mg/kg làm tăng tỷ lệ di động tinh trùng mật độ tinh trùng so với lô chứng bệnh, nồng độ testosteron protein huyết tương so với lô chứng bệnh Khi so sánh lô thử nghiệm, lô DDH-MN liều 300 mg/kg có nồng độ testosteron protein huyết tương sau tuần điều trị tăng có ý nghĩa thống kê 50% 24% so với trước điều trị Trong thử nghiệm khảo sát độc tính bán trường diễn, kết cho thấy việc cho chuột nhắt uống viên nén DDH-MN liều 300 600 mg/kg liên tục 28 ngày 90 ngày không ảnh hưởng lên trọng lượng thể, chức tạo máu chức gan Khi cho chuột nhắt uống liều 600 mg/kg ảnh hưởng cấu trúc vi thể gan, thận Kết luận: Viên nén DDH-MN không làm chết chuột, độc tính cấp đường uống chuột nhắt liều 50 g/kg Liều 300 mg/kg viên nén DDH-MN thể tác động hướng sinh dục nam sau tuần điều trị, tác động tương tự tác động testosteon mg/kg Liều điều trị dự kiến 300 mg/kg uống liên tục 28 90 ngày liên tục không ảnh hưởng lên trọng lượng thể, chức tạo máu, chức cấu trúc vi thể gan Sử dụng mẫu thử liều cao thời gian dài ảnh hưởng tới cấu trúc vi thể gan, thận Study on toxicity and male gonadotropic effects in mice of film-coated tablets containing a combination of extract from Epimedium spp.and extract from Eurycoma longifolia Truong Thi Ngoc Diem Assoc.Prof Do Thi Hong Tuoi Objectives: This study evaluated oral acute and subchronic toxicity as well as androgenic effects in mice of film-coated tablets containing a combination of extract from Herba Epimedii and extract from Eurycoma longifolia Jack (DDH-MN) Methods: The oral acute toxicity in male and female mice was studied on the death rate within 72 hours after being dosed Androgenic effect of DDH-MN film-coated tablets was evaluated in mice with hypogonadism induced by sodium valproate 500 mg/kg Mice were orally given DDH-MN film-coated tablets every day at the doses of 300 and 450 mg/kg for 14 days Testosterone mg/kg (Testocaps) was used as a drug reference The body weight was recorded every week At the end, serum testosterone and protein level, weight of seminal vesicles-prostate, weight of testicle, weigh of laevator ani-bulbocavernosus muscles were measued; besides, semen analysis test was performed Subchronic toxicity in healthy mice orally administrated DDH-MN film-coated tablets at the doses of 300 and 600 mg/kg for 28 and 90 days consecutively Changes in weight, hematologic indices, liver or kidney function were noticed on the day 28 and 90 Macroobservation of organs and micro-histological analysis of liver, kidney were carried out after 90-day experiment Results: This product had no oral acute toxicity in Swiss albino mice at the maximum dose of 50g/kg body weight In mouse model of hypogonadism after weeks treatment, in both doses of DDH-MN, the sperm motility ratio and sperm density increased compared to to negative group (p < 0,05), the testosterone level and protein level increased slightly compared to the control group but did not reach statistical significance (p > 0.05) When comparing in the same group at different times, DDH-MN 300 mg/kg group had testosterone level and protein level after weeks of treatment increasing by 50% and 24% compared to before treatment ( p < 0,05), the deffience in DDH-MN 450 mg/kg group had not statistically significant (p>0,05) In subchronic toxicity test, administering DDH-MN at doses of 300 mg/kg and 600 mg/kg continuously for 28 and 90 days did not affect body weight, hematopoietic function and liver function; in doses of 600 mg/kg, it can affect the microstructure of the liver and kidney Conclusions : This product had no oral acute toxicity at the maximum dose of 50g/kg body weight DDH-MN 300 mg/kg showed male gonadotropic effects after weeks of treatment and it’s similar to the effect of testosteron mg/kg At the expected therapeutic dose 300 mg/kg, DDH-MN did not affect body weight, hematopoietic function and liver function Taking this product in high doses and for a long time may affect the liver and kidney microstructure i MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH, BIỂU ĐỒ .vi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN .2 1.1 SUY SINH DỤC NAM 1 Định nghĩa 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Phân loại 1 Điều trị 1.1.4.1 Liệu pháp thay testosteron .3 1.1.4.2 Thuốc có nguồn gốc từ dƣợc liệu 1.2 VIÊN NÉN BAO PHIM PHỐI HỢP CAO CHIẾT DÂM DƢƠNG HOẮC VÀ CAO CHIẾT MẬT NHÂN 1.2.1 Công thức bào chế .5 1.2.2 Giới thiệu hai loại dƣợc liệu 2 Dâm dƣơng hoắc 1.2.2.2 Mật nhân Sơ lƣợc nghiên cứu phối hợp hai cao dƣợc liệu 10 1.3 KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH CỦA SẢN PHẨM TỪ DƢỢC LIỆU .11 1.3.1 Thử nghiệm độc tính cấp 11 1.3.2 Thử nghiệm độc tính n trƣờng diễn 14 1.4 MƠ HÌNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HƢỚNG SINH DỤC NAM .16 Đ nh gi t c dụng kiểu androgen thực nghiệm .16 1.4.2 Nghiên cứu động vật gây suy giảm sinh dục 17 1.4.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng lên hình th i quan, khả sinh sản 19 ii CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 NGUYÊN VẬT LIỆU 21 1 Mẫu thử 21 2 Động vật thử nghiệm .21 Hóa chất, thiết ị, dụng cụ 22 2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.2.1 Khảo s t độc tính cấp đƣờng uống 22 3 Khảo s t t c dụng hƣớng sinh dục nam 23 2 Khảo s t độc tính n trƣờng diễn 30 2 Phân tích kết xử lý số liệu thống kê 31 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 ĐỘC TÍNH CẤP ĐƢỜNG UỐNG 32 TÁC ĐỘNG HƢỚNG SINH DỤC NAM 32 3.2.1 Ảnh hƣởng lên trọng lƣợng chuột 33 3.2.2 Ảnh hƣởng lên trọng lƣợng c c quan sinh dục 33 3.2.3 Ảnh hƣởng lên nồng độ protein huyết tƣơng 34 3.2.4 Ảnh hƣởng lên nồng độ testosteron huyết tƣơng 36 3.2.5 Ảnh hƣởng lên tỷ lệ di động, mật độ tỷ lệ sống tinh trùng 38 3 ĐỘC TÍNH BÁN TRƢỜNG DIỄN 39 3.3.1 Các thông số chuột trƣớc thử nghiệm .39 3.3.2 Ảnh hƣởng lên trọng lƣợng chuột 40 3.3.3 Ảnh hƣởng lên chức tạo máu 41 3.3.4 Ảnh hƣởng lên chức gan, thận .43 3.3.5 Ảnh hƣởng lên đại thể c c quan 45 3.3.6 Ảnh hƣởng lên vi thể gan, thận .46 CHƢƠNG BÀN LUẬN 49 ĐỘC TÍNH CẤP ĐƢỜNG UỐNG 49 TÁC ĐỘNG HƢỚNG SINH DỤC NAM 49 4.2.1 Mơ hình gây suy giảm sinh dục natri valproat chuột nhắt 49 iii 2 T c động hƣớng sinh dục nam viên nén DDH-MN 51 ĐỘC TÍNH BÁN TRƢỜNG DIỄN 52 KẾT LUẬN .54 ĐỀ NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tên đầy đủ DDH Dâm dƣơng hoắc MN Mật nhân ĐVTN Động vật thí nghiệm ALT Alanin transaminase AST Aspartate transaminase BSA Bovine serum albumin (Al umin huyết ò) Dmax Maximum dose (Liều tối đa sử dụng mà khơng làm chết ĐVTN) ELISA Enzyme-linked Immunosorbent assay (Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme) FDA The Food and Drug Administration (Cục quản lý Thực phẩm Dƣợc phẩm Hoa Kỳ) HCT Hematocrit (Dung tích hồng cầu) HgB Hemoglobin (Nồng độ hemoglo in (huyết sắc tố) m u) LD0 Lethal dose - 0% (Liều dƣới liều chết) LD100 Lethal dose - 100% (Liều gây chết 100% ĐVTN) LD50 Lethal Dose - 50% (Liều gây chết 50% ĐVTN) MCH Mean Corpuscular Hemoglobin (Số lƣợng huyết sắc tố trung ình) MCHC Mean corpuscular Hemoglobin Concentration (Nồng độ hemoglo in trung ình hồng cầu) MCV Mean Corpuscular Volume (Thể tích trung ình hồng cầu) PLT Platelet Count (Số lƣợng tiểu cầu) RBC Red blood cell (Số lƣợng hồng cầu) RDW Red cell Distribution Width (Độ phân ố hồng cầu) TRT Testosterone Replacement Therapy (Liệu ph p thay testosteron) WBC White Blood Cell (Số lƣợng ạch cầu) v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số loại chế phẩm testosteron Hoa Kỳ Bảng 2.1 Danh mục hóa chất, thuốc thử nghiệm 22 Bảng 2.2 Danh mục trang thiết bị 22 Bảng Trọng lƣợng chuột c c lô thử nghiệm 33 Bảng 3.2 Kết trọng lƣợng tƣơng đối c c quan sinh dục 34 Bảng 3.3 Nồng độ protein huyết tƣơng lô chuột thử nghiệm 35 Bảng 3.4 Nồng độ testosteron huyết tƣơng lô chuột thử nghiệm 37 Bảng 3.5 Tỷ lệ di động, mật độ tỷ lệ sống tinh trùng 38 Bảng 3.6 Các thông số chuột trƣớc thử nghiệm 39 Bảng 3.7 Trọng lƣợng chuột lơ chuột thí nghiệm 28 ngày 40 Bảng 3.8 Trọng lƣợng chuột lơ chuột thí nghiệm 90 ngày 40 Bảng 3.9 Kết thông số hồng cầu sau 28 90 ngày thử nghiệm 42 Bảng 3.10 Kết thông số bạch cầu, tiểu cầu sau 28 90 ngày 43 Bảng 3.11 Kết thông số chức gan 44 Bảng 3.12 Kết thông số chức thận 45 Bảng 3.13 Kết phân tích vi thể cấu trúc tế bào gan 46 Bảng 3.14 Kết phân tích vi thể cấu trúc tế bào thận 47 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM Phụ lục Kết trọng lƣợng (TL) tƣơng đối túi tinh – tuyến tiền liệt (TTTTL), tinh hồn, nâng hậu mơn - hành hang (CNHM-CHH) Lô (n = 6) Sinh lý Chứng bệnh Testosteron mg/kg DDH-MN 300 mg/kg DDH-MN 450 mg/kg Trọng TL Trọng lƣợng tƣơng lƣợng Chuột TTđối CNHM TTL TT-TTL -CHH (mg) (mg/g%) (mg) 6 6 84,1 106,4 106,7 154,8 116,2 141,3 136,3 41,2 106,4 55,1 115,7 84,8 136 176,1 202,6 294,6 178,1 241,7 67,5 138,5 271 120 78,4 277,4 60,3 188,9 270,3 134,5 176 105,6 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 261,18 293,92 392,28 421,80 364,26 483,90 346,20 197,13 321,26 157,88 317,42 246,51 333,33 475,95 528,98 656,12 489,29 728,01 224,10 333,73 620,14 388,35 203,64 660,48 248,15 472,25 615,72 409,56 479,56 270,77 70,8 78,6 55,3 95,7 65,5 83,4 77,4 48,7 60,3 39,4 83,8 76,4 85,3 112,4 92,4 103,5 89,2 97,8 60,6 96,5 125,3 75,2 68,4 148,1 46,3 90,6 125,1 88,3 92,9 85,7 TL tƣơng đối CNHHCHH (mg/g%) 219,88 217,13 203,31 260,76 205,33 285,62 196,60 233,01 182,07 112,89 229,90 222,09 209,07 303,78 241,25 230,51 245,05 294,58 201,20 232,53 286,73 243,37 177,66 352,62 190,53 226,50 284,97 268,88 253,13 219,74 Trọng lƣợng tinh hoàn (mg) 217,8 204,6 201,8 241,9 175,2 169,7 146,3 136,7 166,1 141,1 175,6 138,5 224,6 193,4 214,4 206,5 216,8 201,6 177,4 205,5 238,3 204,8 173,3 203,2 137 254,9 326,4 209 228,5 191,7 TL tƣơng đối tinh hoàn (mg/g%) 676,40 565,19 741,91 659,13 549,22 581,16 371,60 654,07 501,51 404,30 481,76 402,62 550,49 522,70 559,79 459,91 595,60 607,23 588,98 495,18 545,31 662,78 450,13 483,81 563,79 637,25 743,51 636,42 622,62 491,54 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM Phụ lục Kết nồng độ protein testosteron huyết tƣơng Lô (n = 6) Sinh lý Chứng bệnh Testosteron mg/kg DDH-MN 300 mg/kg DDH-MN 450 mg/kg Chuột 6 6 Protein huyết tƣơng (mg/ml) Trƣớc điều Sau điều trị trị 1,65 1,92 1,79 1,31 4,02 2,07 1,18 2,03 1,29 1,88 1,05 1,85 1,43 0,89 1,69 1,43 1,73 1,96 1,69 1,96 1,62 0,97 1,69 1,87 1,72 1,92 1,78 3,17 1,90 2,19 1,63 2,04 1,78 1,89 1,66 1,80 1,68 2,01 1,76 1,95 1,80 2,00 1,53 2,00 1,75 2,03 1,62 2,04 1,82 1,99 1,69 1,94 2,16 2,03 1,69 2,05 1,72 1,59 1,49 1,54 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Testosteron huyết tƣơng (ng/ml) Trƣớc điều trị Sau điều trị 0,93 1,94 1,77 0,75 2,04 0,75 0,33 0,41 0,79 0,49 1,10 0,62 0,56 0,67 1,08 0,31 0,61 0,49 0,58 0,55 0,79 0,38 0,47 0,31 0,34 0,56 0,79 0,38 0,91 0,83 1,00 1,35 2,42 1,64 2,96 1,33 0,91 0,54 0,64 0,74 0,68 0,17 1,22 1,79 1,27 3,57 0,77 0,72 0,83 0,90 0,72 0,71 0,85 0,63 0,65 0,34 1,28 0,45 0,77 0,42 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM Phụ lục Kết tỷ lệ di động, mật độ tỷ lệ sống tinh trùng Tỷ lệ di động (%) Lô (n = 6) Sinh lý Chứng bệnh Testosteron mg/kg DDH-MN 300 mg/kg DDH-MN 450 mg/kg Chuột NP+PR 6 6 148 21 17 13 25 21 10 38 18 15 19 18 18 15 24 13 26 18 23 12 18 14 11 23 16 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Số lƣợng 306 236 239 268 248 269 283 205 202 248 261 246 235 213 205 210 222 248 264 209 228 226 223 243 214 200 238 220 244 211 Tỷ lệ (%) 48,37 8,90 7,11 4,85 10,08 2,97 7,42 4,39 0,99 0,00 2,30 4,07 16,17 8,45 7,32 9,05 8,11 7,26 5,68 11,48 5,70 11,50 8,07 9,47 5,61 9,00 5,88 5,00 9,43 7,58 Mật độ (x106/ml) Tỷ lệ sống (%) 11,55 13,65 14,90 10,65 12,58 12,08 7,23 1,59 2,74 2,01 3,33 5,83 6,37 10,05 12,08 11,18 9,45 5,14 6,30 5,36 7,40 7,60 5,93 5,23 3,16 13,65 11,03 7,40 8,35 7,80 77,45 72,81 65,60 66,15 78,45 85,34 84,21 82,35 68,69 61,84 81,61 78,38 67,19 77,17 63,49 62,73 72,18 51,81 61,17 64,29 73,68 76,77 64,71 75,49 68,75 83,84 73,08 78,22 66,67 72,38 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 10 Phụ lục Hình ảnh túi tinh-tuyến tiền liệt, nâng hậu mơn-cơ hành hang tinh hồn chuột lô thử nghiệm Lô sinh lý Lô chứng bệnh Lô Testosteron mg/kg Lô DDH-MN 300 mg/kg Lô DDH-MN 450 mg/kg Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 11 Phụ lục Hình ảnh tinh trùng di động chuột lô thử nghiệm Lô sinh lý Lô chứng bệnh Lô Testosteron mg/kg Lô DDH-MN 300 mg/kg Lô DDH-MN 450 mg/kg Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 12 Phụ luc Hình ảnh mật độ tinh trùng lô chuột thử nghiệm Lô sinh lý Lô chứng bệnh Lô Testosteron mg/kg Lô DDH-MN 300 mg/kg Lô DDH-MN 450 mg/kg Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 13 Phụ luc 10 Hình ảnh tỷ lệ sống/chết tinh trùng lô thử nghiệm Lô sinh lý Lô chứng bệnh Lô Testosteron mg/kg Lô DDH-MN 300 mg/kg Lô DDH-MN 450 mg/kg Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 14 Phụ lục 11 Bảng theo dõi cân nặng chuột CHUỘT BẮT ĐẦU 19,9 18,3 ĐỰC 18,9 19,1 18,9 Sinh lý 21,9 18,4 CÁI 20,1 18,6 10 22,1 19,1 18,3 ĐỰC 18,4 20,8 DDH5 20,7 MN 300 14,9 mg/kg 16,1 CÁI 18,1 15,2 10 17,8 19,4 22,0 ĐỰC 19,0 22,7 DDH5 20,0 MN 600 19,1 mg/kg 17,8 CÁI 17,4 18,4 10 17,8 LÔ (n=10) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn TUẦN 22,2 22,3 20,3 20,2 20,8 19,8 19,7 19,3 21,1 20,8 29,2 26,0 25,3 27,5 28,3 24,4 23,3 21,0 20,0 23,7 27,3 29,9 27,4 29,2 28,1 24,4 18,4 25,0 24,4 19,3 n trƣờng diễn 28 ngày TUẦN 20,9 24,5 24,4 22,9 22,2 26,8 21,0 22,1 20,2 21,0 33,0 25,8 26,3 26,4 27,8 29,0 28,3 25,5 24,3 26,8 28,8 30,5 32,3 31,5 28,9 24,7 18,3 28,3 25,0 20,1 TUẦN 22,8 26,2 21,8 26,9 23,9 24,1 22,1 25,9 24,7 23,6 32,5 25,7 23,7 28,7 29,2 31,3 31,7 28,0 27,0 25,5 30,1 30,0 32,4 33,4 29,8 24,0 22,2 28,7 22,3 21,7 TUẦN 26,1 26,2 24,0 31,5 30,8 31,8 27,9 28,9 29,2 28,3 31,8 28,3 22,7 31,5 29,9 34,0 33,7 30,6 27,4 27,3 33,1 31,2 34,5 33,3 30,5 24,9 23,7 31,2 22,4 23,2 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 15 Phụ lục 12 Bảng theo dõi cân nặng chuột LÔ (n=10) ĐỰC Sinh lý CÁI ĐỰC DDHMN 300 mg/kg CÁI ĐỰC DDHMN 600 mg/kg CÁI n trƣờng diễn 90 ngày MÃ T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12 22,5 25,3 26,9 25,0 26,5 30,6 33,0 40,5 41,2 41,5 39,7 41,6 44,3 19,4 24,0 26,6 24,0 34,5 34,0 37,5 41,6 41,3 41,2 42,9 44,0 47,8 21,4 24,7 25,6 27,0 26,9 31,2 37,0 42,8 41,5 41,9 43,5 44,6 45,3 18,7 24,5 26,6 27,8 30,6 33,9 36,5 37,4 37,5 39,2 39,3 39,6 41,8 19,6 26,5 27,6 26,7 30,6 31,7 32,1 34,0 36,1 39,8 39,5 39,5 44,6 20,2 23,6 24,4 28,5 30,3 31,2 31,5 36,6 40,0 40,8 42,0 43,4 47,1 18,5 24,3 26,7 23,8 27,7 28,6 26,1 27,2 29,1 32,4 34,0 37,0 38,1 20,7 21,9 24,8 25,5 29,4 29,9 28,2 30,3 32,1 34,1 33,5 36,5 36,8 18,8 23,7 25,2 26,4 29,0 30,1 28,4 32,5 34,5 37,9 39,5 40,1 39,6 10 20,4 24,5 25,3 26,9 27,8 31,1 27,5 25,2 30,5 35,4 39,2 41,2 43,1 22,7 28,7 30,1 31,7 36,7 38,5 41,4 39,4 40,0 38,8 41,2 42,8 44,1 13,8 23,4 24,2 23,0 27,4 27,3 29,3 32,3 34,3 34,0 34,4 35,2 37,0 17,2 20,3 20,5 22,2 30,2 31,8 33,8 34,7 36,0 35,8 37,4 41,1 42,3 21,3 26,2 29,4 30,9 32,2 29,0 33,0 35,5 37,0 37,9 38,0 39,2 38,7 16,8 20,8 20,1 22,8 27,3 26,8 28,4 32,7 37,5 37,8 39,7 40,9 43,0 17,8 15,2 23,7 20,2 24,8 20,5 24,8 18,3 27,0 22,2 28,1 22,4 30,0 27,0 31,0 29,0 33,1 32,4 32,1 31,0 33,4 33,8 33,4 35,5 36,2 37,5 12,8 18,5 21,2 22,2 24,8 26,3 29,4 31,1 34,7 35,3 37,0 37,7 40,5 21,7 24,5 27,8 28,8 31,3 33,7 35,5 36,8 37,1 40,3 43,3 43,8 44,8 10 17,3 24,0 26,5 27,7 29,4 29,0 31,2 31,5 32,6 32,0 33,7 33,3 36,3 20,1 23,1 26,7 28,1 29,7 32,7 34,4 36,2 37,4 39,4 42,4 44,7 45,8 20,8 26,2 30,1 29,4 30,3 28,8 30,0 33,5 38,8 36,4 36,8 36,0 39,4 16,7 21,1 24,8 27,8 27,7 27,4 30,8 32,0 39,2 38,0 40,0 39,0 43,2 20,1 26,5 30,8 26,7 27,1 27,7 29,3 31,5 32,4 32,2 31,9 31,7 34,8 20,5 24,9 26,7 27,4 29,8 30,9 31,7 34,3 36,0 38,4 40,3 43,7 46,3 17,0 26,8 32,3 32,2 32,8 28,2 33,0 33,0 35,8 35,8 36,0 37,1 40,2 14,0 18,2 15,5 18,0 20,8 20,2 24,4 27,0 28,0 28,0 29,2 30,0 37,4 15,3 24,7 30,3 28,3 32,7 31,8 34,3 33,0 28,0 29,0 32,0 34,0 41,0 16,5 21,8 25,4 25,7 28,7 29,0 33,0 36,0 36,3 37,4 38,2 39,7 35,3 10 16,3 17,1 20,5 20,7 24,8 22,9 26,8 30,0 32,5 32,8 32,0 32,0 41,4 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 16 Phụ lục 13 Kết cơng thức máu chuột thử nghiệm LƠ ĐỰC Sinh lý trƣớc thử nghiệm CÁI ĐỰC Sinh lý 28 ngày CÁI ĐỰC DDHMN 300 mg/kg 28 ngày CÁI DDHMN 600 mg/kg 28 ngày ĐỰC CÁI n trƣờng diễn Mã WBC (109/L) HgB (g/d L) RBC (1012/L) HCT (%) MCV (fL) MCH (pg) MCHC (g/dL) RDW (%) PLT (109/L) 2,6 4,7 3,7 4,0 4,6 3,9 3,4 3,0 3,4 10,3 10,4 11,0 10,6 9,8 7,2 7,2 11,8 10,0 6,64 6,96 6,65 6,36 6,41 5,00 4,67 6,49 5,99 37,9 37,4 37,9 38,0 35,1 26,8 24,6 39,0 36,0 57,2 53,8 57,0 59,9 54,9 53,6 52,7 60,1 60,2 15,5 14,9 16,5 16,6 15,2 14,4 15,4 18,1 16,6 27,1 27,8 29,0 27,8 27,9 26,8 29,2 30,2 27,7 19,3 20,0 17,0 22,7 23,2 22,8 18,8 16,6 19,8 634 458 633 454 687 454 508 571 527 10 4,3 10,4 6,80 36,9 54,3 15,2 28,1 19,3 516 4,8 4,5 4,8 6,0 3,5 5,4 7,9 4,0 4,2 10,8 11,2 10,8 12,4 12,2 11,4 12,6 13,2 12,2 6,84 6,76 7,09 7,68 7,36 6,93 7,86 8,10 7,67 37,5 37,6 37,2 44,1 41,8 38,8 42,6 43,8 43,0 54,9 55,7 52,6 57,5 56,9 56,0 54,3 54,1 56,1 15,7 16,5 15,2 16,1 16,5 16,4 16,0 16,2 15,9 28,8 29,7 29,0 28,1 29,1 29,3 29,5 30,1 28,3 21,1 18,0 19,6 16,7 20,5 15,4 19,6 16,8 17,8 1087 559 1400 879 750 609 971 665 693 10 5,2 12,7 8,07 44,3 54,9 15,7 28,6 18,4 551 10 5,3 8,1 4,8 5,8 5,5 6,4 5,4 4,9 5,0 6,4 5,1 6,2 6,5 6,7 6,2 6,3 5,1 12,8 11,5 12,7 11,6 12,8 13,1 10,3 9,6 11,5 13,4 8,4 12,1 11,9 11,5 12,4 11,8 12,1 7,44 7,33 7,98 7,14 8,13 8,07 7,12 6,63 7,45 8,96 5,82 6,99 7,86 7,33 7,66 7,21 7,93 42,1 36,2 41,4 40,1 42,1 44,0 36,1 31,6 39,1 44,1 28,8 39,9 39,8 38,1 42,8 39,2 39,3 56,6 49,5 51,9 56,2 51,8 54,6 50,8 47,7 52,5 49,3 49,5 57,1 50,7 52,0 56,0 54,4 49,6 17,2 15,6 15,9 16,2 15,7 16,2 14,4 14,4 15,4 14,9 14,4 17,3 15,1 15,6 16,1 16,3 15,2 30,4 31,7 30,6 28,9 30,4 27,7 28,5 30,3 29,4 30,3 29,1 30,3 29,8 30,1 28,9 30,1 30,7 16,6 21,4 16,2 17,0 17,0 16,1 19,1 19,0 19,1 20,0 18,3 15,4 20,0 16,7 16,2 20,5 21,7 990 757 859 826 797 911 659 724 790 592 849 835 945 748 801 886 686 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 17 ĐỰC Sinh lý 90 ngày CÁI ĐỰC DDHMN 300 mg/kg 90 ngày CÁI ĐỰC DDHMN 600 mg/kg 90 ngày CÁI 10 10 10 10 11,2 7,0 5,4 7,5 6,9 7,2 6,7 7,7 6,7 4,0 9,9 7,6 9,9 7,5 10,6 8,5 11,0 12,8 7,6 10,7 7,1 6,1 12,6 8,0 5,2 11,2 9,7 6,6 6,3 7,3 9,5 11,2 9,3 13,6 11,3 13,8 13,1 11,4 10,6 11,9 14,4 11,3 12,0 14,5 11,4 12,5 13,2 13,3 13,0 11,7 12,8 14,3 13,2 13,4 12,7 14,0 14,0 12,2 13,9 14,3 12,9 12,2 13,7 13,4 13,2 14,0 8,97 7,09 8,78 8,73 7,19 7,36 7,84 9,35 8,28 7,69 9,37 7,36 8,25 8,94 8,32 7,99 7,59 8,50 8,87 9,09 8,49 8,19 8,99 9,26 7,83 9,41 9,58 9,05 8,17 9,41 9,09 8,97 8,91 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 45,4 37,7 45,6 47,9 43,1 39,8 42,8 51,9 40,1 46,4 52,8 42,6 46,2 50,5 50,4 49,2 45,0 50,1 50,8 48,2 52,2 46,8 53,3 53,2 47,9 55,8 53,8 50,3 46,4 49,6 51,8 48,6 51,6 50,7 53,3 52,0 54,9 60,0 54,1 54,6 55,6 48,5 60,4 56,4 58,0 56,0 56,5 60,6 61,7 59,4 59,0 57,3 53,1 61,5 57,2 59,5 57,5 61,3 59,3 56,2 55,6 56,9 52,8 57,0 54,2 58,0 15,1 15,9 15,7 15,0 15,8 14,4 15,1 15,4 13,6 15,6 15,4 15,4 15,1 14,7 15,9 16,2 15,4 15,0 16,1 14,5 15,7 15,5 15,5 15,1 15,5 14,7 14,9 14,2 14,9 14,5 14,7 14,7 15,7 29,9 29,9 30,2 27,3 26,4 26,6 27,8 27,7 28,1 25,8 27,4 26,7 27,0 26,1 26,3 26,4 26,0 25,5 28,1 27,3 25,6 27,1 26,2 26,3 25,4 24,9 26,5 25,6 26,2 27,6 25,8 27,1 27,1 20,0 18,8 17,0 25,7 19,7 18,4 22,1 18,0 21,4 18,6 20,0 16,7 19,6 18,9 16,9 18,3 17,9 16,8 17,0 23,3 17,3 16,3 20,5 19,6 18,3 18,6 18,9 18,0 16,3 17,2 18,2 18,4 16,7 794 847 751 753 621 1250 618 972 988 463 898 619 900 875 990 943 954 722 907 883 750 713 947 1004 338 962 881 741 727 867 789 882 862 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 18 Phụ lục 14 Kết AST, ALT, Ure, creatinin thử nghiệm LÔ ĐỰC Sinh lý trƣớc thử nghiệm CÁI ĐỰC Sinh lý 28 ngày CÁI DDHMN 300 mg/kg 28 ngày DDHMN 600 ĐỰC CÁI ĐỰC Mã 10 10 10 AST (UI/mL) 86 95 93 86 68 97 165 77 117 97 119 101 101 108 100 149 116 100 86 211 95 94 78 74 84 75 80 68 84 95 50 70 99 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ALT (UI/mL) 51 89 47 43 46 56 44 41 61 31 27 28 14 36 27 68 40 53 79 59 27 41 23 28 29 48 20 16 35 40 29 26 37 n trƣờng diễn URE (mg/dL) 33 34 28 29 32 41 26 56 41 29 82 64 105 63 60 49 60 52 47 150 40 60 54 58 59 61 42 42 49 35 52 57 64 CRE (mg/dL) 0,5 0,5 0,4 0,4 0,5 0,5 0,4 0,5 0,4 0,5 0,38 0,39 0,36 0,34 0,40 0,35 0,34 0,40 0,41 0,42 0,45 0,45 0,45 0,50 0,49 0,45 0,43 0,43 0,44 0,48 0,41 0,49 0,55 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 19 mg/kg 28 ngày CÁI ĐỰC Sinh lý 90 ngày CÁI DDHMN 300 mg/kg 90 ngày DDHMN 600 mg/kg 90 ngày ĐỰC CÁI ĐỰC CÁI 10 10 10 10 77 87 87 105 96 106 120 72 72 77 86 81 83 68 72 74 86 70 100 81 74 87 81 79 81 80 92 94 90 97 75 73 88 87 76 62 95 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 37 30 32 47 31 43 48 39 44 43 40 51 49 49 36 37 44 34 46 41 45 38 49 34 36 42 50 28 30 49 38 36 29 46 35 45 30 41 47 58 52 53 40 50 51 51 56 54 50 36 55 46 56 48 54 60 60 52 70 60 42 62 41 47 47 39 42 37 40 44 61 46 52 69 0,48 0,51 0,51 0,47 0,48 0,47 0,5 0,52 0,66 0,44 0,45 0,47 0,48 0,54 0,53 0,62 0,52 0,50 0,52 0,41 0,44 0,49 0,62 0,54 0,52 0,46 0,46 0,49 0,50 0,50 0,50 0,53 0,53 0,47 0,53 0,47 0,50 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 20 Phụ lục 15 Vi thể gan chuột thử nghiệm sau 90 ngày Chuột 1: Bình thƣờng Chuột 2: Bình thƣờng Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Bình thƣờng Chuột 5: Bình thƣờng Chuột 6: Bình thƣờng Hình Vi thể cấu trúc tế bào gan chuột lô sinh lý sau 90 ngày Chuột 1: Bình thƣờng Chuột 2: Bình thƣờng Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Bình thƣờng Chuột 5: Bình thƣờng Chuột 6: Bình thƣờng Hình 2.Vi thể tế bào gan chuột uống viên nén DDH-MN 300 mg/kg sau 90 ngày Chuột 1: Bình thƣờng Chuột 2: Hoại tử quanh khoảng cửa Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Viêm quanh khoảng cửa Chuột 5: Bình thƣờng Chuột 6: Bình thƣờng Hình Vi thể tế bào gan chuột uống viên nén DDH-MN 600 mg/kg sau 90 ngày Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 21 Phụ lục 16 Vi thể thận chuột thử nghiệm sau 90 ngày Chuột 1: Bình thƣờng Chuột 2: Bình thƣờng Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 5: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 6: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Hình Vi thể cấu trúc tế bào thận chuột lô sinh lý sau 90 ngày Chuột 1: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 2: Bình thƣờng Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 5: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 6: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Hình Vi thể tế bào thận chuột uống viên nén DDH-MN 300 mg/kg sau 90 ngày Chuột 1: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 2: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 3: Bình thƣờng Chuột 4: Bình thƣờng Chuột 5: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Chuột 6: Viêm đài ể thận mạn nhẹ Hình Vi thể tế bào thận chuột uống viên nén DDH-MN 600 mg/kg sau 90 ngày Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... dục 1.2 VIÊN NÉN BAO PHIM PHỐI HỢP CAO CHIẾT DÂM DƢƠNG HOẮC VÀ CAO CHIẾT MẬT NHÂN 1.2.1 Công thức bào chế Viên nén ao phim phối hợp cao chiết Dâm dƣơng hoắc cao chiết Mật nhân đạt tiêu chuẩn sở... TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 2.1.1 Mẫu thử Viên nén bao phim phối hợp cao chiết Dâm dƣơng hoắc cao chiết Mật nhân (viên nén DDH-MN) gồm 200 mg cao chiết Dâm dƣơng hoắc, ... TẮT Mục tiêu: Đề tài khảo sát độc tính tác động hướng sinh dục nam chuột nhắt viên nén bao phim phối hợp cao chiết Dâm dương hoắc cao chiết Mật nhân (DDH-MN) Phương pháp: Khảo sát độc tính cấp đường